【正文】 用方法 有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和顯微注射法 植物組織培養(yǎng)技術(shù) ，既要用 放射性同位素標(biāo)記的耐鹽基因作探針進(jìn)行分子 雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌方法從 個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性 解析 用限制性核酸內(nèi)切酶剪切耐鹽基因后，還 需要用同種限制性核酸內(nèi)切酶將載體切開，同時(shí) 還需要用 DNA連接酶連接目的基因和載體。將重 組 DNA導(dǎo)入水稻細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將重組 DNA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法。檢測目的基 因表達(dá)與否，可以用分子水平的檢測方法，如用 耐鹽基因做成探針檢測受體細(xì)胞是否有目的基因， 或檢測受體細(xì)胞是否有目的基因表達(dá)產(chǎn)生的 mRNA 或蛋白質(zhì)。還可以檢測個(gè)體是否具有抵抗鹽堿溶液 的能力。 答案 B 3.（ 09南通調(diào)研）蛋白質(zhì)工程中，要對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行 設(shè)計(jì)改造，必須通過基因修飾或基因合成來完成，而 不直接改造蛋白質(zhì)的原因是 （ ） ，操作難度大 解析 因蛋白質(zhì)是由基因控制合成的，按照人類的意 愿對(duì)控制蛋白質(zhì)合成的基因進(jìn)行修飾，既易于操作又 能遺傳。 B 4.（ 09宜昌調(diào)研）關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，錯(cuò)誤的是 （ ） 苗之前進(jìn)行異養(yǎng)代謝 可以影響愈傷組織的再分化 愈傷組織 ，所有細(xì) 胞的基因型相同 解析 愈傷組織分化形成幼苗之前其同化類型為異養(yǎng)型。培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素含量與生長素含量之間的不同比例，可以調(diào)控植物組織培養(yǎng)過程中芽和根的形成。胚珠由珠被、胚囊、受精卵、受精極核組成，其中珠被與胚囊的基因型相同，而與受精卵、受精極核的基因型不一定相同。 答案 D 5.（ 09江西重點(diǎn)中學(xué)聯(lián)考）植物組織培養(yǎng)的過程可以歸納為： 下列敘述錯(cuò)誤的是 （ ） A.② → ③ 的再分化過程中，當(dāng)細(xì)胞分裂素與生長素 的濃度比較低時(shí)，有利于根的生長 C.③ → ④ 過程指植物的營養(yǎng)生長和生殖生長階段 D.③ 包裹上人造種皮可獲得人工種子 解析 ③ → ④過程為分化形成的試管苗移栽到地里，發(fā)育成完整植物體的過程。 C 6.（ 09浙江十二校聯(lián)考）如圖是“白菜 —甘藍(lán)”雜種植株的培育過程。下列說法正確的是 （ ） “白菜 —甘藍(lán)”植株不能結(jié)籽 、細(xì)胞分化和減數(shù)分 裂等過程 D.“白菜 —甘藍(lán)”雜種植株具有的性狀是基因選擇性 表達(dá)的結(jié)果 解析 白菜和甘藍(lán)都是二倍體，它們的體細(xì)胞雜交后培育的“白菜 —甘藍(lán)”雜種植株中有 2個(gè)染色體組來自白菜， 2個(gè)染色體組來自甘藍(lán)，因此“白菜 —甘藍(lán)”屬于異源四倍體，是可育的，能產(chǎn)籽；愈傷組織是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞，不能進(jìn)行光合作用制造有機(jī)物，因此愈傷組織的代謝類型是異養(yǎng)需氧型；上述過程包括去壁、原生質(zhì)體融合、植物組織培養(yǎng)等過程，其結(jié)果是形成“白菜 —甘藍(lán)”幼苗，并未發(fā)育到性成熟個(gè)體，因此整個(gè)過程中有有絲分裂和細(xì)胞分化，沒有減數(shù)分裂過程；任何性狀都是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，因此選項(xiàng) D正確。 答案 D 7.（ 09北京東城期末）下面關(guān)于植物細(xì)胞工程的敘述，正確的是 （ ） ①不同種植物葉肉細(xì)胞融合時(shí)，應(yīng)先去掉細(xì)胞膜 ②葉肉細(xì)胞脫分化后，可形成無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞 ③葉肉細(xì)胞經(jīng)過再分化過程，可形成愈傷組織 ④葉肉細(xì)胞離體培養(yǎng)時(shí)，可以表現(xiàn)出細(xì)胞全能性 A.①③ B.②④ C.①②④ D.①②③④ 解析 因細(xì)胞壁阻礙原生質(zhì)體的融合，故植物細(xì)胞融合時(shí)，應(yīng)先去掉細(xì)胞壁；葉肉細(xì)胞經(jīng)過脫分化過程形成的愈傷組織細(xì)胞是高度液泡化呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞；離體的葉肉細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)可得到完整的植物個(gè)體，表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性。 B 8.