【正文】 時瓶中溶液開始微沸，繼續(xù)加熱之 5 min。取出放入冷水槽，冷卻至室溫。 注：通過實測得知氯化鈣 乙酸溶液的沸點為 118120 ℃，當(dāng)甘油浴的溫度回升至119177。 1 ℃時，樣品瓶中溶液開始微沸，因此也可根據(jù)瓶中液體沸騰程度 ，校準(zhǔn)控溫儀的溫度 。 提?。?將水解液全部轉(zhuǎn)入 100 ml 容量瓶中，用 30ml 蒸餾水多次沖洗錐形瓶，洗液并入容量瓶中，加 1 ml 硫酸鋅溶液，搖勻，再加 1 ml 亞鐵氰化鉀溶液，充分搖勻以沉淀蛋白質(zhì)。若有泡沫，可加幾滴無水乙醇消除。用蒸餾水定容，搖勻，過濾，棄去 1015 ml 初濾液，濾液供 測定。 測定：測定前，用空白液（氯化鈣 乙酸液：蒸溜水 =6： 4）調(diào)整旋光儀零點，再將濾液裝入旋光管，在 20177。 1 ℃下進(jìn)行旋光測定，取兩次讀數(shù)平均值。 6 ） 結(jié)果計算 計算公式 ： 粗淀粉（干基）的含量按下式汁算： 粗淀粉（ %） = 203H)1LW ( 10a6??? 式中： a― 在旋光儀上讀出的旋轉(zhuǎn)角度； L― 旋光管長度， dm； W― 樣品重， g； 203― 淀粉比旋度； H― 樣品水分含量，％。 結(jié)果表示 ： 平行測定的數(shù)據(jù)用算術(shù)平均值表示，保留小數(shù)后兩位。 允許相對誤差 ： 谷物籽粒祖淀粉含量的兩個平行測定結(jié)果的相對誤差不得大于 %。 XXXX 生物化學(xué)有限公司 酒精工藝 技術(shù)規(guī)程 第 24 頁 共 49 頁 谷物種子內(nèi)含可溶性搪和脂肪較少，經(jīng)過多次洗搪與不洗鋪、脫脂與不脫脂對比試驗證明，其中有的谷物籽拉（小麥，水稻、高梁等）粗淀粉測定結(jié)果極相近，均在允許誤差范圍之內(nèi)，故本標(biāo)準(zhǔn)不要求脫脂與脫搪處理。如遇有特殊樣品（脂肪含量超 過 5%，可溶性搪含量超過 4%）需要脫脂或脫搪時，可將稱好的樣品放入 50ml 離心管中，用乙醚脫脂，然后用 60％熱乙醇（以重量計）攪拌，離心，傾去上清液，重復(fù)洗至無糖反應(yīng)為止。最后用 60ml 氮化鈣 乙酸溶液將離心管內(nèi)殘留物全部轉(zhuǎn)入 250ml 錐形瓶進(jìn)行粗淀粉測定。 中間品控制指標(biāo)及 過程檢驗方法 中間品控制標(biāo)準(zhǔn) 檢測項目 單位 控制標(biāo)準(zhǔn) 液化醪糖度 BX。 177。 2 發(fā)酵 成熟醪酒度 含量 %vol ≥ 發(fā)酵殘總糖 % ≤ 發(fā)酵還原糖 % ≤ 發(fā)酵 殘淀粉 % ≤ 發(fā)酵殘糊精 % ≤ 中間品檢測方法 發(fā)酵醪液中乙醇含量的檢驗 1） 目的 用于發(fā)酵醪液中的酒精含量的測定，以確定發(fā)酵水平，生產(chǎn)狀況。 2） 定義 乙醇（酒精）體積濃度，是指在 20時，酒精水溶液中所含乙醇的體積與在同溫度下該溶液總體積的百分比，以 %（ V/V）表示。 3） 取樣 由車間操作工按照規(guī)定的取樣頻次，用干凈的容器取樣送至質(zhì)量控制部所屬中間品化驗室 ,由當(dāng)班化驗員按照規(guī)定的檢驗方法進(jìn)行檢驗。 4） 原理 根據(jù)乙醇濃度要與密度呈一定的反比關(guān)系，利用酒精計 (表 )進(jìn)行測定。 5） 儀器設(shè)備 XXXX 生物化學(xué)有限公司 酒精工藝 技術(shù)規(guī)程 第 25 頁 共 49 頁 蒸餾裝置：蒸餾燒瓶（ 500ml）、磨口直形冷凝管、容量瓶（ 100ml），量筒（ 100ml），套式加熱器（ 1000W 或 500W） 酒度計： 0~20% (V/V) 溫度計： 0~100℃ ，分度值為 ℃ 6)檢驗步驟 量取 100mL 帶渣的發(fā)酵醪液，置于 500mL圓底蒸餾燒瓶中，加入 100mL 蒸餾水，放置在套式加熱器中，接上冷凝管，打開加熱器和冷卻水，鎦出液收集于 100ml 容量瓶中，若室溫較高，為了防止酒精揮發(fā)可將收集容器浸于冷水或冰水中。