【正文】 的基因治療。由于生殖細(xì)胞的基因治療操作技術(shù)異常復(fù)雜 , 又涉及倫理緩行之理充足 , 故尚無人涉足 [13]?；蚬こ淌?20 世紀(jì)生命科學(xué)中最偉大的成績(jī) , 開辟了生命科學(xué)的新紀(jì)元。經(jīng)過幾十年的發(fā)展 , 基因工程技術(shù)已成為一個(gè)巨大的朝陽產(chǎn)業(yè) , 它可以超越動(dòng)物、植物、微生物之間的界限 , 創(chuàng)造出新的生物類型?；蚬こ滩粌H在醫(yī)學(xué)上應(yīng)用廣泛 , 而且也廣泛應(yīng)用在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、冶金、環(huán)保、資源、能源、畜牧漁業(yè)等領(lǐng)域 , 為人類的豐衣足食和健康長(zhǎng)壽提供了持續(xù)的實(shí)用價(jià)值很高的產(chǎn)品 , 發(fā)展前景極為廣闊。 參考文獻(xiàn)： [1] 陳渝軍 , 林晶 . 基因工程技術(shù)在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的應(yīng)用及發(fā)展 . 藥品評(píng)價(jià) ,2020, 2( 2) : 144 145. [2] 童克中 .基因及其表達(dá) .北京 : 科學(xué)出版社 , 2020. [3] 李尉民 , 樂寧 , 夏紅民 .轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品的風(fēng)險(xiǎn)與管理 .生物技術(shù)通報(bào) .2020(4)41 44. [4] 朱寶泉 . 基因工程技術(shù)在醫(yī)學(xué)工業(yè)中的應(yīng)用及進(jìn)展 [ J] . 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)志 .(2): 56 58. [5] 方鵬 .基因工程應(yīng)用簡(jiǎn)述 [ J] .遼寧師專學(xué)報(bào) .(2): 29 30. [6] 周黎 , 柯傳奎 .基因工程藥物研究現(xiàn)狀與對(duì)策 [ J] .生命科學(xué)儀 器 : 22. 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中的目的基因?qū)胨璧呐嘤闹参锛?xì)胞中，篩選出所需要的細(xì)胞，通過細(xì)胞的全能性將轉(zhuǎn)基因植株大規(guī) 模種植。 其中外源基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法可分為 DNA 直接轉(zhuǎn) 化和以載體為媒介的基因轉(zhuǎn)化?；虻闹苯愚D(zhuǎn)移是通過物理化學(xué)法將外源基因轉(zhuǎn)入受體植物細(xì)胞的技術(shù)。常用的方法有化學(xué)刺激法、脂質(zhì)體法、顯微注射法和基因槍法等。其原理是利用物理化學(xué)方法暫時(shí)改變膜通透性，使 DNA 進(jìn)入細(xì)胞，并最終整合到植物基因組中。 以載體為媒介的基因轉(zhuǎn)化即使通過農(nóng)桿菌或植物病毒介導(dǎo)感染受體植物將外源基因轉(zhuǎn)入植物細(xì)胞的技術(shù)。目前，載體法主要包括土壤農(nóng)桿菌 Ti 質(zhì)粒、 Ri 質(zhì)粒及植物 DNA 病毒等介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法。 2 轉(zhuǎn)基因植物的篩選與檢測(cè) 通過轉(zhuǎn)基因的方法將目的基因轉(zhuǎn)入目的植物的細(xì)胞后，轉(zhuǎn)化細(xì)胞與非轉(zhuǎn)化細(xì)胞相比都只占少數(shù)，兩者存在競(jìng)爭(zhēng)，而轉(zhuǎn)化細(xì)胞的競(jìng)爭(zhēng)力通常比非轉(zhuǎn)化細(xì)胞弱，因此必須對(duì)轉(zhuǎn)化細(xì)胞進(jìn)行篩選和檢測(cè)。 在構(gòu)建重組 DNA 時(shí)，人們已經(jīng)引入了標(biāo)記基因以對(duì)轉(zhuǎn)化子選擇和鑒定。