《節(jié)克隆技術(shù)》ppt課件-文庫(kù)吧
2025-01-03 16:00 本頁(yè)面
【正文】 有些植物在多次繼代培養(yǎng)后，會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力（ P23） ? 原因： 克隆成功所需的條件 （掌握） 、細(xì)胞全能性表達(dá)充分的基因型 染色體畸變、細(xì)胞核變異、非整倍體的產(chǎn)生 激素平衡被打破、對(duì)外源生長(zhǎng)物質(zhì)的敏感性發(fā)生改變、其他原因產(chǎn)生了缺乏成胚性的細(xì)胞系 思考： 植物細(xì)胞在什么條件下能培養(yǎng)成一個(gè)完整的植株？ 植物細(xì)胞可能表現(xiàn)出全能性 條件 （掌握） ： ④ 其他外界條件 ② 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) （水、無(wú)機(jī)鹽、維生素、氨基酸、 蔗糖、瓊脂 等） ③ 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 （細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素等） （適宜溫度、ＰＨ、無(wú)菌、 光照（后期） ） ① 離體狀態(tài) 167。 2:植物克隆的 理論基礎(chǔ) ① 離體狀態(tài)（提供能源，維持滲透壓） 思考： 植物細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)完整的植株的過(guò)程？ 思考討論：為什么體內(nèi)細(xì)胞沒(méi)有表現(xiàn)出全能性，而是分化成為不同的組織、器官？這體現(xiàn)了生物學(xué)中的一個(gè)什么學(xué)科思想？ 基因在特定空間和時(shí)間條件下 選擇性表達(dá)的結(jié)果。在個(gè)體發(fā)育的不同時(shí)期， 生物體不同部位的細(xì)胞 表達(dá)的基因是不同的， 合成的 蛋白質(zhì) 也不一樣 ， 從而形成了 不同的組織和器官。 局部和整體思想 ① 、配置固體 (半固體 )培養(yǎng)基 ②、無(wú)菌操作獲取植物組織 ③、接種、脫分化獲得愈傷組織 ④、誘導(dǎo)愈傷組織再分化，再生新植株 成分？ 167。 2:植物組織培養(yǎng)的 程序（掌握） 愈傷組織的形態(tài)發(fā)生方式有 不定芽方式和 胚狀體方式 兩種。 P22 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基 ? 定義：含有一定營(yíng)養(yǎng)成分，供組織培養(yǎng)植物生長(zhǎng)的基質(zhì) ? 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分： C， H， O大量元素及部分微量元素 ? 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 ① 含 N物質(zhì)：包括維生素和氨基酸 ② 碳源： 2%— 5%的 蔗糖（提供能量，維持滲透壓） ③ 瓊脂：凝固培養(yǎng)基的作用 ④ 激素： 生長(zhǎng)素，細(xì)胞分裂素 ⑤ PH值： － 脫分化 愈傷組織：相對(duì) 沒(méi)有分化 的活的薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生組織 再分化 調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比（ P24） 誘導(dǎo)根、芽頂端分生組織 167。 2:植物組織培養(yǎng)的 程序（掌握） 不定芽方式 離體的植物器官或組織或細(xì)胞 （外植體） 愈傷組織 細(xì)胞分裂和 脫 分化 根、芽 植物幼體 繼續(xù)發(fā)育 一棵完整的植株 細(xì)胞分裂和 再 分化 需要適宜的環(huán)境條件 植物激素： 細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素等 一定的 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 和植物 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 、一定的 溫度、空氣、無(wú)菌 環(huán)境、適合的PH、適時(shí) 光照 等。 (不需光 ) (需光 ) 167。 2:植物組織培養(yǎng)的 程序（掌握） 不定芽方式 光照問(wèn)題 : 愈傷組織細(xì)胞中有 葉綠體 嗎？ 對(duì)于植物組織培養(yǎng)來(lái)說(shuō)，光照條件非常重要，包括光照強(qiáng)度、時(shí)間和波長(zhǎng)。 但誘導(dǎo)形成愈傷組織階段的 暗培養(yǎng)有利于細(xì)胞的脫分化產(chǎn)生愈傷組織 ，如果在光照條件下容易分化產(chǎn)生維管等組織，不利于產(chǎn)生大量的愈傷組織。 由愈傷組織經(jīng)細(xì)胞有絲分裂和分化形成試管苗的過(guò)程中需要光照， 原因是葉中葉綠素的合成需要光照條件 ，實(shí)現(xiàn)由異養(yǎng) → 自養(yǎng)的轉(zhuǎn)變。 167。 2:植物組織培養(yǎng)的 程序（掌握） 脫分化 通過(guò)懸浮培養(yǎng)分散成 單細(xì)胞 細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小而細(xì)胞核大（ 胚性細(xì)胞 的特征） 再分化 調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的適當(dāng)配比 包裹人工種皮，形成人工種子 胚狀體 167。 2:植物組織培養(yǎng)的 程序（掌握） 胚狀體方式 在組織培養(yǎng)從一個(gè)非合子細(xì)胞，通過(guò)合子胚相似的胚胎發(fā)生過(guò)程所形成的胚狀結(jié)構(gòu) 離體的植物器官或組織或細(xì)胞 （外植體） 愈傷組織 細(xì)胞分裂和 脫 分化 胚狀體 植物幼體 繼續(xù)發(fā)育 （單細(xì)胞） 一棵完整的植株 細(xì)胞分裂和 再 分化 包以人工種
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