【正文】 布。3. 分辨率：顯微鏡或人眼能區(qū)分開兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)間的最小距離。4. 原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)指直接從生物體獲取、分離細(xì)胞后進(jìn)行首次培養(yǎng)。5. 傳代培養(yǎng)：將培養(yǎng)的細(xì)胞按照一定比例轉(zhuǎn)移至新鮮的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，這一過程叫做傳代培養(yǎng)。6. 細(xì)胞工程：細(xì)胞工程指應(yīng)用現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)的理論與技術(shù)手段，對細(xì)胞在整體、細(xì)胞器、基因等不同結(jié)構(gòu)層次進(jìn)行改造，如進(jìn)行細(xì)胞融合、核移植、基因轉(zhuǎn)移等，以獲得具有特定生物學(xué)特性的細(xì)胞。三、簡答題1. 光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡的主要區(qū)別是什么？答：光學(xué)顯微鏡用可見光照明，電子顯微鏡以電子束為成像源，二者主要的區(qū)別在于：1）成像源不同；2）透鏡不同；3）成像原理不同；4）標(biāo)本制備方法不同。2. 簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的特點(diǎn)。答：激光掃描共聚焦顯微鏡是在熒光顯微鏡的基礎(chǔ)上，加裝了激光光源和掃描裝置。與普通熒光顯微鏡相比，激光掃描共焦顯微鏡具有明顯的優(yōu)點(diǎn)：其激光光源為單色平行光，成像聚焦后焦深小，縱向分辨率高；其光學(xué)系統(tǒng)物象共扼，掃描后可得到信噪比極高的光學(xué)橫斷面，不同焦平面的光學(xué)切片經(jīng)三維重建后能得到樣品的三維立體結(jié)構(gòu)；具有高靈敏度、高分辨率和高放大倍數(shù)等特點(diǎn)，減少了光淬滅的影響。四、問答題1. 試從照明源、透鏡和成像三方面比較光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡。答題要點(diǎn)：光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡的主要區(qū)別在于：（1）照明源的不同：光學(xué)顯微鏡采用可見光作為光源，照明部分包括反光鏡、聚光鏡和光闌。電子顯微鏡以電子束代替光源，以鎢絲作為陰極發(fā)射電子，電子收到陽極吸引而加速，加速的電子通過陽極的微孔形成電子束，構(gòu)成照明源。（2）透鏡的不同：光學(xué)顯微鏡的透鏡由物鏡和目鏡組成，每組鏡頭均有玻璃透鏡構(gòu)成。電子顯微鏡采用產(chǎn)生磁場的線圈作為電磁透鏡，以電磁場透鏡代替玻璃透鏡，并在鏡筒中保持真空。（3）成像的不同：光學(xué)顯微鏡通過目鏡和物鏡的一組玻璃透鏡將標(biāo)本上的微小物體放大。在電子顯微鏡中，標(biāo)本進(jìn)入真空鏡筒，經(jīng)聚光鏡匯聚的平行電子束被物鏡、中間鏡和投影鏡多級放大，最后在熒光屏上成像，或投射到底片上使底片感光。2. 試述基因轉(zhuǎn)移技術(shù)定義及其方法。答題要點(diǎn)：基因轉(zhuǎn)移（gene transfer）指向受體細(xì)胞中導(dǎo)入外源基因，是改造細(xì)胞遺傳性狀的常用手段。基因轉(zhuǎn)移又常稱為基因轉(zhuǎn)染（gene transfection），可分為物理學(xué)、化學(xué)和生物學(xué)三類方法。（1）物理學(xué)方法：基因轉(zhuǎn)移的物理學(xué)方法包括裸露DNA直接注射、電穿孔、基因槍、顯微注射等。（2）化學(xué)方法：基因轉(zhuǎn)移的化學(xué)方法包括磷酸鈣沉淀、DEAE－葡聚糖、脂質(zhì)體法等，是通過增加細(xì)胞膜的通透性、增加胞吞或胞飲、增加DNA與細(xì)胞的吸附等機(jī)理而實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移的。（3）生物學(xué)方法：基因轉(zhuǎn)移的生物學(xué)方法主要指病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移。