報(bào)告基因由于其表達(dá)產(chǎn)物易于檢測(cè)，已廣泛用于轉(zhuǎn)基因植物中。根據(jù)報(bào)告基因編碼特點(diǎn)，大致分為兩類：抗性基因和編碼催化人工底物產(chǎn)生顏色變化的酶基因或發(fā)光基因。根據(jù)檢測(cè)的不同階段區(qū)分，有 DNA 檢測(cè)法、 RNA 檢測(cè)法及蛋白質(zhì)檢測(cè)法。DNA 檢測(cè)法只能檢測(cè)到外源基因是否已經(jīng)整合到植物基因組中，而 RNA 檢測(cè)法得到的結(jié)果可判定外源基因是否轉(zhuǎn)錄，蛋白質(zhì)檢測(cè)法則可檢測(cè) 出外源基因是否翻譯。 3 改進(jìn)轉(zhuǎn)基因的技術(shù) 隨著植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的創(chuàng)立和發(fā)展，許多具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的農(nóng)作物獲得了轉(zhuǎn)基因植株，植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)成為植物育種的一個(gè)重要手段，但仍有許多問題阻礙了轉(zhuǎn)基因技術(shù)在生產(chǎn)上的廣泛的應(yīng)用。將外源 DNA 導(dǎo)入植物細(xì)胞后，只有外源DNA 在宿主細(xì)胞及其子代細(xì)胞中穩(wěn)定整合和有效的表達(dá)，才能培育出具有新的遺傳性狀的轉(zhuǎn)基因植物。大量研究表明外源基因在轉(zhuǎn)基因植物中有的能正常表達(dá)，有的表達(dá)量很低，甚至不表達(dá)，而且在不同的植株個(gè)體之間也存在著明顯差異。所以提高轉(zhuǎn)基因的表達(dá)，減少轉(zhuǎn)基因的失活是轉(zhuǎn)基因技術(shù) 的一個(gè)重要內(nèi)容。 提高外源基因表達(dá)水平的措施有 : 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法由于其產(chǎn)生的拷貝數(shù)相對(duì)較少，可以在一定程度上避免這個(gè)問題。 使用信號(hào)肽，每種植物蛋白質(zhì)的作用空間位置都是不同的，蛋白質(zhì)分子的定向運(yùn)輸需要特殊多肽信號(hào)的引導(dǎo)作用。 選擇強(qiáng)啟動(dòng)子和誘導(dǎo)型啟動(dòng)子 使用強(qiáng)終止子 常用的終止子時(shí) CaMV35S 終止子和根瘤土壤桿菌 TDNA的胭脂氨基酸合成酶基因的 nos 終止子。 消除甲基化的影響 在載體上加上去甲基化功能的序列以防止甲基化。 使用植物偏愛的密碼子 使用 MAR 序列 使用增強(qiáng)子 對(duì)外源基因進(jìn)行修飾和改造 以葉綠體作為轉(zhuǎn)化受體 使用一些病毒編碼蛋白 在有性生殖后代中篩選單拷貝植株 4 基因工程在農(nóng)作物上的應(yīng)用 抗蟲轉(zhuǎn)基因作物 最早獲得的轉(zhuǎn) Bt（蘇云金桿菌）毒素基因植物是煙草和番茄，隨后 Bt 毒素基因相繼被轉(zhuǎn)化到許多其他農(nóng)作物中，如棉花、水稻、玉米等，獲得了一大批具良好抗蟲性的轉(zhuǎn)基因植物品種。 抗病毒作物 植物病毒感染時(shí)一個(gè)嚴(yán)重的問題，它可導(dǎo)致農(nóng)作物生長(zhǎng)緩慢、產(chǎn)量降低和質(zhì)量減退。轉(zhuǎn)基因植物的成功使作物抗病毒成為可能 并加速了作物抗病育種的研究進(jìn)程。自 1986 年 PowelAbel 首次將煙草花葉病毒（ TMV）外殼蛋白（ Cp）基因?qū)霟煵?，培育出?TMV 植株以來，已經(jīng)將許多 病毒成功的構(gòu)建了多種抗病毒植株，近幾年的研究結(jié)果表明病毒外殼蛋白在系統(tǒng)雜交保護(hù)中起著重要的作用，插入一段已克隆的 CP 基因可以延緩病毒的發(fā)展和阻止病毒在轉(zhuǎn)基因植株中進(jìn)一步傳播。 抗細(xì)菌和真菌作物 細(xì)菌和真菌病在全部植物病害中造成的損失最大，很多科學(xué)家都在嘗試從植物的生物體內(nèi)尋找抗病原菌的蛋白及其基因，并將其用于植物基因工程。