動物細(xì)胞工程 課件-文庫吧
2025-01-04 10:12 本頁面
【正文】 限增殖。 （ 1）為什么用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與 B淋巴細(xì)胞融合？ 思考 ： （ 2）單克隆抗體制備過程中應(yīng)用哪些細(xì)胞 工程技術(shù)手段？ （ 3）制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選？ 單克隆抗體的制備 抗原 小鼠 B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞融合，篩選 細(xì)胞培養(yǎng) 篩選，繼續(xù)培養(yǎng) 體外培養(yǎng) 體內(nèi)培養(yǎng) 單克隆抗體 單克隆抗體有何應(yīng)用？ ? 主要用于疾病的診斷、治療和預(yù)防。與常規(guī)抗體相比，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。如；各種癌癥、肝炎病毒、SARS病毒、細(xì)菌及血吸蟲等數(shù)百種疾病的診斷；在疾病治療方面，單克隆抗體猶如人體衛(wèi)士，能識別“自己”與“異己”，一旦發(fā)現(xiàn) 致病因素便與之結(jié)合將其殺死。若在單抗上帶上抗癌藥物制成“生物導(dǎo)彈”，將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位，既消滅了癌細(xì)胞又不會傷害健康細(xì)胞。 絕大多數(shù)的單克隆抗體 (mAb)是用小鼠開發(fā)的，雖然可作為研究和診斷的工具，但它們至少在一定程度上不是理想的治療劑，：因?yàn)樗鼈冊谌祟愔杏忻庖咴浴Ｒ簿褪钦f，小鼠抗體引入到病人體內(nèi)，將被病人的免疫系統(tǒng)識別為外源物質(zhì)，并將發(fā)生有損治療抗體利用的人抗鼠抗體 (HAMA)應(yīng)答。已經(jīng)通過將這些鼠的抗體人源化或直接制備人的 mAb來解決。 直接制備人的 mAb 通過人的 B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合， 已經(jīng)制成了人的抗體，雖然這曾是十分困難的，并且通常在融合前需要用 EB病毒感染以無限增殖 B細(xì)胞。這種方法由于使用病毒而不理想，產(chǎn)生的 mAb的特異性是有限的，抗體的產(chǎn)量也很少。最近，通過用人免疫球蛋白基因取代小鼠免疫球蛋白基因創(chuàng)建了產(chǎn)生人抗體的小鼠。因此，當(dāng)小鼠被免疫時它直接制造出對該抗原的人的抗體，并且產(chǎn)生這些抗體的 B細(xì)胞可與骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生制造人 mAb的雜交瘤。 ?因?yàn)?B淋巴細(xì)胞具有分泌特異性抗體的能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的本領(lǐng)，所以由某種 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞，能夠在體外大量繁殖，并且產(chǎn)生特定的單克隆抗體。 細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。 ?第一次篩選得到雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一
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