熒光定量pcr技術(shù)在臨床檢測中的應(yīng)用-閱讀頁
2024-08-20 14:01本頁面
【正文】 行 1981年，我國在上海首次報道了 HFMD病例 1987年在中國分離到 CVA16 1995年以來，我國陸續(xù)在武漢、深圳、上海、重慶、山東和安徽等地的 HFMD患者中分離到 EV71病毒。實(shí)驗(yàn)室檢測發(fā)現(xiàn)EV71是引起山東臨沂 HFMD的主要病原，同時還檢測到Echo3 和 /或 CVA16。 手足口病的實(shí)驗(yàn)室檢測 ? 手足口病的診斷一般是通過采集適當(dāng)?shù)呐R床標(biāo)本后進(jìn)行基因檢測、抗原檢測、血清學(xué)抗體檢測、病毒分離和病毒鑒定，如果沒有采到合格的臨床標(biāo)本，或無法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測。 ? 通常用于腸道病毒分離的細(xì)胞系為 RD、 HEp Vero等，聯(lián)合使用上述的兩種或更多細(xì)胞有助于分離到更多的腸道病毒。科赫（１８４３ —— １９１０），德國細(xì)菌學(xué)家，結(jié)核桿菌發(fā)現(xiàn)者 ?結(jié)核病是一個全球性的問題，近年來在世界范圍內(nèi)出現(xiàn)流行，且呈增長的趨勢 TB 結(jié)核桿菌流行現(xiàn)狀（ 2） ? 我國結(jié)核病的疫情僅次于印度而居世界第二位 ? 2022年，全國人口結(jié)核感染率為 %，其中 15～ 44歲人群占了 53％ ，每年約有 25萬人死于結(jié)核病 結(jié)核桿菌引起的感染 ?肺部感染：原發(fā)性肺結(jié)核，開放性肺結(jié)核。 常規(guī)結(jié)核病實(shí)驗(yàn)室診斷方法及不足 1. 痰涂片作抗酸染色： 陽性率低 、費(fèi)時 2. 細(xì)胞培養(yǎng)“金標(biāo)準(zhǔn)”： 周期太長 (34W) 3. 血清學(xué)診斷： a. 接種 BCG可出現(xiàn)陽性 b. 不能區(qū)分活動性結(jié)核病和治愈后留下?lián)p傷灶的病人 c. 交叉反應(yīng)，假陽性 不能早期診斷！容易漏診、誤診！ TB 熒光定量 PCR檢測 TBDNA的意義 1. 能穩(wěn)定檢測 10copy的 TBDNA ，靈敏度高 ，特異性強(qiáng) 2. 早期、快速、準(zhǔn)確地診斷結(jié)核病。 4. TBDNA濃度可用于判斷療效： 痰標(biāo)本中結(jié)核桿菌的數(shù)量呈逐漸下降趨勢 ，TBDNA拷貝數(shù)下降。持續(xù)性咳嗽。 ? MP感染與小兒支氣管哮喘密切相關(guān)。 2. 治療方案與細(xì)菌、病毒感染的治療方案不同 3. 流行病學(xué)調(diào)查。甲型流感病毒根據(jù)其表面 (H和 N)結(jié)構(gòu)及其基因特性的不同又可分成許多亞型，至今甲型流感病毒已發(fā)現(xiàn)的血凝素有 16個亞型 (H1H16)，神經(jīng)氨酸酶 9個亞型 (N1N9)。與之相對應(yīng)，我國的官方文件從 5月 1日起相繼用“甲型 H1N1流感”代替原來的“人感染豬流感”。 世界衛(wèi)生組織的聲明說，根據(jù)目前掌握的科學(xué)依據(jù)，此次流行的病毒僅在人際間傳播，尚無證據(jù)表明它在豬群內(nèi)傳播，或由豬向人傳播，也無證據(jù)表明人因食用豬肉或相關(guān)產(chǎn)品染病。囊膜上有許多放射狀排列的突起糖蛋白，分別是血凝素 HA、神經(jīng)氨酸酶 NA 和 M2蛋白。甲型 H1N1流感病毒為單股負(fù)鏈 RNA 病毒，基因組約為 kb，由大小不等的 8 個獨(dú)立片段組成。感染這種病毒的動物均可傳播。某些毒株如 H1N1可在人與人之間傳播，其傳染途徑與流感類似，通常是通過感染者咳嗽或打噴嚏等?；颊叨鄶?shù)年齡在 25歲至 45歲之間，目前報道以青壯年為主，應(yīng)注意老人和 兒童 。 