smp-qc-0031-00生物指示劑標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程-文庫吧
2025-08-03 12:12 本頁面
【正文】 5％孔雀綠水溶液，微火加熱，使冒蒸汽，但不干涸（隨時(shí)補(bǔ)加染液）保持 5min； 傾去染液，待載玻片冷卻后用已滅菌去離子水沖洗涂片至孔雀綠不再褪色為止； 在涂片上方滴加 ％番紅液復(fù)染 1min 后水洗； 用濾紙吸干后鏡檢。 結(jié)果判斷：芽胞呈綠色，菌體和芽胞壁呈微紅色。 生物指示劑載菌量檢測 使用儀器及材料 水浴鍋： 0～ 100℃ 其他 材料： 250mL 燒杯、 16125mm 試管、 90mm15mm 的培養(yǎng)皿、秒表 培養(yǎng)基：大豆酪蛋白消化瓊脂培養(yǎng)基（ TSA） 稀釋液：無菌生理鹽水、無菌純化水 。 操作過程 從生物指示劑原始包裝中無菌取出三個(gè)指示條，于預(yù)裝有 100ml 冷無菌純化水的帶攪拌子的 250ml的杯中。 攪拌 3～ 5 分鐘， 至 得到均勻的混懸液。 移取 10ml混懸液于 16125mm 的螺旋試管中。 標(biāo) 題 生物指示劑標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程 編 碼 SMPQC003100 控制章： 第 3頁共 8頁 對(duì)于紙載蒸汽滅菌指示劑， 將此管置于 95～ 100℃ 水浴中，當(dāng)溫度到達(dá) 95℃時(shí)開始計(jì)時(shí)，加熱 15 分鐘；對(duì)于干熱或環(huán)氧乙烷滅菌指示劑，將此管置于 80～ 85℃水浴中，當(dāng)溫度到達(dá) 80℃ 時(shí)開始計(jì)時(shí)，加熱 10 分鐘。 迅速將此管置于 0～ 4℃ 的冰水浴中冷卻。 吸取 1ml 于合適的管中，同時(shí)做兩份，用無菌純化水稀釋至合適的倍數(shù)，使每皿中形成的菌落數(shù)為 30～ 300cfu，但不得少于 6 cfu。 分別吸取 適宜稀釋度的溶液于兩個(gè) 1590mm 的平皿中。在 20 分鐘內(nèi)于每皿傾注已融化并冷卻至 45～ 50℃ 的 TSA 培養(yǎng)基 20ml，混勻，待凝固后倒置培養(yǎng)。 對(duì)于蒸汽滅菌指示劑，在 55～ 60℃ 培養(yǎng)，其它指示劑在 30～ 35℃ 培養(yǎng)。 在 24 和 48 小時(shí)后觀察結(jié)果，并記錄。以 48 小時(shí)的菌落數(shù)，及相應(yīng)的稀釋倍數(shù)計(jì)算出每個(gè)指示劑的平均孢子數(shù)量。 只有 48 小時(shí)的菌落數(shù)的對(duì)數(shù)大于或等于 24 小時(shí)的值，此次試驗(yàn)方才有效。 生物指示劑 D 值檢測 ： 油浴應(yīng)能調(diào)至所需的測試溫度（室溫至 200℃ 即可），精度 177?！?，應(yīng)有足夠容量（ 3～ 5L），以使整個(gè)毛細(xì)管架浸入油浴時(shí)，溫度波動(dòng)不會(huì)超過 ℃ 。要定期校驗(yàn)油浴的穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性和精確度。 ： 毛細(xì)管尺寸為 ∮ （ ） 100mm玻璃毛細(xì)管，一端應(yīng)事先封口。 ： 毛細(xì)管架用于固定毛細(xì)管。制作該試管架的材料（不銹鋼）必須至少能耐受 150℃ 。管架分三層，底層用玻璃纖維布或銅絲網(wǎng)（ 40目）裹住并沿壁緊緊縫合，上中層要使能毛細(xì)管插入（建議使用網(wǎng)孔為 ），以使其定位。頂部有把手，以便拿取。 ： 用大號(hào)鑷子將毛細(xì)管放入熱油中，或從油浴中取出，聚四氟乙烯膜可保護(hù)毛細(xì)管并防止滑動(dòng)。 （毛細(xì)管）注射器具 ： 標(biāo)有 50μl刻度、容量 500μl。平口針頭直徑小于，長度大于 90mm。 旋渦振蕩混合器、 90mm15mm（高）的平皿若干、秒表等。 標(biāo) 題 生物指示劑標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程 編 碼 SMPQC003100
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1