【正文】 解剖鏡下分離、暫養(yǎng)數(shù)日，數(shù)碼鏡下拍照； ? 整理和標(biāo)注數(shù)碼圖片； ? 查閱資料，整理和寫(xiě)作。 四、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)提示 1淡水動(dòng)物群落的演替與水質(zhì)的關(guān)系 ? 設(shè)計(jì)不同水質(zhì)環(huán)境，可以用生物方法或化學(xué)方法； ? 目的：不同生物體組成的水體對(duì)外來(lái)污染的承受和凈化能力； ? 實(shí)驗(yàn)觀察水樣內(nèi)物種類(lèi)群的變化 。對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組 1…… 實(shí)驗(yàn)組 x ? 定期檢查、記錄水體內(nèi)物種數(shù)量和種群數(shù)量 ? 定期檢測(cè)、記錄水體 pH值、透明度等。 四、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)提示 1淡水無(wú)脊椎動(dòng)物群落組成對(duì)淡水生態(tài)環(huán)境的影響 a . 取同一種水體（污染水體）；設(shè)計(jì)對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組1…… 實(shí)驗(yàn)組 x； b. 每組投放不同水生動(dòng)物類(lèi)群，或不同組合； c. 觀察水樣內(nèi)物種類(lèi)群的變化 ； d. 定期檢查、記錄水體內(nèi)物種數(shù)量和種群數(shù)量 e. 定期檢測(cè)、記錄水體 pH值、透明度等。 f. 探索完整的動(dòng)物食物鏈在抗水體富營(yíng)養(yǎng)進(jìn)程方面的作用。 四、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)提示 1渦蟲(chóng)胚胎發(fā)育過(guò)程的觀察 ? 剛剛產(chǎn)出的某種渦蟲(chóng)卵單獨(dú)培養(yǎng)； ? 每日觀察 2次，記錄顏色變化和胚胎變化； ? 數(shù)碼顯微鏡拍照記錄； ? 渦蟲(chóng)出殼、殼的外形，幼蟲(chóng)形態(tài)、大??； ? 幼蟲(chóng)出殼至產(chǎn)第一枚卵的時(shí)間； ? 產(chǎn)卵數(shù)、成蟲(chóng)體色變化； ? 成蟲(chóng)死亡時(shí)間； ? 至少觀察 10只蟲(chóng)卵。 四、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)提示 1動(dòng)物再生能力的探索 ? 水螅和三角渦蟲(chóng)有非常強(qiáng)的再生能力，其他類(lèi)群渦蟲(chóng)也有此能力嗎？ ? 大口渦蟲(chóng)屬類(lèi)群，單腸目類(lèi)群；蚯蚓； ? 設(shè)計(jì)不同切割方法，查找文獻(xiàn)； ? 參考三角渦蟲(chóng)切割方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和記錄； ? 用小型的商品蚯蚓，記錄種名，用原土、瓊脂、紗布為材料。 ? 動(dòng)物切割前 2d停止喂食。 