植物學(xué)大實(shí)驗(yàn)論文砷脅迫對(duì)小麥幼苗生長(zhǎng)和生理生化特征的影響研究-文庫吧
2025-05-16 07:54 本頁面
【正文】 到 15 株，置于溫暖處生長(zhǎng)。幼苗初露后，每隔 1d 噴水一次。待幼苗長(zhǎng)至一葉一心后換用 1/4Hoagland培養(yǎng)液培養(yǎng)。 砷 脅迫處理 至 小麥 幼苗長(zhǎng)至 2 葉 期后， 選擇生長(zhǎng)狀況一致的小麥幼苗 30 株移入燒杯， 六 個(gè)燒杯（用黑色塑料袋包裹） 每杯 5 株 ， 燒杯 的 泡沫板上 做好 標(biāo)記，以 3 盆為對(duì)照，繼續(xù) 用1/4Hoagland 培養(yǎng)液培養(yǎng) ， 3 盆用 1/4Hoagland 培養(yǎng)液培養(yǎng)并加 15181。mol/L[67] Na2HASO4處理，分別標(biāo)記為 CK、 TK。處理期間繼續(xù)定期 換 培養(yǎng)液 0， 4， 8d 進(jìn)行非損壞性生長(zhǎng)觀察，處理 12d 時(shí)，分別取各盆植株各項(xiàng)生理生化指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。 小麥 植株生長(zhǎng)觀察 于 0， 4， 8， 12d 砷 處理 后，每盆標(biāo)定三株，連續(xù)調(diào)查株高、葉長(zhǎng)、葉寬、葉片數(shù)。記錄并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。測(cè)量工具為普通厘米尺，取平均值。株高的測(cè)定：每株小麥苗從沙層表面到最長(zhǎng)葉片頂端的高度；葉長(zhǎng)的測(cè)定：最長(zhǎng)的葉子從葉鞘基部到葉頂端的長(zhǎng)度；葉寬的測(cè)定：最寬的葉片中間最寬處的寬度，取平均值，各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 組織含水量測(cè)定 處理 12d 時(shí) ，取上述觀察的完整植株，分別稱取地上和地下部分樣品鮮重（ FW），后 70℃烘干至恒重，稱量干重（ DW），分別計(jì)算地上部和地下部的組織含水量（ %） =（ FWDW） /DW 100%，取平均值，各 組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 小麥 組織中游離丙二醛（ MDA）含量測(cè)定 于每盆中分別取全展葉 ，剪去葉片基部和尖部 ，每一份樣品取 ，剪碎置于研缽中，分次加入 5%TCA， TCA 總量為 5ml，研磨成勻漿后，全部倒入 5ml 離心管中， 3000rpm下離心 10min。取上清液 2ml，加 %TBA 2ml，混合后在 100℃水浴上煮沸 30min，冷卻后再次離心一次。分別測(cè)定上清液在 450nm、 532nm 和 600nm 波長(zhǎng)下的消光度值。按公式 D532D600=155000 C L 算出 MDA 濃度（ μmol/L）；進(jìn)一步計(jì)算出單位重量組織中 MDA 含量 （ μmol/FW） 。式中 D532 和 D600 分別表示 532nm 和 600nm 波長(zhǎng)處的消光度值。 L 為比色杯密度（ cm）。還可以根據(jù)相應(yīng)組織的含水量進(jìn)一步換算成單位組織干重的 MDA 濃度（ μmol gFW1）。 各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 葉綠素?zé)晒鈩?dòng)力學(xué)參數(shù)的測(cè)定 用沒有經(jīng)受認(rèn)為機(jī)械損傷的植株上取全展葉，每盆取三片，減去葉基和葉尖后，用信封包裹，暗處理 30min 后用 PEA 測(cè)定葉綠素?zé)晒鈪?shù)。記錄 F0（初始熒光值）和 Fv/Fm（ Fm：最大熒光值， Fv：暗適應(yīng)條件下當(dāng)所有非光化學(xué)過程處于最小時(shí)的最大可變熒光， Fv=FmF0）。 Fv/Fm： PSⅡ 的最大光化學(xué)量子產(chǎn)量，當(dāng)植物收到逆境脅迫時(shí)， Fv/Fm會(huì)顯著下降。 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 根活測(cè)定 取 %TTC 溶液 放入 10ml 試管中，加少許 Na2S2O4 粉搖勻后立即產(chǎn)生紅色的甲腙。再用乙酸乙酯定容至刻度，搖勻。然后分別取此液 、 、 、 置于 10ml 容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含甲腙 25ug、 50ug、100ug、 150ug、 200ug 的標(biāo)準(zhǔn)比色系列，以空白做參比，在 485nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 稱取根尖樣品 ，放入 10ml 燒杯中，加入 %TTC 溶液和磷酸緩沖液各 5ml。把根充分浸沒在溶液內(nèi)，在 37℃下暗保溫 ，此后加入 1mol/l 硫酸 2ml，以終止反應(yīng)。（與此同時(shí)做一空白實(shí)驗(yàn)，先加硫酸，再加根樣品，其它操作同上。） 把根取出，吸干水分后與乙酸乙酯 34ml 一起在研缽內(nèi)磨碎，以提出甲腙。將紅色提取液移入試管，并用少量乙酸乙酯把殘?jiān)礈?23 次，皆移入試管，最后加乙酸乙酯使總量為 10
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