《組織學(xué)緒論》ppt課件-文庫(kù)吧
2025-04-27 12:49 本頁(yè)面
【正文】 發(fā)射光檢測(cè)光路上有一個(gè)檢測(cè)針孔，檢測(cè)針孔和入射針孔的位置相對(duì)光路上有一個(gè)檢測(cè)針孔，檢測(cè)針孔和入射針孔的位置相對(duì)于物鏡的焦平面是共軛的，即所謂于物鏡的焦平面是共軛的，即所謂 “共聚焦共聚焦 ”。經(jīng)樣品反射。經(jīng)樣品反射的光通過(guò)透鏡成像，被探測(cè)器接收，再經(jīng)過(guò)光電信號(hào)轉(zhuǎn)換的光通過(guò)透鏡成像，被探測(cè)器接收，再經(jīng)過(guò)光電信號(hào)轉(zhuǎn)換在顯示屏上；圖像同時(shí)被傳送到計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)，進(jìn)在顯示屏上；圖像同時(shí)被傳送到計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)，進(jìn)行二維或三維的分析處理（行二維或三維的分析處理（ 圖圖 13）。）。（三）電子顯微鏡術(shù)（三）電子顯微鏡術(shù)n 電鏡（電鏡（ Electron Microscopy）不同于光鏡之處是用電子束代）不同于光鏡之處是用電子束代替可見(jiàn)光，用電磁場(chǎng)代替玻璃透鏡。電鏡又分為透射電鏡替可見(jiàn)光，用電磁場(chǎng)代替玻璃透鏡。電鏡又分為透射電鏡術(shù)和掃描電鏡術(shù)。術(shù)和掃描電鏡術(shù)。各種 顯 微 鏡 的分辨率與人眼的比 較分辨率人眼 mm普通光 鏡 181。m透射 電鏡 ~ nm掃 描 電鏡 nml．透射電鏡術(shù)．透射電鏡術(shù)n 透射電鏡術(shù)（透射電鏡術(shù)（ Transmission electron microscopy）?。?用電子用電子束穿透標(biāo)本，經(jīng)過(guò)電磁透鏡的會(huì)聚、放大后，在熒光屏上束穿透標(biāo)本，經(jīng)過(guò)電磁透鏡的會(huì)聚、放大后，在熒光屏上成像，直接觀察，或?qū)⒂跋裢渡涞秸障嗟灼?，制成電鏡照成像，直接觀察，或?qū)⒂跋裢渡涞秸障嗟灼?，制成電鏡照片進(jìn)行觀察。透射電鏡的分辨率可達(dá)片進(jìn)行觀察。透射電鏡的分辨率可達(dá) ～～ nm，放大倍，放大倍數(shù)從幾千倍到幾十萬(wàn)倍。由于電子束穿透力弱，電鏡標(biāo)本數(shù)從幾千倍到幾十萬(wàn)倍。由于電子束穿透力弱，電鏡標(biāo)本需制成需制成 50～～ 80 nm的超薄切片。的超薄切片。2．掃描電鏡術(shù)．掃描電鏡術(shù)n 掃描電鏡術(shù)（掃描電鏡術(shù)（ Scanning electron microscopy）） 用于觀察細(xì)胞用于觀察細(xì)胞、組織和器官表面的立體微細(xì)結(jié)構(gòu)。將小塊組織（直徑約、組織和器官表面的立體微細(xì)結(jié)構(gòu)。將小塊組織（直徑約 cm）經(jīng)固定和臨界點(diǎn)脫水干燥后，在其表面噴鍍薄層）經(jīng)固定和臨界點(diǎn)脫水干燥后，在其表面噴鍍薄層碳膜和金屬膜。掃描電鏡發(fā)射的細(xì)電子束在樣品表面按順碳膜和金屬膜。掃描電鏡發(fā)射的細(xì)電子束在樣品表面按順序逐點(diǎn)移動(dòng)掃描，使樣品表面金屬膜發(fā)射出電子（稱二次序逐點(diǎn)移動(dòng)掃描，使樣品表面金屬膜發(fā)射出電子（稱二次電子），二次電子信號(hào)被探測(cè)器收集，經(jīng)過(guò)放大，在熒光電子），二次電子信號(hào)被探測(cè)器收集，經(jīng)過(guò)放大，在熒光屏上成像。掃描電鏡的景深長(zhǎng)，圖像清晰，富有立體感。屏上成像。掃描電鏡的景深長(zhǎng)，圖像清晰，富有立體感。（四）（四） 組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)n 組織化學(xué)（組織化學(xué)（ histochemistry）和細(xì)胞化學(xué)（）和細(xì)胞化學(xué)（ cytochemistry）技）技術(shù)是應(yīng)用化學(xué)反應(yīng)原理檢測(cè)組織和細(xì)胞的化學(xué)成分并進(jìn)行術(shù)是應(yīng)用化學(xué)反應(yīng)原理檢測(cè)組織和細(xì)胞的化學(xué)成分并進(jìn)行定位和定量的技術(shù)。組織細(xì)胞中的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、定位和定量的技術(shù)。組織細(xì)胞中的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、酶等均可與相應(yīng)試劑反應(yīng)，最后形成有色反應(yīng)終產(chǎn)核酸、酶等均可與相應(yīng)試劑反應(yīng)，最后形成有色反應(yīng)終產(chǎn)物或電子致密物，應(yīng)用光鏡或電鏡進(jìn)行觀察。物或電子致密物，應(yīng)用光鏡或電鏡進(jìn)行觀察。n 糖類物質(zhì)常用過(guò)碘酸糖類物質(zhì)常用過(guò)碘酸 Schiff反應(yīng)反應(yīng) (PAS反應(yīng)反應(yīng) )顯示（顯示（ 圖圖 14）。）。 n 脂類常用蘇丹染料、油紅脂類常用蘇丹染料、油紅 O、尼羅藍(lán)等脂溶性染料染色。、尼羅藍(lán)等脂溶性染料染色。 （五）免疫組織化學(xué)（五）免疫組織化學(xué)n 免疫組織化學(xué)是根據(jù)免疫學(xué)原理，應(yīng)用帶有可見(jiàn)標(biāo)記的特免疫組織化學(xué)是根據(jù)免疫學(xué)原理，應(yīng)用帶有可見(jiàn)標(biāo)記的特異性抗原異性抗原 抗體反應(yīng)，檢測(cè)組織、細(xì)胞中多肽和蛋白質(zhì)等抗體反應(yīng)，檢測(cè)組織、細(xì)胞中多肽和蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的一種技術(shù)。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色時(shí)，首先大分子物質(zhì)的一種技術(shù)。進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色時(shí)，首先要獲得被檢多肽或蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的抗體。其次，要要獲得被檢多肽或蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的抗體。其次，要對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記。常用的標(biāo)記物有熒光染料，如異硫氰酸對(duì)抗體進(jìn)行標(biāo)記。常用的標(biāo)記物有熒光染料，如異硫氰酸熒光素?zé)晒馑?(FITC)、得克薩斯紅、得克薩斯紅 (Texas red)；酶類，如辣根過(guò)氧；酶類，如辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶等；重金屬，如膠體金、鐵蛋白等。化物酶、堿性磷酸酶等；重金屬，如膠體金、鐵蛋白等。最后，應(yīng)用標(biāo)記抗體孵育標(biāo)本，標(biāo)記抗體即與組織細(xì)胞中最后，應(yīng)用標(biāo)記抗體孵育
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