【正文】 離純化生物堿，如雷氏銨鹽可用于沉淀分 離季銨堿。 ☆☆ 考點(diǎn) 9：總生物堿的提取 （ 1）水或酸水提取法：常用 %～ 1%的硫酸或鹽酸，采用浸漬法或滲漉法提取，個(gè)別含淀粉少者可用煎煮法。 （ 2）醇類溶劑提取法：用醇類溶劑，采用浸漬法、滲漉法、回流提取法和連續(xù)回流提取法提取。 （ 3）親脂性有機(jī)溶劑提取法：利用游離生物堿易溶于親脂性有機(jī)溶劑的性質(zhì)，用氯仿、苯、乙醚以及二氯甲烷等溶劑，采用浸漬、回流或連續(xù)回流法提 取。由于生物堿大 多與植物體內(nèi)的有機(jī)酸結(jié)合成鹽的狀態(tài)存在，因此一般需將藥材用堿水（石灰乳、碳酸鈉溶液或稀氨溶液）濕潤，使生物堿游離后提取。若提取液 中親脂性雜質(zhì)較多，可采用與醇類溶劑提取液相同的處理方法得到總生物堿。 。 （ 1）沉淀法：利用生物堿能與生物堿沉淀試劑生成難溶于水的復(fù)合物而從水中析出的原理，以達(dá)到與親水性雜質(zhì)分離的目的。 （ 2）溶劑法：利用水溶性生物堿能夠溶于極性較大而又能與水分層的有機(jī)溶劑（如正丁醇、異戊醇或氯仿一甲醇的混合溶劑等）的性質(zhì)，用這類溶劑與含水溶性生物堿的堿水液反復(fù) 萃取，使水溶性生物堿與強(qiáng)親水性的雜質(zhì)得以分離。 ☆ 考點(diǎn) 10：薄層色譜 （ 1）吸附劑：常用的吸附劑有硅膠和氧化鋁，最常用的是氧化鋁。硅膠本身顯弱酸性，直接用于分離和檢識生物堿時(shí)，與堿性強(qiáng)的生物堿可形成鹽而使斑 點(diǎn)的 Rf 值很小，或出現(xiàn)拖尾，或形成復(fù)斑，影響檢識效果。為了避免出現(xiàn)這種情況，在涂鋪硅膠薄層板時(shí)用稀堿溶液（ ～ 的氫氧化鈉溶液）或緩沖 液制成堿性硅膠薄板；或者使色譜過程在堿性條件下進(jìn)行，即在展開劑中加入少量堿性試劑，如二乙胺、稀氨溶液等；或在展開槽中放一盛有稀氨溶液的小杯，用中 性展開劑在氨蒸氣中進(jìn)行展開。氧化鋁本身顯弱堿性，且吸附性能較硅膠強(qiáng)，其不經(jīng)處理便可用于分離和檢識生物堿。 （ 2）展開劑：展開劑系統(tǒng)多以親脂性溶劑為主，一般以氯仿為基本溶劑，根據(jù)色譜結(jié)果調(diào)整展開劑的極性。一般來說，硅膠和氧化鋁薄層色譜適用于分離和檢識脂溶性生物堿。尤其是氧化鋁的吸附力較硅膠強(qiáng)，更適合于分離親脂性較強(qiáng)的生物堿。 ：用于分離有些結(jié)構(gòu)十分相近的生物堿，可獲得滿意的效果。 （ 1）支持劑與固定相：常用硅膠或纖維素粉作支持劑，以甲酰胺或水作固定相。 （ 2）展開劑：分離脂溶性生物堿，以親脂性有機(jī)溶劑作展開劑；分離水溶性生物堿，則應(yīng)以親水性的溶劑作展開劑。在配制流動相時(shí)，需用固定相飽和。 ☆ ☆☆☆ 考點(diǎn) 11：概述 （ 1）五碳醛糖 （ 2）六碳醛糖 （ 3）甲基五碳醛糖 （ 4）六碳酮糖 （ 5）糖醛酸單糖分子中伯醇基氧化成羧基的化合物叫糖醛酸。 ：常見的有龍膽二糖、麥芽糖、冬綠糖、蠶豆糖、昆布二糖、槐糖、蕓香糖、新橙皮糖等。 ☆☆☆☆☆ 考點(diǎn) 12：苷鍵的裂解 （ 1）按苷鍵原子不同，酸水解的易難順序?yàn)椋?N苷＞ O苷＞ S苷＞ C苷。 （ 2）呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解，水解速率大 50～ 100 倍。 （ 3）酮糖較醛糖易水解。 （ 4）吡喃糖苷中吡喃環(huán)的 C5 上取代基越大越難水解，因此五碳糖最易水解，其順序?yàn)槲逄继牵炯谆逄继牵玖继牵酒咛继恰Ｈ绻佑?COOH，則最難水解。 （ 5）氨基糖較羥基糖難水解，羥基糖又較去氧糖難水解。 （ 6）芳香屬苷如酚苷因苷元部分有供電子結(jié)構(gòu)，水解比脂肪屬苷如萜苷、甾苷等要容易得多。 （ 7）苷元為小基團(tuán)者，苷鍵橫鍵的比苷 鍵豎鍵的易于水解，因?yàn)闄M鍵上原子易于質(zhì)子化。 ：在酸的甲醇液中進(jìn)行甲醇解，多糖或苷可生成一對保持環(huán)形的甲基糖苷的異構(gòu)體。 ：苷鍵具有酯的性質(zhì)時(shí)，堿就能水解。 ：用酶水解苷鍵可以獲知苷鍵的構(gòu)型，可以保持苷元結(jié)構(gòu)不變，還可以保留部分苷鍵得到次級苷或低聚糖，以便獲知苷元和糖、糖和糖之間 的連接方式。常用的酶有： ① β果糖苷水解酶：如轉(zhuǎn)化糖酶，可以水解 β果糖苷鍵而保存其他苷鍵結(jié)構(gòu)； ② a葡萄糖苷水解酶：如麥芽糖酶； ③ β葡萄糖苷 水解酶：如杏仁苷酶，可以水解 一般 β葡萄糖苷和有關(guān)六碳醛糖苷，專屬性較低。纖維素酶也是 β葡萄糖苷水解酶，穿心蓮中的穿心蓮內(nèi)酯 19βD葡萄 糖苷用硫酸水解時(shí)將發(fā)生去氧和末端雙鍵移位，而用纖維素酶水解可得到原苷元。此外蝸牛酶，高峰氏糖化酶，橙皮苷酶，柑橘苷酶等也常用于苷鍵水解。 ： Smith 裂解是常用的氧化開裂法，可以開裂 1， 2二元醇。此法性質(zhì)溫和，特別適用于一般酸水解時(shí)苷元結(jié)構(gòu)容易改變的苷以及不易被酸水解的 C苷，但對苷元上也有 1， 2二元醇結(jié)構(gòu)的苷類并不適用。 ☆ 考點(diǎn) 13：提取方法 自植物中提取苷 類物質(zhì)，一般都是采用水或醇進(jìn)行抽提。在提取時(shí)首先必須明確提取的目的要求，即要求提取的是原生苷、次生苷，還是苷元，然后，根據(jù) 要求進(jìn)行提取，其提取方法是有差別的。由于植物體內(nèi)有水解酶共存，在提取過程中易使苷類物質(zhì)分解，因此在提取原存形式的苷時(shí)，必須抑制或破壞酶的活性。一 般常用的方法是在中藥中加入一定量的碳酸鈣，或采用甲醇、乙醇或沸水提取，同時(shí)在提取過程中還須盡量避免與酸和堿接觸，以免苷類水解，如不加注意，則往往 得到的不是原生苷，而是已水解失去一部分糖的次生苷，甚至苷元。 ☆ ☆☆☆ 考點(diǎn) 14：糖的鑒定 ：紙層析后糖斑點(diǎn)的顯色，可利用它的還原性或形成糠醛后引起的一些呈色反應(yīng)。常用顯色劑有：硝酸銀試劑，使還原糖顯棕黑色；三苯四氮唑 鹽試劑，使單糖和還原性低聚糖呈紅色；苯胺 鄰苯二甲酸鹽試劑，使單糖中的五碳糖和六碳糖所呈顏色略有區(qū)別；用 3， 5二羥基甲苯 鹽酸試劑，使酮糖和含 有酮糖的低聚糖呈紅色；過碘酸加聯(lián)苯胺，使糖、苷和多元醇中有鄰二羥基結(jié)構(gòu)者呈藍(lán)底白斑。 ：糖的極性大，在硅膠薄層上進(jìn)行層析時(shí)，點(diǎn)樣量不宜過多（一般少于 5/g）。紙色譜所用的顯色劑同樣適用于薄層色譜。 相色譜：由于氣相色譜靈敏度高，又可同時(shí)進(jìn)行分離和定性定量，所以在糖的鑒定上也用得很普遍。 ：與氣相色譜相比其優(yōu)點(diǎn)在于不必制成衍生物，而且可以直接用水溶液進(jìn)行分離。 ：備有幾種檢出器，其中折光檢出器的靈敏度為可檢出 20/g. ☆ ☆ 考點(diǎn) 15：苷鍵構(gòu)型的決定 糖與糖之間的苷鍵和糖與非糖部分的苷鍵，本質(zhì)上都是縮醛鍵，也都存在端基碳原子的構(gòu)型問題。測定苷鍵構(gòu)型的問題主要有三種方法，即酶催化水解方法、克分子旋光差法（ Klyne法）和 NMR 法。 ：如 麥芽糖酶能水解的為 a苷鍵，而杏仁苷酶能水解的為 β苷鍵。但必須注意并非所有的 β苷鍵都能為杏仁苷酶所水解。 Klyne 經(jīng)驗(yàn)公式進(jìn)行計(jì)算。 