《生物技術(shù)》ppt課件-文庫吧
2025-04-16 13:36 本頁面
【正文】 T T C C T T A A G 并切割如下： 5’ N N N N G A A T T C N N N 3’ 3’ N N N N C T T A A G N N N 5’ 限制性內(nèi)切酶 Pst I 識別序列： C T G C A G G A C G T C 并切割如下： 5’ N N N N C T G C A G N N N 3’ 3’ N N N N G A C G T C N N N 5’ 限制性內(nèi)切酶 ? 在基因工程中的運載體 ? 包括： 質(zhì)粒載體 噬菌體載體 復(fù)合載體 病毒載體 載 體 是細(xì)菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體以外的雙鏈閉合環(huán)狀分子，大小為 1200Kb，能獨立于染色體外進(jìn)行自我復(fù)制。它的拷貝數(shù)較多，每個細(xì)胞中可含 10200個拷貝。其表型效應(yīng)主要有決定抗藥性，合成抗菌素，編碼限制或修飾酶等。 質(zhì)粒載體 染色體 質(zhì)粒 pBR322 質(zhì)粒圖譜 是一種細(xì)菌病毒，可作為克隆載體。其優(yōu)點是可以在體外包裝產(chǎn)生感染性很高的噬菌體顆粒 。 噬菌體載體 噬 菌 體 頭部 尾部 尾絲 噬菌體感染細(xì)菌示意圖 病毒載體 這是一類真核載體，能把基因引入到 真核細(xì)胞中，并在其中被表達(dá)。因此是研 究真核細(xì)胞表達(dá)及調(diào)控的有力工具。如： 腺病毒、乳頭瘤病毒、皰疹病毒等。 復(fù)合載體 從生物基因組中分離得到 基因組 DNA 酶切產(chǎn)物 總 RNA mRNA cDNA 人工合成 化學(xué)合成 PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)） 分離 逆轉(zhuǎn)錄 基因工程步驟一 獲得DNA片段，取得目的基因 基因工程步驟二 DNA片段和載體 DNA在體外連接 外源 DNA 質(zhì) 粒 酶切
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