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熒光性假單胞菌抗性基因的篩選-閱讀頁(yè)

2025-05-17 13:33本頁(yè)面
  

【正文】 4ul Taq酶 2ul 在 EP管中加入試劑后,分裝入 10個(gè) PCR管中, 19ul/管,其中 1管作為陰性對(duì)照, 1管作為陽(yáng)性對(duì)照,加入 1uL Pf5菌液作為模版,剩下 8管分別加入 1ul 模板 菌落 PCR實(shí)驗(yàn)流程 ? 根據(jù)各組所做的模板數(shù)目計(jì)算 mix,依次加入除模板之外的各試劑后混勻,離心,分裝 19 uL入 PCR管,對(duì) PCR管進(jìn)行編號(hào) ? 將活化好的菌液取 100 uL按照編號(hào)從 96孔板分別移到 EP管中,蓋緊蓋子,置于沸水中煮 10分鐘。放置梳子( 注意選擇足夠孔數(shù)的梳子 )。 2,點(diǎn)樣,電泳 將凝膠移入電泳槽,電泳槽中應(yīng)該有充足的 1x TAE緩沖液。每孔依次點(diǎn)樣 4 uL, 記錄每孔點(diǎn)入的樣品編號(hào) 。 120V 電泳 30 min 3,結(jié)果 凝膠成像記錄電泳結(jié)果 1 2 — 1 2 — 1 2 — M prn phl plt Prn: 786 bp Phl: 745 bp Plt: 438 bp
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