地黃的生藥學(xué)研究-閱讀頁(yè)
2024-10-03 23:24本頁(yè)面
【正文】 肉質(zhì)根, 以后其中部生長(zhǎng)較快, 兩端生長(zhǎng)較慢, 從而發(fā)育成近紡錘狀塊根。在超微結(jié)構(gòu)方面, 做的工作較少, 僅見(jiàn)方瑾[12]對(duì)地黃的花藥進(jìn)行了研究。來(lái)源于初生壁細(xì)胞的p 2絨氈層, 細(xì)胞較小, 為分泌型絨氈層, 在小孢子階段產(chǎn)生烏氏體, 于兩細(xì)胞花粉階段解體。五、地黃化學(xué)研究進(jìn)展自20 世紀(jì)80 年代以來(lái), 對(duì)地黃的化學(xué)成分進(jìn)行了系列研究。地黃含有環(huán)烯醚萜、單萜及其苷類成分[1317] ,目前地黃中已分得的環(huán)烯醚萜類化合物共32個(gè), 其中以梓醇含量最高。 其水溶性成分主要有抗炎、保肝等作用。 其水、醇提取物有調(diào)節(jié)免疫功能的作用[18]。梓醇在鮮地黃、生地黃、熟地黃中的含量也有明顯差異,鮮地黃梓醇含量最高, % , 生地黃次之, % ,熟地黃含量最低。因此, 從梓醇含量上也可證明鮮地黃、生地黃、熟地黃作用的不同, 為中醫(yī)臨床使用提供了科學(xué)依據(jù)。梓醇的含量與地黃塊根的外形也有一定相關(guān)性, 形狀大的梓醇含量高, 小的含量低[19]。長(zhǎng)度比有較強(qiáng)的正相關(guān)性, 因此, 在地黃栽培過(guò)程中應(yīng)促使其塊根向短粗的方向發(fā)展。地黃苷A: 地黃中另一重要的環(huán)烯醚萜苷類化合物為地黃苷A , 是環(huán)烯醚萜雙糖苷, 地黃苷A 比梓醇穩(wěn)定。g , 從而為控制地黃的質(zhì)量提供了另一可行的測(cè)定方法[23]。 對(duì)不同生長(zhǎng)時(shí)期地黃腺苷含量的測(cè)定表明, 地黃腺苷的含量10 月份明顯高于8, 9 月份。通過(guò)比較同一株地黃母根及塊根中腺苷的含量, 母根也含較多的腺苷[25] , 因此, 在利用藥材資源時(shí)應(yīng)考慮保留母根。通過(guò)高效液相色譜法測(cè)得麥角甾苷的含量在鮮地黃、生地黃和熟地黃中也有差異, % , % ,% , 與梓醇的變化趨勢(shì)一致[26]。鮮地黃中水蘇糖含量高于干地黃,而六碳糖、蔗糖及三糖含量低于干地黃,干地黃中僅含少量還原糖,而熟地黃中含有大量還原糖,其苷類的結(jié)構(gòu)及含量有明顯變化。此外,從地黃鮮葉中還分離鑒定了金圣草黃素、木樨草素及梓醇等。 熟地黃加酒燉為22. 244 mg/ g ,不加酒燉為5. 231 mg/ g。其水溶性游離氨基酸的量與友田正司所報(bào)道基本一致。只是不存在甲硫氨酸與組氨酸,但存在脯氨酸與胱氨酸。倪慕云等報(bào)道[31] ,干地黃中微量元素含量順序?yàn)? K Mg Ca Na Fe Cu Zn Mn Sr Co Pb。Mg、Na、K、Ca 的含量與鈴木章報(bào)道基本一致,而Cu、Mn、Fe 的含量差別較大。其中前4 種含量大于500 ppm。但熟地黃中Sr 、Mn 的溶出率略降低,而Cu 稍升高,水燉較酒燉熟地黃中Zn、Al 、Fe 的溶出率稍高。 六、理化鑒別 顯微鑒定[33]按照中國(guó)藥典規(guī)定：本品橫切面有木栓細(xì)胞數(shù)列。韌皮部較寬，分泌細(xì)胞較少。木質(zhì)部射線寬廣；導(dǎo)管稀疏，排列成放射狀。木栓細(xì)胞淡棕色。分泌細(xì)胞形狀與一般薄壁細(xì)胞類似，內(nèi)含橙黃色或橙紅色油滴狀物。薄層鑒別中國(guó)藥典[33]規(guī)定：取本品粉末2g，加甲醇20ml，加熱回流1 小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液濃縮至約5ml，作為供試品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠Ｇ薄層板上，以三氯甲烷甲醇水(14:6:1) 為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茴香醛試液，在105℃ 加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。