realtimepcr詳解--文庫吧
2025-04-24 22:33 本頁面
【正文】 (Ct目的基因 Ct管家基因 )實(shí)驗(yàn)組 (Ct目的基因 Ct管家基因 )對照 ? 2ΔΔ Ct表示的是實(shí)驗(yàn)組目的基因的表達(dá)相對于對照組的變化倍數(shù) ? 在目的基因與看家基因 擴(kuò)增效率相同 的情況下可以直接得到的目的基因相對于管家基因的定量，而不必制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 ? 更為簡便省時(shí)，也是相當(dāng)可靠的 重 復(fù) 性 問 題 ?判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果優(yōu)劣的重要指標(biāo) ?主要判斷指標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)差（ SD）和變異系數(shù)（ CV） ?影響結(jié)果重復(fù)性的因素 ?PCR 反應(yīng)擴(kuò)增的效率 ?優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，使反應(yīng)體系達(dá)到最佳擴(kuò)增效率 ?目的基因的初始濃度 ?使用初始濃度具有較高數(shù)量級的樣本或作平行孔 ?標(biāo)準(zhǔn)曲線的影響 ?5個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)品，涵蓋待測樣本中目的基因量可能出現(xiàn)的全部濃度范圍 ?理想的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)與樣本具有高同源性 ：質(zhì)粒 DNA 或是體外合成、轉(zhuǎn)錄的 RNA 影 響 敏 感 度 的 因 素 ? 反應(yīng)體系中形成的引物二聚體的影響 ?可以用水解探針代替 SYBR Green I， 有文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)使用水解探針的敏感性要比
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