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實(shí)驗(yàn)技術(shù)及抗寄生蟲藥物doc-閱讀頁

2025-07-30 05:05本頁面
  

【正文】 便標(biāo)本上,自篩網(wǎng)上用刮片刮取糞便,置定量板與載玻片上,用一手的兩指壓住定量板的兩端,將刮片上的糞便填滿???,刮去多余糞便。經(jīng)1~2小時(shí)糞便透明后置鏡下計(jì)數(shù)。(九)淘蟲檢查法 為考核驅(qū)蟲療效,常需從糞便中淘取蠕蟲進(jìn)行鑒定與計(jì)數(shù)。檢查混雜在糞渣中的蟲體時(shí),應(yīng)在玻皿下襯以黑紙。也可以用注射器從孕節(jié)后端正中部插入子宮內(nèi)徐徐注射炭素墨水或卡紅,待子宮分支顯現(xiàn)后計(jì)數(shù)?;旌鸵褐糜?7℃溫箱內(nèi)過夜,過濾后即可應(yīng)用。第二節(jié) 血液檢查 血液檢查是診斷瘧疾、絲蟲病的基本方法。采血針用前必須消毒或用一次性針,一人一針以免交叉感染。先用冷水將重鉻酸鉀溶化,然后徐徐加入濃硫酸,同時(shí)用玻璃棒攪拌。薄、厚血膜可涂制在同一張玻片上(圖 176)。 圖176 薄、厚血膜制作 1)薄血膜制片:在載玻片1/3與2/3交界處蘸血一小滴,以一端緣光滑的 2)載片為推片,將推片的一端置于血滴之前,待血液沿推片端緣擴(kuò)散后,自右向左推成薄血膜。推動速度適宜。 3)厚血膜制片:于載玻片的另一端(右)1/3處蘸血一小滴(約10mm3),以推片的一角,將血滴自內(nèi)向外作螺旋形攤開,—1cm,厚薄均勻的厚血膜。固定時(shí)用小玻棒蘸甲醇或無水酒精在薄血膜上輕輕抹過??捎玫喂艿嗡诤裱ど?,待血膜呈灰白色時(shí),將水倒去,涼干。緩沖液的配制如下: 磷酸氫二鈉液:無水磷酸氫二鈉(Na2HPO4)。 M/15磷酸二氫鉀液:磷酸二氫鉀(KH2PO4),蒸餾水1000ml。 常用的染色劑有姬氏染劑(Giemsa39。s stain) 1)Giemsa染色法:此法染色效果良好,血膜褪色較慢,保存時(shí)間較久,但染色時(shí)間較長。將姬氏染劑粉置于研缽中(最好用瑪瑙研缽),加小量甘油充分研磨,加甘油再磨,直至50ml甘油加完為止,倒入棕色玻瓶中。 染色方法:~,將姬氏染液稀釋;比例約為15~20份緩沖液加一份姬氏染液。血片涼干后鏡檢。 3)Wright染色法: 此法操作簡便,適用于臨床診斷,但甲醇蒸發(fā)甚快,掌握不當(dāng)易在血片上發(fā)生染液沉淀,并較易褪色,保存時(shí)間不長。 ① 染液配制:~,甲醇97ml,甘油3ml。搖勻,24小時(shí)后過濾待用。 ② 染色方法:瑞氏染劑含甲醇,薄血膜不需先固定;而厚血膜則需先經(jīng)溶血,待血膜干后才能染色。滴染液使覆蓋全部厚、薄血膜上,30秒至1分鐘后用滴管加等量的蒸餾水,輕輕搖動載玻片,使蒸餾水和染液混合均勻,此時(shí)出現(xiàn)一層燦銅色浮膜(染色),3~5分鐘后用水緩慢從玻片一端沖洗(注意勿先倒去染液或直對血膜沖洗),涼干后鏡檢。 (2)厚血膜檢查:厚血膜的制作、溶血、固定與姬氏液染色同瘧原蟲。該染液的配制方法如下:取蘇木素1g溶于純酒精或95%的酒精10ml中,加飽和硫酸鋁銨(8%~10%)100ml,倒入棕色瓶中,瓶口用兩層紗布扎緊,在陽光下氧化2~4周,過濾,加甘油25ml和甲醇25ml,用時(shí)稀釋10倍左右,將溶血、固定的厚血膜置于德氏蘇木素液內(nèi)10—15分鐘,在1%酸酒精中分色1—2分鐘,蒸餾水洗滌1—5分鐘,至血膜呈藍(lán)色,再用1%—1分鐘,以水洗滌2—5分鐘,涼干后鏡檢。