蒸餾至餾出液接近100mL時停止加熱，取下。 添加適量蒸餾水以使餾出液體積恢復(fù)到初始的 100ml，混合均勻，然后倒入 100ml 量筒中，在室溫下靜置幾分鐘，放入洗凈擦干的酒精計，同時插入溫度計，平衡 3 分鐘，水平觀測酒精計，讀取酒精計與液體彎月面相切處的刻度示值，同時記錄溫度。根據(jù)測得的酒精計示值和溫度，查表校正成 20度時的乙醇濃度（酒精度）。 7)結(jié)果處理 檢驗完成后，當(dāng)班化驗員要及時填寫檢驗原始記錄；異常情況及時通知有關(guān)人員。 發(fā)酵醪液中揮發(fā)酸的檢驗 1)目的 檢測酒精發(fā)酵醪液中的揮發(fā)酸，以判斷發(fā)酵水平，觀測是否 存在雜菌感染。 2)取樣 由車間操作工按照規(guī)定的取樣頻次，用干凈的容器取樣送至質(zhì)量控制部所屬中間品化驗室 ,由當(dāng)班化驗員按照規(guī)定的檢驗方法進(jìn)行檢驗。 3)原理 酸堿中和反應(yīng)。 4)儀器： 堿式滴定管： 10mL 刻度 錐形瓶： 250mL；移液管： 10mL；量筒： 100mL 5)試劑 NaOH 溶液： ； 酚酞指示劑： 10g/L 6)分析步驟 XXXX 生物化學(xué)有限公司 酒精工藝 技術(shù)規(guī)程 第 26 頁 共 49 頁 測定酒分的蒸餾酒液 100mL 于 250mL 三角燒瓶中，加 10g/L 酚酞指示劑 2滴，以，微紅保持 30秒。（以 10mL 酒樣消耗 NaOH的毫升數(shù)為 1個酸度單位。） 7)計算 V消耗 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 ,ml cNaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 ,mol/L 標(biāo)準(zhǔn)溶液換算成 mol/L NaOH 的系數(shù) 8)結(jié)果處理 檢驗完成后，當(dāng)班化驗員要及時填寫檢驗原始記錄；異常情況及時通知有關(guān)人員。 總酸度的檢驗 1)目的 檢測酒精發(fā)酵醪液中的酸度，根據(jù)以判斷發(fā)酵水平，觀測是否存在雜菌感染。 2)取樣 由車間操作工按照 規(guī)定的取樣頻次，用干凈的容器取樣送至質(zhì)量控制部所屬中間品化驗室 ,由當(dāng)班化驗員按照規(guī)定的檢驗方法進(jìn)行檢驗。 3)原理 酸堿中和反應(yīng)。 4)儀器： 堿式滴定管： 10mL 刻度 ；錐形瓶： 250mL 移液管： 10mL；量筒： 100mL 5)試劑 NaOH 溶液： ；酚酞指示劑： 10g/L 6)分析步驟 取過濾后的發(fā)酵醪液 1~2ml 于 150ml 或 250mL 三角燒瓶中，加入 20ml 中性蒸餾水，加 10g/L酚酞指示劑 2 滴，以 ，微紅保持 30秒。（ 以 10mL 樣品消耗 NaOH 的 1 毫升為 1個酸度。） 7)計算 XXXX 生物化學(xué)有限公司 酒精工藝 技術(shù)規(guī)程 第 27 頁 共 49 頁 1???? VVX V1 為 2ml時，公式簡化為： X=50Vc V消耗 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積 ,ml V1吸取發(fā)酵醪液的體積 ,ml cNaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 ,mol/L 標(biāo)準(zhǔn)溶液換算成 NaOH 的系數(shù) 8)結(jié)果處理 檢驗完成后，當(dāng)班化驗員要及時填寫檢驗原始記錄。