（ 09南通調(diào)研）下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，不正確的是 （ ） ，獲得具有抗病毒 的新品種 ，能保持親本的 優(yōu)良性狀 ，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物 的工廠化生產(chǎn) “蘿卜 —甘藍(lán)”，克 服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 解析 考查植物細(xì)胞工程的應(yīng)用。利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的脫毒苗，具有無病毒的特征，但不能抗病毒。 A ，正確的是 （ ） ， 培養(yǎng)至細(xì)胞系時(shí)遺傳物質(zhì)已發(fā)生改變 體 解析 細(xì)胞分裂素是植物激素，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)不需要添加。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的除了獲得大量蛋白質(zhì)外，還可用于皮膚移植、有毒物質(zhì)的檢測等。雜交瘤細(xì)胞可在小鼠體內(nèi)培養(yǎng)也可在體外培養(yǎng)，均可產(chǎn)生單克隆抗體。細(xì)胞系遺傳物質(zhì)已發(fā)生改變，帶有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，可無限增殖。 C “多利”的培育過程示意圖： 下列各項(xiàng)有關(guān)表述錯(cuò)誤的是 （ ） “多利”的主要性狀與甲羊一致，因?yàn)槠? 細(xì)胞核基因來自甲羊 “多利”的培育過程中采用的生物技術(shù)有 核移植和胚胎移植 了細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境條件 解析 A正確，生物的性狀主要由細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)控制，克隆羊的主要性狀與提供細(xì)胞核的個(gè)體基本一致； B正確，甲羊的體細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中形成重組胚胎后，在體外適宜條件下培養(yǎng)至早期胚胎再移植到第三只羊的子宮內(nèi)完成妊娠、分娩等過程； C正確，選擇去核卵細(xì)胞的原因是因?yàn)槠浼?xì)胞質(zhì)中含有使體細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)； D錯(cuò)誤，此實(shí)驗(yàn)只能說明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。 答案 D 11.（ 09杭州質(zhì)檢）利用細(xì)胞工程方法，以 SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是 （ ） ，產(chǎn)生 的血清抗體為單克隆抗體 B細(xì)胞可以獲得大量針對(duì) SARS病毒的單克隆抗體 B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng) PEG誘 導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞 SARS病毒核衣殼蛋白特異 性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者 解析 經(jīng)過特異抗原刺激后的效應(yīng) B細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合后，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞所產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體。在細(xì)胞融合過程中，可產(chǎn)生三種類型的雜交細(xì)胞，要進(jìn)行篩選；利用抗原 —抗體反應(yīng)可用來診斷出病毒感染者，是一種常用的診斷方法。 答案 D 12.（ 09江西重點(diǎn)中學(xué)聯(lián)考）下列關(guān)于生物工程相關(guān) 知識(shí)的敘述，正確的是 （ ） ①在人工合成目的基因時(shí)，蛋白質(zhì)中氨基酸的順序 可為合成目的基因提供資料 ②若想通過植物細(xì)胞 培養(yǎng)的方法來培養(yǎng)人工種子，其胚狀體應(yīng)具有胚芽、胚根、子葉、胚乳等結(jié)構(gòu) ③用放射性同位素、熒 光分子等標(biāo)記的 DNA分子作為探針可進(jìn)行基因診 斷 ④限制酶基因只存在于微生物體內(nèi)，通常用鳥 槍法來獲得，它能識(shí)別多種核苷酸序列并在一定位 點(diǎn)進(jìn)行切割 ⑤質(zhì)粒的復(fù)制既能在自身細(xì)胞中完 成，也能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成 A.①②⑤ B.③④⑤ C.①③⑤ D.②③④ 解析 通過植物組織培養(yǎng)獲得人工種子時(shí)，胚狀體中不包括胚乳。限制酶主要存在于微生物體內(nèi)，一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列并在特定位點(diǎn)進(jìn)行切割。 答案 C 二、非選擇題 13.