根據(jù)受體細(xì)胞類型的不同，可選擇使用具有不同宿主范圍和不同感染途徑的病毒基因組作為轉(zhuǎn)染載體。目前常用的病毒載體包括DNA病毒載體（包括腺病毒載體、腺相關(guān)病毒載體）和RNA病毒載體（如逆轉(zhuǎn)錄病毒載體）等。五、綜合應(yīng)用題1. 如何運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)鑒定唐氏綜合癥患者染色體數(shù)目的畸變？答題要點(diǎn)：熒光原位雜交是在放射性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非放射性分子細(xì)胞遺傳技術(shù)，以熒光標(biāo)記取代傳統(tǒng)的同位素標(biāo)記的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導(dǎo)分子結(jié)合，雜交后再通過免疫細(xì)胞化學(xué)過程連接上熒光染料。FISH的基本原理是將DNA或RNA探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記，然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上，再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的定性、定位、相對定量分析。FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時(shí)顯示多種顏色等優(yōu)點(diǎn)。FISH在細(xì)胞遺傳學(xué)中的應(yīng)用是染色體凃染,即利用多種熒光標(biāo)記物可以使人類基因組中的23對染色體（22對常染色體以及1對性染色體X和Y）在顯微鏡下均帶有不同顏色的熒光。這一技術(shù)不僅便于篩查21三體綜合征（唐氏綜合癥, Down’s syndrome）等常見染色體遺傳病，而且還可以檢查出使用常規(guī)細(xì)胞遺傳學(xué)顯帶技術(shù)難以發(fā)現(xiàn)的微小的環(huán)狀染色體，很大程度地提高了產(chǎn)前篩查染色體遺傳病的準(zhǔn)確率。2. 如何運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)克隆貓？答題要點(diǎn)：細(xì)胞核移植是指將來自胚胎細(xì)胞或體細(xì)胞一個(gè)雙倍體的細(xì)胞核移植到去核的成熟卵母細(xì)胞或受精卵中。核移植技術(shù)首先是選取合適的受體細(xì)胞（通常為成熟卵母細(xì)胞），采用物理（如紫外線照射）或化學(xué)（如秋水仙堿）方法去除細(xì)胞核。將獲得供體細(xì)胞的核通過顯微注射技術(shù)轉(zhuǎn)移到已經(jīng)人工去核的受體細(xì)胞，施加微電流脈沖，使核質(zhì)融合，形成一個(gè)重組卵。重組卵需經(jīng)一定時(shí)間的體外培養(yǎng)，或放入中間受體動(dòng)物輸卵管內(nèi)孵育，經(jīng)過一段時(shí)間的培養(yǎng)，有的動(dòng)物需形成桑椹胚或囊胚，再植入受體子宮里。利用核移植技術(shù)，可以將成年寵物貓的體細(xì)胞作為核供體，去核的另一只母貓的卵母細(xì)胞為受體細(xì)胞，重組細(xì)胞經(jīng)體外培養(yǎng)后移植到第三只母貓的子宮，最終就可以誕生出克隆貓。一、選擇題（一）單項(xiàng)選擇題1. 有關(guān)協(xié)助擴(kuò)散的描述中，不正確的是A. 需要轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白參與 B. 轉(zhuǎn)運(yùn)速率高 C. 存在最大轉(zhuǎn)運(yùn)速度 D. 從低濃度向高濃度轉(zhuǎn)運(yùn) E. 具有可飽和性2. 存在于細(xì)胞膜上的鈉鉀泵，每消耗1分子的ATP可以A. 泵出3個(gè)鈉離子，泵進(jìn)2個(gè)鉀離子 B. 泵進(jìn)3個(gè)鈉離子，泵出2個(gè)鉀離子 C. 泵出2個(gè)鈉離子，泵進(jìn)3個(gè)鉀離子 D. 泵進(jìn)2個(gè)鈉離子，泵出3個(gè)鉀離子E. 泵進(jìn)2個(gè)鈉離子，泵出2個(gè)鉀離子 3. 腸腔中葡萄糖濃度低時(shí)，小腸上皮細(xì)胞吸收葡萄糖的過程屬于A. 簡單擴(kuò)散B. 同向協(xié)同運(yùn)輸 C. 逆向協(xié)同運(yùn)輸 D. 吞噬E. 通道蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)4. 