異常情況及時通知有關(guān)人員。 PH 值的檢 驗 1) 目的 檢測溶液的 PH值。 2) 原理 將電極浸入被測樣液中，構(gòu)成一個原電池，其電動勢與溶液的 PH值有關(guān)，通過測量原電池的電動勢即可得出溶液的 PH 值。 3) 儀器的使用 電極使用前必須洗凈保存在 3mol/L的飽和氯化鉀溶液中，每天使用前必須經(jīng)過校正，斜率要求大于 90%，使用后洗凈仍然保存在飽和氯化鉀溶液中。 4) 儀器校正 每天使用前用接近于被測溶液 PH值的兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液按儀器使用說明書校正 PH計。 使用過程中不定期對 PH 計進(jìn)行驗證，方法為：使用標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液驗證儀器，當(dāng)指示值與緩沖溶液標(biāo)示值誤 差在 177。 內(nèi)時，即可認(rèn)為 PH計正常，否則需要對 PH 計進(jìn)行校正，使用時發(fā)現(xiàn)異常、更換電極、維修儀器等也需要重新校正儀器。 5) 測定步驟 接通電源、儀器預(yù)熱 10分鐘。 把電極用蒸餾水沖洗后，輕輕擦拭去表面水分（或者在用水沖洗后再直接用被測溶液沖洗電極），將電極浸入被測液體中，輕輕搖動電極，在 PH讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。 拿出電極，用蒸餾水清洗后插放原位。 XXXX 生物化學(xué)有限公司 酒精工藝 技術(shù)規(guī)程 第 28 頁 共 49 頁 6) 采用精密試紙（ ~）或（ ~）檢測發(fā)酵醪液的 PH值時，將 PH試紙插入醪液中，取出與標(biāo)準(zhǔn)比色板比較，確定其 PH 值。 7) 結(jié)果處理 檢驗完成后，當(dāng)班化驗員要及時填寫檢驗原始記錄。 外觀糖的檢驗 1)目的及定義 a 目的：發(fā)酵液外觀糖的測量，監(jiān)控發(fā)酵是否完全以及養(yǎng)分供給是否充足。 b 定義：系將醪液用紗布過濾后用糖度計直接測定并經(jīng)過校正的數(shù)值稱外觀糖度。一般正常成熟發(fā)酵醪液外觀糖度為零或負(fù)值，這主要是醪液中酒精成分造成的影響。 2） 取樣 由車間操作工按照規(guī)定的取樣頻次，用干凈的容器取樣送至質(zhì)量控制部所屬中間品化驗室 ,由當(dāng)班化驗員按照規(guī)定的檢驗方法進(jìn)行檢驗。 3） 原理 根據(jù)糖液濃度要與密度呈一定的對應(yīng)關(guān)系 ，根據(jù)糖度計直接測量的數(shù)值，利用糖度計(表 )進(jìn)行測定。這是一個假設(shè)的數(shù)值。 4） 儀器 糖度計： 0~30% ，分度值為 % 溫度計： 0~100℃ ，分度值為 ℃ 量筒： 250ml 5） 測定步驟 取雙層紗布過濾后的發(fā)酵濾液于量筒中靜置幾分鐘，放入洗凈擦干的糖度計，同時插入溫度計，平衡 3分鐘，水平觀測糖度計，讀取糖度計與液體彎月面相切處的刻度示值，同時記錄溫度。根據(jù)測得的糖度計示值和溫度，查表（附錄二）校正成 20℃ 時的糖液含量。 6） 結(jié)果處理 檢驗完成后，當(dāng)班化驗員要及時填寫檢驗原始記錄； 發(fā)酵醪液中還原糖的檢驗 1） 目的 用于發(fā)酵醪液中的還原糖的測定，以確定發(fā)酵水平，判斷發(fā)酵是否到了終點。 XXXX 生物化學(xué)有限公司 酒精工藝 技術(shù)規(guī)程 第 29 頁 共 49 頁 2） 取樣 由車間操作工按照規(guī)定的取樣頻次，用干凈的容器取樣送至質(zhì)量控制部所屬中間品化驗室 ,由當(dāng)班化驗員按照規(guī)定的檢驗方法進(jìn)行檢驗。 