或取靜脈血1ml, %枸櫞酸鈉的試管中,搖勻,加水9ml,俟紅細(xì)胞溶化后,再離心2分鐘,倒去上清液,加水再離心,取沉渣鏡檢。 (1)肺吸蟲卵檢查:可先用直接涂片法檢查,如為陰性,改為濃集法集卵, 以提高檢出率。如未發(fā)現(xiàn)肺吸蟲卵,但見有夏科—雷登晶體,提示可能是肺吸蟲患者,多次涂片檢查為陰性者,可改用濃集法。分裝于數(shù)個(gè)離心管內(nèi),以1500rpm/min離心5—10分鐘,棄去上清液,取沉渣數(shù)滴涂片檢查。天冷時(shí)應(yīng)注意鏡臺上載玻片保溫。 (3)上述其他蠕蟲幼蟲及螨類等宜用濃集法檢查??蓹z查藍(lán)氏賈第鞭毛蟲滋養(yǎng)體、華支睪吸蟲卵、肝片形吸蟲卵和布氏姜片蟲卵等;在急性阿米巴肝膿腫患者膽汁中偶可發(fā)現(xiàn)大滋養(yǎng)體。為提高檢出率,常將各部分引流液加生理鹽水稀釋攪拌后,分裝于離心管內(nèi),以2000rpm/min,離心5—10分鐘,吸取沉渣涂片鏡檢。引流中的賈第蟲滋養(yǎng)體常附著在粘液小塊上,或蟲體聚集成絮片狀物。 3.尿液 取尿液3~5ml,離心(2000rpm/min)3~5分鐘,后取沉渣鏡檢。然后吸去脂肪層,離心,取沉渣鏡檢。陰囊皮膚經(jīng)碘酒精消毒后,用注射器抽取鞘膜積液作直接涂片檢查,也可以加適量生理鹽水稀釋離心,取沉渣鏡檢。 直接涂片法: 用消毒棉簽在受檢者陰道后穹窿、子宮頸及陰道壁上取分泌物,然后用生理鹽水涂片法鏡檢,即可發(fā)現(xiàn)活動的蟲體。懸滴法:先在一蓋玻片周緣涂一薄層凡士林,中間滴1~2滴生理鹽水。第四節(jié) 其他器官組織檢查 1.骨髓穿刺 主要檢查杜氏利什曼原蟲無鞭毛體。視年齡大小,選用17~20號帶有針芯的干燥無菌穿刺針,從髂骨前上棘后約1cm處刺入皮下當(dāng)針尖觸及骨面時(shí),~,即可拔出針芯,接一2ml干燥注射器,抽取骨髓液。2.淋巴結(jié)穿刺 (1)利什曼原蟲:檢出率低于骨髓穿刺,但方法簡便、安全。穿刺部位一般選腹股溝部,先將局部皮膚消毒,用左手拇指和食指捏住一個(gè)較大的淋巴結(jié),右手用一干燥無菌6號針頭刺入淋巴結(jié)。 (2)絲蟲成蟲:同上法獲取淋巴組織液,染色后鏡檢。取下之肌肉須立即檢查,否則幼蟲變得模糊,不易觀察。也可經(jīng)組織固定后作切片染色檢查。 (2)皮膚利什曼原蟲:在皮膚上出現(xiàn)丘疹和結(jié)節(jié)等疑似皮膚型黑熱病患者,可選擇皮損較明顯之處,作局部消毒,用干燥滅菌的注射器,刺破皮損處,抽取組織液做涂片;或用消毒的鋒利小剪,從皮損表面剪取一小片皮膚組織,以切面做涂片;也可用無菌解剖刀切一小口,刮取皮膚組織做涂片。如涂片未見原蟲,可割取小丘疹或結(jié)節(jié),固定后,作組織切片染色檢查。 (4)疥螨:參看“疥螨和疥瘡”一節(jié)。各型血吸蟲卵鑒別見表 174。也可取出一小塊病變粘膜組織,固定切片,染色檢查。取一小塊肺組織作涂片,自然 干燥后甲醇固定,用改良銀染色法進(jìn)行染色。 (2)1%亞硫酸氫鈉經(jīng)1分鐘,自來水沖洗后,蒸餾水洗滌3~4次。流水、蒸餾水各洗5分鐘。 (5)2%硫代硫酸鈉5分鐘,流水至少洗10分鐘。 (7)95%,99%,100%乙醇逐級脫水。 染色結(jié)果顯示,卡氏肺孢子蟲包囊呈圓形、卵圓形或不規(guī)則的多角形,囊壁為淡褐色或深褐色。 (盧思奇)26 / 26
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