四、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)提示 1某些水質(zhì)對(duì)低等水生動(dòng)物生長(zhǎng)的影響 * 飲用水：商品礦泉水、自然礦泉水、純凈水、飲料等； * 實(shí)驗(yàn)室用水：純水、高純水、自來(lái)水、冷開(kāi)水； * 自然水：池水、湖水、污水； * 動(dòng)物：水螅、渦蟲(chóng)、輪蟲(chóng)等； * 水體內(nèi)放入一定個(gè)數(shù)的某種動(dòng)物，觀察單位時(shí)間內(nèi)動(dòng)物的死亡率； * 水體對(duì)三角渦蟲(chóng)再生的影響；每日至少定時(shí)觀察 2次； 四、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)提示 1防止搖蚊幼蟲(chóng)在生活用水中孳生 * 自來(lái)水 * 找搖蚊幼蟲(chóng)、三角渦蟲(chóng)； * 一定大小三角渦蟲(chóng)捕食搖蚊幼蟲(chóng)數(shù)量 /日； * 放渦蟲(chóng)與不放渦蟲(chóng)水體內(nèi)搖蚊幼蟲(chóng)數(shù)量變化； * 記錄渦蟲(chóng)的捕食行為、過(guò)程和時(shí)間； * 分析渦蟲(chóng)的防蚊能力。 四、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)提示 某種渦蟲(chóng)精子形態(tài)發(fā)生比較 * 采集渦蟲(chóng)； * 配置生理鹽水； ％ NaCl； * 解剖鏡下分別取精巢、儲(chǔ)精囊，置于載波片，加 生理鹽水，蓋上蓋玻片，鏡檢、數(shù)碼拍照。 * 分析精子的不同發(fā)育期的形態(tài)結(jié)構(gòu)。 * 整理圖片，繪制生物圖，掃描儲(chǔ)存。 五、石蠟切片技術(shù) 1. 載玻片及蓋玻片的清洗 用洗衣粉液浸洗半小時(shí)，蒸餾水沖洗多次致完全無(wú)泡沫。 用 95%酒精浸泡數(shù)半小時(shí)，再次用蒸餾水沖洗。 2. 舊切片需用稀清潔液配方浸泡： 重鉻酸鉀（工業(yè)用） 2份 濃硫酸（工業(yè)用） 3份 水 50份 ? 配制事宜，先將重鉻酸鉀溶于水中（可加熱溶解），然后慢慢加入硫酸。 ? 將玻片一片一片浸入清潔液，一般浸泡 1224h。從清潔液中取出后，用水浸洗 1224h（與清潔液浸洗的時(shí)間等長(zhǎng)），中途須換幾次水，然后再浸入 95%酒精中，浸數(shù)小時(shí)到一天。取出擦干，便可應(yīng)用。 五、石蠟切片技術(shù) 2. Bouin 氏液配方 ： 苦味酸飽和水溶液 85份 福爾馬林 10份 (4%) 冰醋酸 5份 3. 鹽酸酒精 ： 配成 %濃度（體積濃度），用作染色后的分色。 鹽酸酒精配方： 鹽酸 ～ 1ml 5%的酒精 100ml 五、石蠟切片技術(shù) Mayer 氏蘇木精 此種染色液有多種配方，下列配方效果很好。 Mayer 氏蘇木精配方 ： 蘇木精 25 mg 蒸餾水 75 ml 鉀明礬（硫酸鉛鉀） g 碘酸鈉 5 mg 五、石蠟切片技術(shù) ? 配制時(shí)，碘酸鈉的量切勿多加，因?yàn)樗菑?qiáng)氧化劑，加多后反而失效。配好后可立即使用，也可置冰箱內(nèi)保存使用多時(shí)，且使用時(shí)毋需過(guò)濾。此液另一優(yōu)點(diǎn)是大大節(jié)約了蘇木精的用量。 ? 此液能使細(xì)胞核染得非常細(xì)致，尤其是對(duì)菌類(lèi)、藻類(lèi)的細(xì)胞核的染色特別有效。應(yīng)用于動(dòng)物組織的整塊染色，獲得良好效果。 五、石蠟切片技術(shù) 5. 復(fù)制曙紅 先將 5ml蒸餾水中，溶解后一滴一滴加入冰醋酸，邊滴邊攪動(dòng)，可見(jiàn)有沉淀生成，至成漿糊狀時(shí)，再加數(shù)毫升蒸餾水，繼續(xù)滴加冰醋酸至沉淀不再增加時(shí)，過(guò)濾。將沉淀物連同濾紙一起置于 5060176。 C溫箱中烘干。將烘干物溶于 100ml 95%酒精中即成。用復(fù)制曙紅染色很易染上，尤其用于動(dòng)物組織塊的整塊染色，效果很好。 五 、石蠟切片技術(shù) 6. 石蠟切片法 取材 應(yīng)盡可能采取新鮮的材料。