3） 原理 費林甲乙液混合后硫酸銅與氫氧化鈉作用生成的氫氧化銅立即與酒石酸甲鈉作用形成可溶的銅鹽復(fù)合物，葡萄糖在堿性中很快把銅鹽還原成氧化亞銅，而黃血鹽又使氧化亞銅成為可溶性復(fù)合物，不形成沉淀析出，而微過量的葡萄糖能把次甲基蘭還原成無色，說明銅已全部被葡萄糖還原，測定到 了終點（因銅的氧化能力比甲基蘭強，糖首先與銅反應(yīng)） 4） 主要試劑與溶液 a費林甲液 b費林乙液 c葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（ %） 5)主要儀器與設(shè)備 藥物天平、全自動電光天平、電熱恒溫干燥箱、電爐（ 1000W）、吸管（ 2 mL、 5 mL）、三角燒瓶（ 50 mL）、容量瓶（ 100 mL），回流管，漏斗，試管、酸式滴定管（ 25 mL 帶橡皮塞和排氣管） 6)測定步驟 a費林試劑空白的測定 取費林甲乙液各 5 mL 于 50 mL 的錐形瓶中加 %的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，加熱至沸后，以 45秒 /滴的速度，滴定 至蘭色消失。滴定消耗的葡萄即為試劑空白。 b測定 量取發(fā)酵醪 50ml定容到 250ml用脫脂棉過濾，取濾液 5ml加入盛有費林甲乙液各 5 mL的錐形瓶中，加適量的 %葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，加熱至沸，然后以 45 秒 /滴的速度滴定至藍(lán)色消失，加熱后滴定消耗的 %葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液不超過 1mL，否則重新滴定。 7)計算 )10(100250550 %)()/% 10 ????? ??? VVVVvm，殘還原糖（ 式中： V0—— 空白消耗 %葡萄糖的體積數(shù)， ml XXXX 生物化學(xué)有限公司 酒精工藝 技術(shù)規(guī)程 第 30 頁 共 49 頁 V1—— 樣品滴定消耗 %葡萄糖的體積數(shù)， ml 8)結(jié)果 處理 測定完畢后，當(dāng)班化驗員及時填寫檢驗原始記錄。若殘還原糖大于控制值，要及時通知有關(guān)人員。 總糖、糊精和淀粉的檢驗 1) 目的 用于發(fā)酵醪液殘總糖、過濾總糖、殘糊精、殘淀粉的測定 , 便于分廠考核原料 ,生產(chǎn)狀況 ,核算車間成本。 2) 取樣程序 由發(fā)酵車間（分廠）的當(dāng)班操作人員確認(rèn)發(fā)酵罐已充分?jǐn)嚢瑁悠肪哂写硇院?，將樣品送至質(zhì)量控制部所屬中間品化驗室，由當(dāng)班化驗員按規(guī)定的檢驗方法檢驗。 3)測樣程序 a原理 在一定濃度的鹽酸溶液中通過加熱回流 ,淀粉鏈被鹽酸破壞 ,從而生成葡萄糖等 具有還原性的單糖 ,費林甲乙液混合后硫酸銅與氫氧化鈉作用生成的氫氧化銅立即與酒石酸鉀鈉作用形成可溶的銅鹽復(fù)合物 ,葡萄糖在堿性中很快把銅鹽還原成氧化亞銅 ,而黃血鹽又使氧化亞銅成為可溶性復(fù)合物 ,不形成沉淀析出 ,而微過量的葡萄糖能把次甲基蘭還原成無色 ,說明銅已全部被葡萄糖還原 ,測定到了終點 (因銅的氧化能力比甲基蘭強 ,糖首先與銅反應(yīng) ) b主要試劑與溶液 （ 1）鹽酸（ 20%）： （ 2）氫氧化鈉 (20%):稱取 20g 氫氧化鈉溶解定容至 1000ml。 （ 3）酚酞指示劑 (%):稱取酚酞 5克溶于 1000ml 乙醇中 ,搖勻。 （ 4）費林甲液 :15 克硫酸銅加 克次甲基藍(lán)溶于蒸餾水中配成 1000ml 。 （ 5）費林乙液 :50 克酒石酸甲鈉加 5