如何選擇hplc溶劑-文庫(kù)吧
2025-09-13 17:38 本頁(yè)面
【正文】 溶劑有關(guān)的原因 解決辦法 峰拖尾 流動(dòng)相 pH選擇錯(cuò)誤 調(diào)整 pH值 。 (對(duì)于堿性化合物，低 pH值更有利于得到對(duì)稱峰 ) 峰前延 樣品溶劑選擇不恰當(dāng) 使用合適的溶劑 峰分叉 樣品溶劑不溶于流動(dòng)相 改變樣品溶劑 鬼峰 流動(dòng)相問題 是否純凈 保留時(shí)間波動(dòng) /不斷變化 流動(dòng)相組分變化選擇不恰當(dāng) 防止變化 （蒸發(fā)、反應(yīng)等） / 基線漂移 流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由 低品質(zhì)溶劑配成 /不均勻 /配比不當(dāng)或流速變化 檢查流動(dòng)相的組成 ,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及 HPLC級(jí)的溶劑 /使用 HPLC級(jí)的溶劑，高純度的鹽和添加劑 ,流動(dòng)相在使用前進(jìn)行脫氣，使用中使用氦氣 /更改配比或流速 ,定期檢查流動(dòng)相組成及流速 基線噪音（規(guī)則的） 流動(dòng)相混合不完全 用手搖動(dòng)使混合均勻或使用 低粘度的溶劑 基線噪音（不規(guī)則的） 流動(dòng)相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成 /流動(dòng)相各溶劑不相溶 檢查流動(dòng)相的組成 /選擇 互溶 的流動(dòng)相 寬峰 流動(dòng)相組成變化 重新制備新的流動(dòng)相 分離度降低 流動(dòng)相污染或變質(zhì) （引起保留時(shí)間變化） 重新配置流動(dòng)相 對(duì)于色譜柱和流動(dòng)相 的 正確選擇 是得到好的 色譜圖的關(guān)鍵 ！ HPLC溶劑的要求 （ 1） 高純度 ， 溶劑與固定相 不互溶 ， 并能保持色譜柱的穩(wěn)定性 由于高效液相靈敏度高 ， 對(duì)流動(dòng)相溶劑的純度要求也高 。 不純的溶劑會(huì)引起基線不穩(wěn) ， 或產(chǎn)生 “ 偽峰 ” ） 。 （ 2） 溶劑對(duì)于待測(cè)樣品 ， 必須具有合適的極性和良好的選擇性 ， 即 足夠的溶解能力 溶劑的極性要與待測(cè)樣品相匹配 ， 如果溶解度欠佳 ， 樣品會(huì)在柱頭沉淀 ， 不但影響純化分離 ， 且會(huì)使柱子惡化 。 (3） 溶劑要與檢測(cè)器匹配 對(duì)于 UVVis，所用流動(dòng)相在檢測(cè)波長(zhǎng)下應(yīng)沒有吸收或吸收很小 （ 4） 化學(xué)穩(wěn)定性好 不能選與樣品發(fā)生反應(yīng)或聚合的溶劑 (5） 低粘度，沸點(diǎn)適中 減小溶質(zhì)的傳質(zhì)阻力，降低柱壓，利于提高柱效。 常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙腈等；粘度過低的溶劑也不宜采用，如戊烷、乙醚等，易在色譜柱或檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡，影響分離 HPLC溶劑的要求 HPLC溶劑關(guān)鍵性能 UV吸收性 HPLC級(jí)試劑是用特殊方法生產(chǎn)的含有最少的顆粒和最低的紫外吸收物質(zhì) ， 除去具有吸收 UV的雜質(zhì) ， 在規(guī)定的波長(zhǎng)上吸光度限制在規(guī)定值以內(nèi) 。 梯度洗脫性能 在一個(gè)分析周期內(nèi)程序控制流動(dòng)相的組成 ， 如溶劑的極性 、 離子強(qiáng)度和 pH值等
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