細(xì)胞膜的化學(xué)成分主要有：A. 核酸和蛋白質(zhì) B. 糖類和蛋白質(zhì) C. 蛋白質(zhì)和脂類 D. 糖類和核酸 E. 脂類和核酸5. 乙醇進(jìn)入細(xì)胞靠下列哪種方式？A. 簡單擴(kuò)散 B. 協(xié)助擴(kuò)散 C. 主動(dòng)運(yùn)輸 D. 協(xié)同運(yùn)輸E. 通道擴(kuò)散 6. 下列具有抑制心肌細(xì)胞Na+K+泵活動(dòng)，加強(qiáng)心肌收縮的是：A. 烏苯苷 B. 細(xì)胞松弛素 C. 一氧化氮 D. 蛋白激酶 E. 二氧化碳7. 下列哪種物質(zhì)難以通過無蛋白的人工膜：A. 氨基酸 B. 丙酮 C. 尿素 D. 二氧化碳E. 苯：A. 協(xié)助擴(kuò)散 B. 胞吞 C. 胞吐 D. 協(xié)同運(yùn)輸 E. 鈣泵 A. 片層結(jié)構(gòu)模型 B. 流動(dòng)鑲嵌模型 C. 晶格鑲嵌模型 D. 板塊鑲嵌模型 E. 單位膜模型10. 造成膜電位外正內(nèi)負(fù)與以下磷脂含量有一定關(guān)系A(chǔ). 卵磷脂 B. 磷脂乙醇胺 C. 磷脂絲氨酸 D. 鞘磷脂 E. 磷脂酰肌醇11. TaySachs病患者腦組織細(xì)胞中儲(chǔ)積了大量的A. 腦苷脂 B. 硫酸腦苷脂 C. 神經(jīng)節(jié)苷脂 D. 鞘磷脂 E. 磷脂酰膽堿12. 用光脫色恢復(fù)技術(shù)可以證明膜的流動(dòng)性，其原理是（答案太長）A. 用紫外線淬滅質(zhì)膜上一部分膜受體的熒光素 B. 用激光束淬滅質(zhì)膜上一部分膜受體的熒光素C. 用紫外線淬滅膜蛋白或膜脂的熒光素 D. 用激光照射整個(gè)細(xì)胞表面，使熒光淬滅E. 以上答案都對13. 膜脂的基本成分是A. 膽固醇 B. 腦苷脂 C. 糖脂 D. 鞘磷脂 E. 磷脂14. 在細(xì)胞膜中對脂質(zhì)的物理狀態(tài)具有維持和調(diào)節(jié)作用的分子是A. 膽固醇 B. 腦苷脂 C. 糖脂 D. 鞘磷脂 E. 磷脂15. 承擔(dān)細(xì)胞膜物質(zhì)運(yùn)輸功能的主要物質(zhì)是A. 磷脂 B. 糖類 C. 蛋白質(zhì) D. 類固醇 E. 無機(jī)鹽16. 制備具有活性跨膜蛋白最常采用下列哪種試劑A. 氯化鈉 B. SDS C. NP40 D. Triton X100 E. 水 17. 關(guān)于膜蛋白，下列說法正確的是A. 膜蛋白都是兼性分子 B. 膜蛋白很難分離，均需要用去垢劑分離C. 脂錨定蛋白通過疏水鍵與脂分子結(jié)合D. 外周蛋白即可通過非共價(jià)鍵與膜脂結(jié)合，也可與膜整合蛋白結(jié)合E. 膜蛋白的運(yùn)動(dòng)方式與膜脂相同18. 膜蛋白分子的運(yùn)動(dòng)形式包括A. 側(cè)向運(yùn)動(dòng)和翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng) B. 側(cè)向運(yùn)動(dòng)和伸縮運(yùn)動(dòng)C. 側(cè)向運(yùn)動(dòng)和旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng) D. 側(cè)向運(yùn)動(dòng)和左右擺動(dòng)E. 側(cè)向運(yùn)動(dòng)和跳躍運(yùn)動(dòng)19. 人紅細(xì)胞膜ABO血型抗原的成分是A. 磷脂 B. 膽固醇 C. 糖蛋白 D. 糖脂 E. 外周蛋白20. 能增加細(xì)胞膜流動(dòng)性的因素是A. 膽固醇 B. 長鏈脂肪酸 C. 飽和脂肪酸 D. 卵磷脂/鞘磷脂的比例高E. 溫度降低21. 膜脂分子的運(yùn)動(dòng)方式少見的類型是A. 翻轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng) B. 側(cè)向運(yùn)動(dòng) C. 左右擺動(dòng) D. 旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng) E. 伸縮運(yùn)動(dòng)22. 在電子顯微鏡下，單位膜所呈現(xiàn)出的結(jié)構(gòu)是A. 一層深色帶 B. 一層淺色帶 C. 一層深色帶和一層淺色帶 D. 二層深色帶中間夾一層淺色帶 E. 二層淺色帶中間夾一層深色帶23. 家族性高膽固醇血癥的發(fā)病原因是A. 膽固醇受體數(shù)量下降 B. 