《rna編輯入門(mén)》ppt課件-文庫(kù)吧
2024-12-30 04:36 本頁(yè)面
【正文】 導(dǎo)致成熟的 RNA 編碼序列和它的轉(zhuǎn)錄模板 DNA 序列之間的不相匹配 。 RNA編輯機(jī)制 在 mRNA編輯過(guò)程中需要精確的插入位點(diǎn)和準(zhǔn)確的核苷數(shù)目，這需要由引導(dǎo) RNA(gRNA) 介導(dǎo)完成的。這些小的gRNA 分子是與被編輯的 mRNA互補(bǔ)的一小段反義序列 ,一般可與被編輯的 mRNA一級(jí)轉(zhuǎn)錄本的下游編輯位點(diǎn)處結(jié)合形成短的 (10～ 15bp) 錨定雙螺旋。 在每一個(gè) gRNA分子 5 `端的 5— 12個(gè)核甘酸可以和 mRNA中緊鄰被編輯部位 3 `端的區(qū)域互補(bǔ)．被稱(chēng)為“ anchor” 序列， “ anchor”序列的下游是一段 25~35核苷酸的 “ guiding”序列，它可以確定核甘酸位點(diǎn)間即編輯位點(diǎn) (E8)處尿嘧啶 U的插入和缺失； gRNA結(jié)構(gòu)的第三部分是位于其 3 `端長(zhǎng)度為 5— 24核苷酸的寡聚尿嘧啶核苷酸尾。 （ 1） gRNAI的 5’端與前體 mRNA的未經(jīng)編輯的 mRNA的一小段錨定序列互補(bǔ)；（ 2）其余大部分的gRNAI序列指導(dǎo)部分前體 mRNA編輯，由于插入了 UMP,mRNA的長(zhǎng)度增加；（ 3）新的 gRNA（ gRNAII）與前體 mRNA的剛編輯的區(qū)域的 5’端雜交，取代 gRNAI；（ 4） gRNAII指導(dǎo)新一段前體mRNA編輯；（ 5）以下一個(gè)gRNA重復(fù)前面的步驟，直到mRNA編輯完成。 編輯過(guò)的序列用黑色表示 gRNA介導(dǎo) RNA編輯機(jī)制 RNA的編輯是由 3’ — 5’方向進(jìn)行的， gRNA分子 5 `端“ anchor” 序列（可與 mRNA中緊鄰被編輯部位 3 `端的區(qū)域互補(bǔ)的 5— 12個(gè)核甘酸序列）與待編輯的 mRNA一小段錨定序列互補(bǔ)配對(duì)形成短的（10— 15bp）錨定雙螺旋。 gRNA 和轉(zhuǎn)錄本 mRNA 之間形成 10～ 15 個(gè)核苷的匹配環(huán)。由編輯復(fù)合體蛋白中的一個(gè)編輯位點(diǎn)特異性的內(nèi)切酶識(shí)別出 mRNA/ gRNA形成的錨定雙螺旋序列 ,在 mRNA3′ 端第一個(gè)未配對(duì)的核苷酸處切開(kāi)。接著末端尿嘧啶轉(zhuǎn)移酶 ( TU21Tase) 將尿嘧啶殘基加到切開(kāi)的前體 mRNA 插入位點(diǎn)上 ,或者3′ 尿嘧啶特異外切酶從切開(kāi)的刪除位點(diǎn)除去尿嘧啶殘基。最后,RNA 連接酶將兩段切開(kāi)的 mRNA 連接起來(lái)。 gRNA與 mRNA堿基互補(bǔ)配對(duì)時(shí)的一個(gè)顯著特點(diǎn)是：存在 GU堿基配對(duì)和標(biāo)準(zhǔn)的 WatsonCrick堿基配對(duì)（ AU）。 11 UOH U U U U P U U U U U OH UOH U U U U 寡 聚 U 的 添 加 gRNA 在 mRNA 編 輯 中 的 作 用 機(jī)
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