川麥42不同逆境生長情況研究開題報告-文庫吧
2025-04-25 08:43 本頁面
【正文】 生產(chǎn)中造成嚴重損失的自然災(zāi)害一，會對包括小麥在內(nèi)的許多作物的產(chǎn)量造成巨大的損失 [11,12]， 關(guān)于冬小麥研究已經(jīng)有不少報道 [13]，植物的抗寒性與活性氧代謝關(guān)系密切，低溫脅迫下植物體內(nèi)產(chǎn)生大量的 H2O O OH 等活性氧自由基，這些活性氧能造成膜脂過氧化，進而造成膜系統(tǒng)的損傷。植物體內(nèi)存在著一系列酶促的和非酶促的抗氧化劑以清除活性氧自由基，保護植物細胞免受活性氧的傷害，維持膜系統(tǒng)的穩(wěn)定性，以增強植株的抗寒性 [14]。 超氧化物 歧化酶（ SOD） 、 過氧化物酶體（ POD） 、 過氧化氫酶（ CAT） 被認為是清除活性氧過程中最主要的抗 氧化酶類，使植物在一定程度上忍耐、減緩或者抵抗低溫脅迫。 小麥經(jīng)過低溫脅迫后會發(fā)生一系列的變化，其中一些指標，如超氧化物歧化酶的活性及丙二醛的含量可以作為小麥抗凍性的生理生化指標 [14]。低溫脅迫下植物可積累更多的可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì) 。 葉綠素是植物進行光合作用的重要物質(zhì)。植物體的碳素營養(yǎng)中主要是可溶性糖和淀粉，它們在營養(yǎng)中的作用無法替代（如合成細胞壁、轉(zhuǎn)換合成其他有機物等）。丙二醛（ MDA） 是細胞膜脂過氧化作用 的產(chǎn)物之一，丙二醛的產(chǎn)生數(shù)量多少能代表細胞膜脂過氧化的程度，可以間接反映植物組織抗氧化能力的大小。高等植物在逆境下脯氨酸的含量也引起了人們的廣泛重視。因此可以通過測定植物體內(nèi) 超氧化物歧化酶（ SOD） 、 過氧化物酶（ POD） 及 過氧化氫酶（ CAT ） 酶活性，可溶性蛋白、可溶性糖、丙二醛、葉綠素及脯氨酸的含量，以此來衡量小麥的抗逆性。 2 研究的主要內(nèi)容與預(yù)期目標 選取萌發(fā)一致的川麥 42種子植于消過毒的石英砂中，置于 25177。 1 ℃ 、 12 h / 12h 光 /暗周期、中等光強（光流密度 100 μmol m2 s1） 的恒 溫室中 培養(yǎng)， 待長直三葉期，選取長勢相似小麥幼苗進行不同的脅迫處理（鹽脅迫、干旱脅、低溫脅迫） 24 h 和 72 h，對脅迫前后小麥中 超氧化物歧化酶（ SOD）、過氧化物酶體（ POD）、過氧化氫酶（ CAT） 、可溶性蛋白、脯氨酸、可溶性糖、丙二醛、葉綠素含量進行測定，通過對實驗數(shù)據(jù)的分析從而對小麥抗旱性、抗旱性及耐鹽性做出評價，并對小麥的抗逆性研究提供依據(jù)。 3 3 研究方案 實驗流程 實驗儀器與材料 儀器 分管光度計 ，電子天平，研 缽，容量瓶，燒杯，恒溫水浴鍋，試管，離心機，漏斗。 試劑 95%乙醇，丙酮， 氮藍四唑（ NBT） ， 硫代巴比妥（ TBA） ， 三氯乙酸，冰乙酸，甲苯，茚三酮，考馬斯亮藍 G250，蒽酮，濃硫酸，牛血清蛋白， L脯氨酸，葡萄糖，磷酸緩沖液（以上溶液均為分析純） 材料 川麥 42（來自四川省農(nóng)科院） 實驗方法 樣品的預(yù)處理 將生長到 3 葉期的 川麥 42 幼苗，洗凈根部營養(yǎng)液，分別進行鹽漬脅迫（ mol/L 氯化鈉溶液）、干旱脅迫（ 20% PEG6000）、低溫脅迫培養(yǎng) （ 4 ℃ ） ， 以上脅迫處理均設(shè)兩組分別標注為 1天和 3 天。待脅迫處理完畢之后根據(jù)測定項目采樣 葉綠素的測定 稱取小麥葉片 g剪碎置于研缽中，加少許 CaCO3，石英砂、 95%乙醇（ AR）丙酮（ AR）1:1充分研磨，過濾，將濾液移入 25 mL容量瓶，用 95%乙醇（ AR）丙酮（ AR） 1:1反復(fù)洗滌殘渣、濾紙至無綠色，合并濾液，定容。取上述提取液 1 mL稀釋至 10 mL，搖勻。用 95%乙醇（ AR）丙種子萌發(fā) 移植入石英砂 鹽脅迫 干旱脅迫【哦 低溫脅迫 空白 萌發(fā)后 測量分析 培植至三葉期 4 酮（ AR） 1:1為參照，在分光光度計 665 / 649 nm下測其光密度。 Chla含量 （ mg/g） =(－ ) V/(W 1000) Chlb含量 （ mg/g） =（ － ） V/(W 1000) 超氧化物歧化酶（ SOD）的測定 酶液制備 取小麥葉片 (去葉脈 ) g于預(yù)冷的研缽中，加 1 mL磷酸緩沖液在冰浴下研磨成勻漿，倒入10 mL刻度試管中，加緩沖液定容為 5 mL。取 2 mL于離心管離心 20 min，上清液即為 SOD粗提液。 酶活力測定 ： 用 NBT光還原法 [15]。 每個樣品取 8個潔凈干燥的微燒杯 (透明度好 )編 號，按表加入各試劑，
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