低密度脂蛋白受體數(shù)量下降C. 低密度脂蛋白水平增高 D. 高密度脂蛋白水平降低E. 由其他原因造成24. 在簡單擴(kuò)散的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中，下列物質(zhì)按擴(kuò)散速度由快到慢依次應(yīng)為A. 乙醇、硝酸鈉、甘油、葡萄糖、色氨酸 B. 乙醇、甘油、葡萄糖、色氨酸、硝酸鈉 C. 乙醇、硝酸鈉、葡萄糖、甘油、色氨酸 D. 甘油、乙醇、硝酸鈉、色氨酸、葡萄糖E. 乙醇、甘油、色氨酸、葡萄糖、硝酸鈉25. 關(guān)于細(xì)胞膜中糖類的描述不正確的是A. 含量約占質(zhì)膜重量的2%～10%B. 主要以糖蛋白和糖脂的形式存在C. 低聚糖側(cè)鏈從生物膜的胞質(zhì)面伸出D. 其糖類部分對蛋白質(zhì)的性質(zhì)影響很大E. 與細(xì)胞免疫、細(xì)胞識(shí)別及細(xì)胞癌變有密切關(guān)系26. 重癥肌無力的發(fā)生與下述哪一因素有關(guān)A. 膜載體功能異常 B. 細(xì)胞連接數(shù)目減少C. 膜相關(guān)受體功能異常 D. Na+ K+泵異常E. 離子通道異常27. 通過固有性分泌途徑排出細(xì)胞的物質(zhì)是A. 激素 B. 神經(jīng)遞質(zhì) C. 細(xì)胞因子 D. 分泌蛋白 E. 消化酶28. 植物細(xì)胞和細(xì)菌的協(xié)同運(yùn)輸常利用哪一種離子的濃度梯度來驅(qū)動(dòng)A. H+ B. Na+ C. K+ D. Ca2+ E. Cl－29. 主動(dòng)運(yùn)輸與胞吞作用的共同點(diǎn)是 A. 運(yùn)輸大分子物質(zhì) B. 逆濃度梯度運(yùn)送 C. 需載體蛋白幫助 D. 有細(xì)胞膜形態(tài)和結(jié)構(gòu)的改變 E. 消耗代謝能30. 關(guān)于囊性纖維化描述正確的是A. 是一種常染色體顯性遺傳病B. 主要臨床表現(xiàn)為肺與肝臟的纖維化C. 由CFTR基因突變引起D. 其發(fā)生與陽離子通道功能障礙有關(guān)E. 患者可自愈31. 受體介導(dǎo)的胞吞作用不具有的特點(diǎn)是A. 在細(xì)胞膜的特定區(qū)域進(jìn)行 B. 形成有被小窩和有被小泡C. 吸入大量的細(xì)胞外液 D. 胞吞速率比液相胞吞快E. 選擇性的濃縮運(yùn)輸物質(zhì)32. 關(guān)于囊泡運(yùn)輸說法正確的是A. COP I囊泡介導(dǎo)蛋白質(zhì)從高爾基復(fù)合體返回至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B. COP II囊泡介導(dǎo)蛋白質(zhì)在高爾基復(fù)合體的反向運(yùn)輸C. 網(wǎng)格蛋白囊泡介導(dǎo)蛋白質(zhì)由粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基復(fù)合體方向的運(yùn)輸D. 所有的囊泡中都含有一條單肽鏈的ATP酶E. 囊泡通常含有一段特異序列可識(shí)別蛋白質(zhì)運(yùn)輸?shù)姆较?3. 關(guān)于離子通道蛋白下列描述錯(cuò)誤的是 A. 大多數(shù)的離子通道不是持續(xù)開放的，而是有閘門控制的B. 物質(zhì)運(yùn)輸?shù)乃俣缺容d體蛋白快C. 各種離子均順著其電化學(xué)梯度沿通道跨過膜 D. 通道無選擇性 E. 常見的有電壓閘門離子通道和配體閘門離子通道兩種34. 孔（道）蛋白的功能是（建議換題）A. 細(xì)胞骨架 B. 基因活化 C. 結(jié)構(gòu) D. 自我識(shí)別 E. 運(yùn)輸（二）多項(xiàng)選擇題1. 有關(guān)協(xié)助擴(kuò)散的描述中，不正確的是A. 需要ATP提供能量 B. 需要轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白參與 C. 從高濃度向低濃度轉(zhuǎn)運(yùn) D. 從低濃度向高濃度轉(zhuǎn)運(yùn)E. 可協(xié)助離子轉(zhuǎn)運(yùn) 2. 生物膜的特性包括：A. 對稱性 B. 流動(dòng)性 C. 不對稱性 D. 不流動(dòng)性 E. 以上都對 3. 下列哪種分子屬于由極性的頭部和疏水尾部構(gòu)成的兩親性分子A. 磷脂 B. 膽固醇 C. 糖脂 D. 蛋白聚糖 E. 外周蛋白 4. 鈉鉀泵的主要特點(diǎn)有A. 逆電化學(xué)梯度對向運(yùn)輸 B. 消耗能量ATPC. 鈉離子出胞