dna是生物遺傳的主要物質(zhì)基礎(chǔ)-閱讀頁
2025-01-11 05:09本頁面
【正文】 聚合酶活性（ ?亞基， 速率高）； 具有 3’ ? 5’ 外切酶（ ?亞基） 的校對功能，提高 DNA復(fù)制的保真性；還具有 5’ ? 3’ 外切酶活性（單鏈有效，其意義未知）。 許多研究證明： DNA聚合酶 Ⅲ 是完整大腸桿菌細(xì)胞中主要負(fù)責(zé) DNA鏈延長的酶。用聚丙烯酰胺凝膠電泳分離純化一萬倍的 DNA聚合酶 Ⅲ ，得到的主要成分為相對分子量 140 000的多肽（ α 亞基）。一旦全酶結(jié)合在正確的起始位置上， DNA聚合酶 Ⅲ 輔酶就以游離的形式釋放，隨后 DNA聚合酶 Ⅲ 復(fù)合物催化子代 DNA鏈的延長（右圖）。如下圖中， A為單鏈自身回折作為模板，形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)。 D為環(huán)狀 DNA 進(jìn)行的反應(yīng)。 DNA聚合酶具有 ”校對 “作用： DNA聚合酶的 3‘→5’的外切酶活力是校對新生DNA鏈和改正聚合酶活性所造成 ”錯配 “的一種手段。所以當(dāng)復(fù)制叉沿模板鏈移動時，所加入的每個脫氧核苷酸單位都將受到檢查（如右圖）。 復(fù)制的準(zhǔn)確性高于轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯過程。 由上可以歸納出 DNA聚合酶的反應(yīng)特點： ① 以四種脫氧核糖核苷三磷酸作為底物；② 反應(yīng)需要接受模板的指導(dǎo)； ③ 反應(yīng)需要引物 3’ －羥基存在； ④ DNA鏈的延長方向為5‘→3’ ； ⑤ 產(chǎn)物 DNA的性質(zhì)于模板相同； ⑥ 合成過程種有校正作用。 真核生物 DNA聚合酶：主要作用類似于大腸桿菌聚合酶，但有不同。 但是它不能將兩條游離的 DNA單鏈連接起來。 T4噬菌體的 DNA連接酶 不僅能在模板鏈上連接 DNA和 DNA鏈之間的切口，而且能連接無單鏈粘性末端的平頭雙鏈 DNA。解螺旋酶 （解鏈酶） ：通過水解 ATP將 DNA兩條鏈打開。 每解開一對堿基需要水解 2個ATP分子 。分解 ATP的活力要有 單鏈 DNA的存在。大 腸桿菌解螺旋 酶 Ⅰ 、 Ⅱ 和 Ⅲ 可以沿模板 鏈 的 5‘→3‘ 方向隨著復(fù)制叉的前進(jìn)而移動，而 rep蛋白則在另一條模板鏈上沿 3’ →5‘ 方向移動。：⑴ 單鏈結(jié)合蛋白 (SSBsinglestrand binding protein)： 穩(wěn)定已被解開的 DNA單鏈，阻止復(fù)性和保護(hù)單鏈不被核酸酶降解。⑵ 引發(fā)前體 :它由多種蛋白質(zhì) dnaA、 dnaB、 dnaC、 n、 n’ 、n’’ 和 i組成。 引發(fā)體可以沿模板鏈 5’ ? 3’ 方向移動 ,具有識別合成起始 位點的功能，移動到一定位置上即可引發(fā) RNA引物的合成。引發(fā)體的移動與 復(fù)制叉 移動的方向相同，與 岡崎片段 的合成方
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