NMR 進(jìn)行測定：在糖的 1HNMR 譜中，端基質(zhì)子信號在 δ5， 0 附近，其他一般糖環(huán)質(zhì)子信號在 ～ 間。絕大多數(shù)的吡喃糖，如 葡萄糖的優(yōu)勢構(gòu)象中 C2H 為豎鍵質(zhì)子，當(dāng) C1OH 處在橫鍵上（ βD苷）， C1H 和 C2H 的兩面角近 180176。J 值在 6～ 8HZ 間。當(dāng) C1OH 處在豎鍵上（ aD苷）， ClH 和 C2H 的兩面夾角近 60176。 J 值在 3～ 4Hz 間，因此我們可以根據(jù) ClH 和 C2H 的偶合常數(shù)來判斷苷鍵構(gòu)型。 ☆ ☆☆ 考點(diǎn) 16：醌類結(jié)構(gòu)與分類 ：化合物從結(jié)構(gòu)上考慮可以有 α（ 1， 4）、 β（ 1， 2）及 amphi（ 2， 6）三種類型。萘醌類還原后即得到無色的萘氫醌，后者又可重 新氧化得到萘醌，并重新顯色。許多萘醌類化合物具有明顯的生物活性，如從中藥紫草及軟紫草中分得的一系列紫草素及異紫草素衍生物，具有止血、抗炎、抗菌、 抗病毒及抗癌作用，與其清熱涼血的藥性相符，可認(rèn)為這些萘醌化合物為紫草的有效成分。 ：天然菲醌類衍生 物包括鄰醌及對醌兩種類型。如從中藥丹參根中提取得到多種菲醌衍生物，其中丹參醌 Ⅰ 、丹參醌 Ⅱ A、丹參醌 Ⅱ B、隱丹參 醌、丹參酸甲酯、羥基丹參醌 Ⅱ A 等為鄰醌類衍生物，而丹參新醌甲、丹參新醌乙、丹參新醌丙則為對醌類化合物。丹參醌類成分具有抗菌及擴(kuò)張冠狀動脈的作用， 由丹參醌 Ⅱ A 制得的丹參醌 Ⅱ A 磺酸鈉注射液已用于臨床，用于治療冠心病、心肌梗死。 ：（ 1）單蒽核類。（ 2）雙蒽核類： ① 二蒽酮類衍生物：二蒽酮多以苷的形式存在，若催化加氫還原則生成二分子蒽酮，用 FeCl3 氧化則 生成二分子蒽醌。如中藥大黃、番瀉 葉中致瀉的主要成分番瀉苷 A、 B、 C、 D 等皆為二蒽酮類衍生物。二蒽酮類化合物C10C10′鍵易于斷裂，生成蒽酮類 化合物。大黃中致瀉的主要成分番瀉苷 A，就是因其在腸內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榇簏S酸蒽酮而發(fā)揮作用。 ② 二蒽醌類：蒽醌類脫氫縮合或二蒽酮類氧化均可形成二蒽醌類。天然二 蒽醌類中兩個(gè)蒽醌環(huán)都是相同且對稱的，由于空間位阻的相互排斥，使兩個(gè)蒽環(huán)呈反向排列，如山扁豆雙醌。 ③ 去氫二蒽酮類。 ④ 日照蒽酮類。 ⑤ 中位苯駢二蒽酮 類。 ☆ ☆☆☆ 考點(diǎn) 17：醌類的理化性質(zhì) ：醌類化合物如無酚羥基，則近乎無色。天然醌類多為有 色晶體。顏色由黃、棕、紅、苯醌及萘醌多以游離狀態(tài)存在，而蒽醌類則往往結(jié)合成苷，存在于植物體中。 ：游離的醌類多具升華性，小分子的苯醌類及萘醌類具有揮發(fā)性，能隨水蒸氣蒸餾出，可據(jù)此進(jìn)行提取、精制。 ：游離醌類多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有機(jī)溶劑，微溶或不溶于水。 ：蒽醌類衍生物多具有酚羥基，故具有酸性，易溶于堿性溶劑。醌類衍生物酸性強(qiáng)弱的排列順序?yàn)椋汉?COOH＞含 2 個(gè)以上 βOH＞含 1 個(gè) βOH＞含 2 個(gè)以上 αOH＞含1 個(gè) ，常采取堿梯度萃取法來分 離蒽醌類化合物。 如用堿性不同的水溶液（ 5%碳酸氫鈉溶液、 5%碳酸鈉溶液、 1%氫氧化鈉溶液、 5%氫氧化鈉溶液）依次提取，其結(jié)果為酸性較強(qiáng)的化合物（帶 COOH 或 2 個(gè) βOH）被碳酸氫鈉提出；酸性較弱的化合物（帶 1 個(gè) βOH）被碳酸鈉提出；酸性更弱的化合物