自 1980 年，瑞典科學(xué) 家首次從美國(guó)惜古比天蠶種成功分離了 3種誘導(dǎo)型的殺菌肽進(jìn)行了深入的研究。它們對(duì)很多種植物病原菌有較強(qiáng)的殺傷作用?，F(xiàn)在的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，殺菌肽作用于細(xì)胞的細(xì)胞膜，破壞膜的完整性，造成離子通道，最終導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)含物泄露。目前，殺菌肽基因工程已經(jīng)在煙草、馬鈴薯等植物上有了初步報(bào)道。 抗除草劑轉(zhuǎn)基因作物 人類自有農(nóng)業(yè)起就一直跟雜草作斗爭(zhēng)，它是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的大敵，但由于它具有較強(qiáng)的生態(tài)適應(yīng)性和抗逆性，所以給雜草的防治帶來了困難。在大量使用化學(xué)除草劑的同時(shí)往往會(huì)對(duì)作物造成一定的傷害。為此人們?cè)谘芯靠钩輨┗?，將該基?轉(zhuǎn)入植物，在噴施除草劑殺死雜草時(shí)，不傷害作物。 20 世紀(jì) 80 年代中期，抗除草劑基因被轉(zhuǎn)入了作物體內(nèi)，從而獲得了抗除草劑的轉(zhuǎn)基因大豆、棉花、玉米、油菜、小麥等。 抗非生物脅迫作物 干旱時(shí)困擾農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要因素之一，它給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來巨大的損失，這種損失甚至是毀滅性的。 CMO 基因是合成乙酰 甜菜堿第一步反應(yīng)關(guān)鍵酶的基因，具有很強(qiáng)的抗旱性。 Rathinasabathi 等獎(jiǎng)煙草中的 CMO 基因?qū)胨局校@得抗旱性較強(qiáng)的轉(zhuǎn)基因水稻。可以相信在未來培育出的耐旱的新作物品種應(yīng)該是轉(zhuǎn)入多種共同作用的外源基因。 5 轉(zhuǎn)基 因植物的安全性 .. 5． 1 轉(zhuǎn)基因植物的優(yōu)缺點(diǎn) 關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物及其安全性問題，是近年來的熱 門話題，但目前國(guó)際上沒有統(tǒng)一說法，爭(zhēng)論不一。其主要優(yōu)點(diǎn)：①增加食物供應(yīng)，解決糧食短缺；②減少農(nóng)藥使用，避免環(huán)境污染；③降低生產(chǎn)成本，降低食物售價(jià)；④增加食物營(yíng)養(yǎng)，提高附加價(jià)值；⑤增加食物種類，提升食物品質(zhì)；⑥提高生產(chǎn)效率，帶動(dòng)相關(guān)產(chǎn)業(yè)發(fā)展。其主要缺點(diǎn)：①可能對(duì)蝴蝶等昆蟲造成傷害； ②可能影響周邊植物的生長(zhǎng)；③可能使昆蟲或病菌在演化中增加抵抗力或產(chǎn)生新的物種，因此有可能會(huì)傷害作物。 .. 5． 2 轉(zhuǎn)基因食品的安全性和可接 受性 隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因食品的安全性越來越受到人們的關(guān)注。轉(zhuǎn)基因食品與傳統(tǒng)食品相比，區(qū)別在于：首先它含有利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)導(dǎo)人的外源基因；其次可能存在外源基因在受體內(nèi)的表達(dá)產(chǎn)物。由于這兩種成分的不確定性以及由 此引起的次級(jí)效應(yīng)，對(duì)人類健康可能有潛在的危害。目前人 t fx 轉(zhuǎn)基因食品生物的擔(dān)憂基本上可以歸納為 3 類： ( 1)轉(zhuǎn)基因食品里加入的新基因無意中對(duì)消費(fèi)者造成的健康危害； ( 2)轉(zhuǎn)基因作物中的新基因?qū)κ澄镦溒渌h(huán)節(jié)無意中造成的不良后果； ( 3)人為強(qiáng)化轉(zhuǎn)基因作物的生