劉明等[34]采用TLC法對(duì)熟地黃藥材進(jìn)行定性鑒別，使用硅膠G薄層板，以三氯甲烷甲醇水（12：8：1）為展開(kāi)劑，以地黃苷A和地黃苷D為對(duì)照品，展開(kāi)后以5%香草醛濃硫酸為顯色劑。李軍等[35]采用硅膠G板對(duì)地黃中的果糖進(jìn)行鑒別，以正丁醇吡啶水（16：15：4）為展開(kāi)劑，選用苯胺二苯胺磷酸為顯色劑，斑點(diǎn)明顯，分離效果好。秋季采挖，除去蘆頭、須根及泥沙，鮮用；或?qū)⒌攸S緩緩烘焙至約八成干。鮮地黃性寒、味甘苦,以清熱生津、涼血止血為主。 A B圖1 A 塊根 B 原植物1 實(shí)驗(yàn)材料、儀器與試劑1. 1 實(shí)驗(yàn)材料地黃塊根經(jīng)鑒定為參科植物地黃(Rehmannia glutinosa Libosch. )干燥的塊根1. 2 儀器與試劑旋轉(zhuǎn)切片機(jī)(上海醫(yī)療器械四廠)；儀器 Shimadzu LC10ATVP高效液相色譜儀；Shimadzu SPD10AVP紫外檢測(cè)器；MettlerM200電子分析天平(萬(wàn)分之一,十萬(wàn)分之一)；BX—60 型OLYMPUS顯微鏡及圖象分析系統(tǒng)； XSZ—3G生物顯微鏡(重慶光電生物儀器有限公司)；蒸餾水；水合氯醛液；稀甘油液；番紅染色液；固綠染色液；蛋清甘油；其他試劑均為分析純。外皮薄，表面淺紅黃色，具彎曲的縱皺紋、芽痕、橫長(zhǎng)皮孔樣突起及不規(guī)則疤痕。氣微，味微甜、微苦。表面棕黑色或棕灰色，極皺縮，具不規(guī)則的橫曲紋。3 顯微鑒別 橫切面 木栓細(xì)胞數(shù)列。韌皮部較寬，分泌細(xì)胞較少。木質(zhì)部射線寬廣，導(dǎo)管稀疏，排列成放射狀。木栓細(xì)胞淡棕色。分泌細(xì)胞形狀與一般薄壁細(xì)胞相似，內(nèi)含橙黃色或橙紅色油滴狀物。如圖3 所示A B圖3 A分泌細(xì)胞 B導(dǎo)管4 薄層色譜鑒定取本品粉末2g，加甲醇20ml，加熱回流1小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液濃縮至約5ml，作為供試品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點(diǎn)于同一硅膠Ｇ薄層板上，以三氯甲烷甲醇水(14:6:1) 為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以茴香醛試液，在105℃ 加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。如圖4所示圖4 地黃的TLC圖5 含量測(cè)定 取本品（生地黃）切成約5mm的小塊，經(jīng)80℃減壓干燥24小時(shí)后，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，稱定重量，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)。 ,置于5 ml量瓶中,用流動(dòng)相定容至刻度,搖勻，即得。 線性關(guān)系考察 精密吸取上述標(biāo)準(zhǔn)品溶液50，250，500，750，1000μL，置于10mL量瓶中,用流動(dòng)相定容至刻度,搖勻 , 分別精密吸取上述溶液各20μL,注入液相色譜儀中，在上述色譜條件下測(cè)定梓醇峰面積，以梓醇的濃度為（mg/mL）橫坐標(biāo)，梓醇面積為縱坐標(biāo)，經(jīng)線性回歸，回歸方程為：A=2107C638261，r=。 取同一供試品溶液，在上述色譜條件下，連續(xù)進(jìn)樣5次，每次20μL，測(cè)定山綠茶峰面積，RSD=%。 取同批地黃粉末5份，按“”項(xiàng)下的制備方法平行配制，分別進(jìn)樣測(cè)定梓醇的含量，結(jié)果RSD=%
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