尤其是動(dòng)物取材時(shí)，應(yīng)在殺死動(dòng)物后立刻進(jìn)行，否則組織發(fā)生死后變化（時(shí)間稍久便發(fā)生組織自溶現(xiàn)象），使制片達(dá)不到預(yù)期效果。 固定 某些材料在固定數(shù)小時(shí)后，仍需進(jìn)一步修切，即用鋒利的剃刀或刀片將 不需要的部分切除。將材料修切整齊后，再繼續(xù)固定。時(shí)間 224小時(shí)，若氣溫 4℃ 固定時(shí)間大于 12小時(shí)，氣溫 2025℃ 固定 26小時(shí)。 浸洗 固定后的材料， 75%酒精浸洗，目的在于洗去固定液。先用少量洗 2次后，再浸洗 2 次每次 30分鐘。 五、石蠟切片技術(shù) 脫水和透明 采用逐漸提高酒精濃度（ 85%一次、 95%二次、無(wú)水酒精二次、無(wú)水酒精和二甲苯各半 1次、純二甲苯 2次）每次 10分鐘來(lái)減少材料中水分的含量并脫去酒精， 這樣可避免組織過(guò)度的收縮。 浸蠟（透蠟 ） 最后一次二甲苯透明后組織塊切勿取出，在抽出上層二甲苯后，組織塊不露出液面為準(zhǔn)，再加入等量石蠟。在 50%的石蠟二甲苯液中浸蠟10min。 100%的石蠟液中浸蠟 10min。這后在烘箱中加熱石蠟半熔化狀態(tài)下浸蠟 3h,注意加蓋防止污染。 包埋 將熔化了的石蠟倒入紙盒內(nèi)少許。然后用加溫的鑷子將材料從杯蠟中取出，迅速放入紙盒內(nèi)的蠟中，加蠟淹沒(méi)組織。 五、石蠟切片技術(shù) ? 切片 ? 在切片之前需將蠟塊切小，切至材料四周剩留一小部分石蠟。切修時(shí)注意，蠟塊四邊和要切的那一面要切平，特別是被切的上下兩邊要切平行，否則，切片時(shí)切下的切片蠟帶會(huì)發(fā)生卷曲。一定要切成矩形。 ? 展片和貼片 ? 水溫 38～ 42℃ (45℃) ? 烤片 ? 首選在 3842℃ 烤片 2472小時(shí)。 ? 60℃ 表面溶化溫度烤片 1224小時(shí)。 五 、石蠟切片技術(shù) ? 染色 ? 切片取出，冷卻至室溫 ? 入純二甲苯至肉眼看不到石蠟 3分鐘左右 ? 入純二甲苯 2分鐘 ? 入純二甲苯 1分鐘 ? 二甲苯：無(wú)水乙醇 (1： 1) 2分鐘 ? 無(wú)水乙醇 3分鐘 ? 無(wú)水乙醇 2分鐘 ? 95%乙醇 2分鐘 ? 85%乙醇 2分鐘 ? 75%乙醇 2分鐘 ? 50%乙醇 2分鐘 ? 30%乙醇 2分鐘 ? 蒸餾水一 2分鐘 ? 蘇木精 3060分鐘 ? 蒸餾水二 30秒 ? %鹽酸酒精分色液 5秒 ? 蒸餾水三 3秒 ? 40ml蒸餾水加 2滴氨水 3秒 ? 蒸餾水四 5秒 ? 30%乙醇 2分鐘 ? 50%乙醇 2分鐘 ? 75%乙醇淹沒(méi)整個(gè)載玻片 5分鐘 ? 85%乙醇淹沒(méi)整個(gè)載玻片 7分鐘 五 、石蠟切片技術(shù) ? 95%乙醇淹沒(méi)整個(gè)載玻片 6分鐘 ? 曙紅 3分鐘 ? 95%乙醇淹沒(méi)整個(gè)載玻片 3秒 ? 無(wú)水乙醇淹沒(méi)整個(gè)載玻片 3分鐘 ? 無(wú)水乙醇淹沒(méi)整個(gè)載玻片 4分鐘 ? 二甲苯：無(wú)水乙醇 (1： 1) 淹沒(méi)整個(gè)載玻片 2分鐘 ? 純二甲苯淹沒(méi)整個(gè)載玻片 3分鐘 ? 純二甲苯淹沒(méi)整個(gè)載玻片 2分鐘 ? 十一、固定（封片） ? 滴一滴樹(shù)膠在組織上，加蓋蓋玻片。 ? 十二、貼標(biāo)簽 六、顯微數(shù)碼攝影與數(shù)碼圖片處理 1. 數(shù)碼顯微攝影 （操作演示） ? 普通光數(shù)碼顯微鏡的基本原理與用途及使用要點(diǎn)。 ? 相差顯微鏡的基本原理與用途及使用要點(diǎn)。 ? 暗視野顯微鏡的基本原理與用途及使用要點(diǎn)。 ? 微分干涉顯微鏡的基本原理與用途及使用要點(diǎn)。 ? 熒光顯微鏡的基本原理與用途及使用要點(diǎn)。 ? 透射電鏡與掃描電鏡的應(yīng)用范圍。 ? 數(shù)碼相機(jī)參數(shù)的設(shè)置。