植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)(2)(已改無錯(cuò)字)
2023-06-21 04:08:41 本頁面
【正文】 胞培養(yǎng)法進(jìn)行生產(chǎn)和研究 。 我國在 “ 八五 ” 、 “ 九五 ” 和 “ 863計(jì)劃 ” 中連續(xù)撥款資助工業(yè)化培養(yǎng) 和 生產(chǎn) 抗腫瘤藥物紫杉醇 的研究 ， 目前已達(dá)到 60mg/L的世界先進(jìn)水平 。 復(fù)習(xí) 請列舉出 3至 5種由大規(guī)模培養(yǎng)植物細(xì)胞獲得的有經(jīng)劑價(jià)值的產(chǎn)物。 紫草寧 抗腫瘤藥物紫杉醇 薯蕷皂苷 、 人參皂角苷 和 維斯納精（ visnagin） 植物細(xì)胞或原生質(zhì)體的固定化培養(yǎng) 由于固定化植物細(xì)胞培養(yǎng)比自由懸浮細(xì)胞培養(yǎng)具有較高的機(jī)械穩(wěn)定性 、 產(chǎn)率 ，更長的穩(wěn)定 （ 生產(chǎn)期 ） 等許多優(yōu)點(diǎn) ， 因此 ， 通常采用固定化來進(jìn)行植物細(xì)胞的培養(yǎng) 。 這類培養(yǎng)包括了植物細(xì)胞和原生質(zhì)體的固定化培養(yǎng) 。 植物細(xì)胞固定化的常用方法有哪些？ 問題 細(xì)胞固定化 是將細(xì)胞包埋在惰性支持物的內(nèi)部或貼附在它的表面 。 其前提就是通過懸浮培養(yǎng)獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞 。 針對上述細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的缺點(diǎn) ， Brodelius等 （ 1979） 首次報(bào)道了用 海藻酸鈣 成功固定培養(yǎng) 橘葉雞眼藤 、 長春花 、 希臘毛地黃 細(xì)胞 。 實(shí)驗(yàn)證明 ， 細(xì)胞分化和次生物質(zhì)積累之間存在正相關(guān)性 。 細(xì)胞固定化后的密集而緩慢的生長有利細(xì)胞的分化和組織化 ， 從而有利于次生物質(zhì)的合成 。 此外 ， 細(xì)胞固定化后不僅便于對環(huán)境因子的參數(shù)進(jìn)行調(diào)控 ， 而且有利于在細(xì)胞團(tuán)間形成各種化學(xué)物質(zhì)和物理因素的梯度 ， 這可能是調(diào)控高產(chǎn)次生物質(zhì)的關(guān)鍵 。 海藻細(xì)胞的固定化 為什么說植物細(xì)胞固定化培養(yǎng)更有利于次生生物的生成？ 問題 以下簡要介紹褐藻鈣固定植物細(xì)胞的技術(shù)路線： 大量培養(yǎng)植物細(xì)胞 混合 倒入塑料注射器 慢慢滴入含氯化鈣的培養(yǎng)基 一定濃度的海藻酸鈉溶液 海藻酸鈣固定的細(xì)胞團(tuán) 小規(guī)模固定化小規(guī)模的植物細(xì)胞固定化可用無菌的 塑料注射器 進(jìn)行 。 配制一定濃度的海藻酸鈉溶液 ， 高溫 、 高壓滅菌 。 通過離心或過濾收集植物細(xì)胞 ， 將細(xì)胞懸浮于海藻酸鈉溶液混合 ， 倒入塑料注射器中 ， 慢慢滴入到含有 CaCl2的培養(yǎng)基中 ， 不斷攪拌 ， 使之形成球形顆粒 ， 然后通過過濾收集顆粒 ， 用含有 CaCl2的培養(yǎng)基清洗后 ， 轉(zhuǎn)入裝有培養(yǎng)基的搖瓶中進(jìn)行培養(yǎng) 。 圖 122大規(guī)模植物細(xì)胞固定化裝置 含 CaCl2的培養(yǎng)基 蓋子 空氣出口 海藻酸鈉 +細(xì)胞懸浮液 噴嘴 無菌空氣入口 大規(guī)模固定化植物細(xì)胞的大規(guī)模固定化原則上可根據(jù)上述方法進(jìn)行 ， 但是不能再用塑料注射器 ，而需要采用如圖 122所示的大規(guī)模細(xì)胞固定化裝置進(jìn)行細(xì)胞的固定化 。 卡拉膠固定化 P230 瓊脂糖固定化 P231 瓊脂固定化 P231 由于原生質(zhì)體比完整的細(xì)胞更脆弱 ， 因此 ， 只能采用最溫和的固定化方法進(jìn)行固定化 。 通常也是用海藻酸鹽 、 卡拉膠和瓊脂糖進(jìn)行固定化 。 原生質(zhì)體的固定化 用卡拉膠固定化植物細(xì)胞方法有哪些？ 問題 瓊脂糖固定化和瓊脂固定化的最大優(yōu)點(diǎn)是什么？ 在植物細(xì)胞固定化的四種方法，哪些方法需要其它離子來保持膠的穩(wěn) 定性？分別用什么離子？ 總之 ， 人類迄今通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得的 生物堿 、 維生素 、 色素 、抗生素 以及抗腫瘤藥物不下 50多個(gè)大類 ， 其中已有 30多種 次生物質(zhì)的含量在人工培養(yǎng)時(shí)已達(dá)到或超過親本植物的水平 。 在已研究過的 200多種植物細(xì)胞培養(yǎng)物中 ， 已發(fā)現(xiàn)可產(chǎn)生 300余種對人類有用的成份 ， 其中不乏臨床上廣為應(yīng)用的重要藥物 。 利用培養(yǎng)植物細(xì)胞工廠化生產(chǎn)生物天然次級代謝產(chǎn)物的美好前景已經(jīng)十分清楚地展現(xiàn)在我們面前 。 深入發(fā)掘我國特有的巨大中草藥寶庫 ， 結(jié)合現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) ， 我國植物細(xì)胞次生物質(zhì)的研制與生產(chǎn)一定會(huì)碩果累累 ， 后來居上 。 植物細(xì)胞培養(yǎng)方式 植物細(xì)胞的培養(yǎng)方式主要有間歇培養(yǎng) 、 連續(xù)和固定化培養(yǎng)等多種 。 間歇培養(yǎng) 兩級或多級間歇培養(yǎng) 流加間歇培養(yǎng) 閱讀課本 P232233 8分鐘 固定化細(xì)胞培養(yǎng) 連續(xù)培養(yǎng) 單級連續(xù)培養(yǎng) 多級連續(xù)培養(yǎng) 回流式連續(xù)培養(yǎng) 固定化細(xì)胞培養(yǎng)具有許多潛在的優(yōu)越性 ， 如能提高生產(chǎn)能力 、 保護(hù)細(xì)胞 、 換液方便 、 能除去有毒或抑制性代謝物等 。 這些優(yōu)越性使固定化細(xì)胞培養(yǎng)具有很大的吸引力 。 選用固定化細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)具有如下兩個(gè)條件：目的產(chǎn)物應(yīng)自然分泌到培養(yǎng)液中 ，
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