（ 09泰安模擬）科學(xué)家通過基因工程成功培育出能抗棉鈴蟲的棉花植株 ——抗蟲棉，其過程大致如下圖所示： （ 1）進(jìn)行基因工程操作的工具酶有 ，將蘇云金芽孢桿菌的 Bt基因?qū)朊藁?xì)胞 內(nèi)，使棉花植株產(chǎn)生抗蟲性狀，引起這種新性狀產(chǎn) 生依賴于 。 （ 2）含有 Bt基因的 Ti質(zhì)粒導(dǎo)入棉花細(xì)胞是否可以穩(wěn) 定維持和表達(dá)其遺傳特性，必須進(jìn)行檢測與鑒定。 檢測目的基因是否導(dǎo)入成功可以檢測 Bt基因是否轉(zhuǎn) 錄出了 mRNA，這是檢測目的基因是否發(fā)揮功能作 用的 。檢測方法是 。 限制酶、 DNA連 接酶 基因重組或重組 DNA 第一步 從轉(zhuǎn)基因棉花細(xì)胞內(nèi)提取 mRNA，用標(biāo)記的目的基因作探針與 mRNA雜交，如果顯示出雜交帶，則表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了mRNA （ 3）由獲得 Bt基因的植株細(xì)胞培養(yǎng)成抗蟲棉植株的 過程是：植株細(xì)胞首先要通過細(xì)胞的 過 程，培養(yǎng)出 ，再在一定的培養(yǎng)條件下， 再分化出幼根和芽，形成完整的植株。為了克服季 節(jié)限制快速制種，便于大面積推廣種植，可將植株 細(xì)胞培養(yǎng)得到 。 （ 4）有人擔(dān)心種植上述抗蟲棉，它所攜帶的 Bt基因 可以通過花粉傳遞給近親物種，造成“基因污染”， 請(qǐng)?zhí)岢瞿愕慕鉀Q方法。 。 脫分化 愈傷組織 胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等 將目的基因?qū)肴~綠體基因 組或線粒體基因組中 解析 該題考查現(xiàn)代生物技術(shù)中的基因工程和組織培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容。 （ 1）該小題考查基因工程的工具：限制酶、 DNA連接酶及載體。 （ 2）該小題考查基因工程的步驟。第一步先提取目的基因；第二步目的基因的整合，形成重組質(zhì)?；蛑亟M DNA；第三步導(dǎo)入宿主細(xì)胞；第四步檢測與表達(dá)。 （ 3）該小題考查植物組織培養(yǎng)。如果受體細(xì)胞是受精卵則直接發(fā)育成目的植株。如果是體細(xì)胞則需要 進(jìn)行組織培養(yǎng)。組織培養(yǎng)過程為：脫分化形成愈傷組織或胚狀體，再進(jìn)行再分化，分化出根和芽，最后培養(yǎng)形成植株?；蛟谂郀铙w時(shí)包裹上人工膜，制成人工種子，提高發(fā)芽率。 （ 4）該小題考查細(xì)胞質(zhì)遺傳。受精卵中的細(xì)胞質(zhì)來自于卵細(xì)胞，所以將目的基因?qū)氲骄€粒體或葉綠體的基因組中能避免基因污染。 牛、制備單克隆抗體、培育抗蟲棉的示意圖，請(qǐng)根據(jù)圖示回答下列問題： （ 1）過程①表示 ，要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因和載體，原因是 。受體細(xì)胞可以是牛的一般體細(xì)胞嗎？ ，為什么？ 。 （ 2）制備單克隆抗體的常規(guī)方法是將分泌抗體的漿細(xì)胞與能無限增殖的骨髓瘤細(xì)胞融合，而圖中單克隆抗體的制備過程則運(yùn)用了基因工程技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，請(qǐng)你說出目的基因的名稱 。單克隆抗體主要具有 的特性。 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 同一種限制酶處理目的基因和載體，可以產(chǎn)生相 同的黏性末端 不能 因?yàn)榉只膭?dòng)物細(xì)胞沒有 全能性 無限增殖 調(diào)控基因 特異性強(qiáng)、靈 敏度高 （ 3）抗蟲棉的培育過程中，抗蟲基因的受體細(xì)胞可 以是棉花的一般體細(xì)胞，原因是 。最后檢驗(yàn)培育的棉花是否抗蟲，常 用的方法是 。 分化的植物細(xì)胞 具有全能性 用培育的棉花的葉等器官喂食害蟲，觀 察害蟲的生活情況 解析 本題考查基因工程的應(yīng)用。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要目的基因與載體具有相同的黏性末端，所以要用同一種限制酶處理二者。分化的動(dòng)物細(xì)胞沒有全能性，而分化的植物細(xì)胞具有全能性。單克隆抗體的制備關(guān)鍵就是讓漿細(xì)胞獲得無限增殖的能力。圖示中的方法，是將能調(diào)控細(xì)胞增殖的基因?qū)霛{細(xì)胞（受體細(xì)胞），使其獲得了無限增殖的能力，所以無限增殖調(diào)控基因?yàn)槟康幕颉? ，下圖為其花藥中未成熟花粉在適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)產(chǎn)生完整植株的過程。據(jù)圖回答： （ 1）圖中①表示的是該花粉培養(yǎng)過程中的 過 程，②表示的是 過程， X代表的是 ， ③表示的是 過程，④表示的是誘導(dǎo) 過程。 脫分化 再分化 胚狀體 分化（或發(fā)育） 生根 （ 2）圖中從愈傷組織形成完整植株的途徑有兩條， 具體通過哪一條途徑主要取決于培養(yǎng)基成分中 的種類及其濃度配比，最后獲得的來源于未成熟花 粉的完整植株都稱為 植株（甲）。未成熟花 粉經(jīng)培養(yǎng)能形成完整植株，說明未成熟花粉具有細(xì) 胞的全能性。 （ 3）對(duì)植株甲進(jìn)行 ，才能使其結(jié)實(shí)產(chǎn) 生后代（乙），否則植株甲只有通過 的方 式才能產(chǎn)生后代（丙）。乙、丙兩種植株中，能產(chǎn) 生可育花粉的是 植株，