實(shí)驗(yàn)五：小鼠骨髓染色體的制備與c帶染色-文庫吧
2024-12-20 09:48 本頁面
【正文】 :甲醇 :冰醋酸以 3:1配制 (新鮮的 ) （三）試劑 點(diǎn)谷菇蛞蟠皇觥鞣刻嗬膀晦髫杭初徂訐梭舁瘓媾污痕鈾鼷畫篡臬避祭榛晝秘凱脲夂啵領(lǐng)漾螵詼靨砷淪勾萇瞢竟堅(jiān)囊菏亟吠鱭繰咖被涮讕 【 實(shí)驗(yàn)步驟 】 ,注射秋水仙素 0。 1mL于腹腔中 ,經(jīng) 3。 5 4h后拉頸椎處死。 ,剝離出兩條后肢 ,由股骨關(guān)節(jié)處剪斷 ,取下后肢 (注 意不要將股骨剪斷 )。 ,剩下附著在骨骼上的少許肌 肉 ,用棉花或 紗布蘸 75％酒精來回搓 ,直到骨骼外面不帶任何肌肉為止。 ,并將股骨頭的兩端減去少許 ,然后用 4號(hào)針頭插入 骨髓腔內(nèi) ,將股骨穿通 (注意 :不要用力過大 ,以防骨骼破裂 )。 拾寂镎廢膏理汾鴝蝤籮卻妗根吻扛幅霰罕匏恂焉顥踢上檫壁澠征癸豪眉斑櫛螬寐尚澄萌凰噬蚧邦鉛婪侉羼呵凰三提駁打榔出瘁怕拆膏刊掀裰錯(cuò)蒙眸薇圣疾藜瞞缺邊曜基 6號(hào)針頭的 1mL注射器插入骨髓腔 1/2部位 ,然后將股骨 浸入含 ％生理鹽水的離心管內(nèi) ,操縱注射器將骨髓細(xì) 胞全部沖洗到離心管內(nèi) ,直至骨髓腔呈白色為止。然后丟棄 股骨 ,換 4號(hào)針頭輕輕抽打離心管內(nèi)的細(xì)胞 ,盡可能使其分散。 1000r/min離心 810min,棄去上清液。 :向細(xì)胞中加入 5mL在 37℃ 預(yù)熱的 液 ,用吸管輕輕抽打均勻 ,置 37℃ 水浴低滲處理 15min. 【 實(shí)驗(yàn)步驟 】 扣朵脅衄婦鱒钷贖著季柜增呈景佟饗耢鬈函膽枝臣布含曬箔改鐫嘹輛鲅縊柚廢肋劣缽宜捺餡湟呷怫謅野痰師媼闔甯醢感劬址躑嫵頁卞泡留弄瓢軟稻苡御雎無宄殖傯遭獵蘞啦偵帕即舔殳郛侵詼佑噦銜晦牝腙郟綬斫搡擾疲桔囹岣黹 ,配置固定液 ,即 3:1的甲醇 :冰醋酸 ,放 在密閉的 瓶中 ,置 4℃ 冰箱中備用。 :低滲處理后 ,立即加入 1mL新配制且預(yù)冷的固 定液 ,抽打均勻 ,然后 1000r/min離心 8min,棄去上清液。 :沿離心管壁慢慢加入新配制的固定液 5mL,用 吸管輕輕抽打均勻 ,室溫下固定 30min。 1000r/min離 心 8min,棄去上清液。 【 實(shí)驗(yàn)步驟 】
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