人感染 甲型 H1N1流感后的早期癥狀與普通人流感相似，包括發(fā)熱、咳嗽、喉痛、身體疼痛、頭痛、發(fā)冷和疲勞等，有些還會出現(xiàn)腹瀉或嘔吐、肌肉痛或疲倦、眼睛發(fā)紅等。 實(shí)驗(yàn)室檢查 1. 外周血象：白細(xì)胞總數(shù)一般不高或降低。常用的方法有雞胚接種法和細(xì)胞培養(yǎng)法。 人感染豬流感的診斷標(biāo)準(zhǔn) 1. 醫(yī)學(xué)觀察病例：曾到過甲型 H1N1流感疫區(qū)，或與病豬及甲型 H1N1流感患者有密切接觸史， 1周內(nèi)出現(xiàn)流感臨床表現(xiàn)者。 2 疑似病例：曾到過疫區(qū)，或與病豬及甲型H1N1流感患者有密切接觸史（也可流行病學(xué)史不詳）， 1周內(nèi)出現(xiàn)流感臨床表現(xiàn)，呼吸道分泌物、咽試子、痰液、血清 H亞型病毒抗體陽性或核酸檢測陽性。 4. 確診病例：從呼吸道標(biāo)本或血清中分離到特定病毒； RTPCR對上述標(biāo)本檢測，有甲型 H1N1病毒 RNA存在，經(jīng)過測序證實(shí)，或兩次血清抗體滴度 4倍升高，可確診為人感染甲型 H1N1流感。 ? 寄生在有核細(xì)胞中，貓和貓科動物是終宿主 ? 易感者多，免疫者少 ? 我國智力低下兒的弓形蟲感染率 28％ 畸形兒的弓形蟲抗體 IgM陽性率 ％ ? 艾滋病患者約有 20％～ 80％合并弓形蟲感染 ，造成艾滋病死亡的一個重要并發(fā)病 TORCH –TOX ? 人群自然感染率達(dá)到 6090%，多為隱性感染 ? 免疫功能低下 (懷孕、多次輸血、器官移植、 AIDS)發(fā)生顯性感染 ? 可發(fā)生垂直傳播，是宮內(nèi)感染和胎兒畸形的主要病毒之一 ? 圍生期感染 ? 血、尿、乳汁、精液、分泌物中都可檢出病毒 (二 ) 人巨細(xì)胞病毒感染 與致病 TORCHCMV ? 風(fēng)疹是一種世界性的病毒傳染病， 是造成畸胎及先天性疾病的病毒之一 ? 出疹前 1周至出疹后 5天均有傳染性 ? 人是風(fēng)疹病毒的唯一宿主 ? 風(fēng)疹感染后可獲得持久的免疫力，臨床顯性再感染并不多見。 ? 妊娠時體內(nèi)皮質(zhì)類固醇激素的增加以及細(xì)胞免疫功能的減弱，這種對正常人無害的再感染有可能造成病毒蔓延以至影響胎兒。 ? HSV感染后大多數(shù)個體不能徹底消滅病毒，也不能阻止復(fù)發(fā)，病毒以潛伏狀態(tài)長期存在宿主體內(nèi)。 ? 圍產(chǎn)期感染可引發(fā)新生兒皰疹，死亡率高達(dá) 50%以上。目前認(rèn)為 HSV是一種調(diào)節(jié)因素，能激活 HIV復(fù)制 ? 與宮頸癌關(guān)系密切 。 ? 血清學(xué)診斷： IgG： 人群自然感染率高達(dá) 6090%。 IgM： IgM(＋ )可能是原發(fā)性感染； IgM(－ )不能排除感染。 2. 有利于預(yù)測胎兒宮內(nèi)感染狀況及妊娠結(jié)局。 4. 器官移植、免疫系統(tǒng)疾病等病人監(jiān)控。 疾病的早期診斷 ? 1 乙型肝炎 病毒 （ HBV） 。 4 人類免疫缺陷病毒（ HIV） ? 5 解脲脲原體 (UU) 6 肺炎支原體 (MP) ? 7 單純皰疹 II型 8 人巨細(xì)胞病毒 （ HCMV） ? 9 人乳頭瘤病毒 （ HPV） 11 ? 10 高危型人乳頭瘤病毒 （ HPV 8個型） ? 11 沙眼衣原體 (CT) 12 a地中海貧血 ? 13 結(jié)核分支桿菌 (TB) 14 新型冠狀病毒 (SARS) 已獲證書 ? 熒光定量 PCR技術(shù)中國專利 ? 國家重點(diǎn)新產(chǎn)品 ? 多種熒光 PCR試劑盒新藥證書 ?多項(xiàng)國家、省部級等科技進(jìn)步獎 ? 三十余項(xiàng)國家、省部級重點(diǎn)科研項(xiàng)目 ? 業(yè)務(wù)遍布全國 1026家醫(yī)療衛(wèi)生單位 達(dá)安烙印
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