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可移動的遺傳因子轉(zhuǎn)座和染色體外遺傳因子-閱讀頁

2025-05-17 01:21本頁面
  

【正文】 代細胞的遺傳信息產(chǎn)生了重新組合,這種現(xiàn)象稱為遺傳重組。 ? 狹義的遺傳重組 :僅涉及 DNA分子的斷裂并重 新連接而造成基因重新組合的過程,即基因交換。 是最基本的 DNA重組方式 。 同源重組的產(chǎn)生: ? 產(chǎn)生條件: 只要兩條 DNA序列相同或相似,就可 以在序列的任何一點發(fā)生同源重組。 ② 兩個斷裂的單鏈的游離末端彼此交換,連接形成Holliday連接體。 ④ Holliday交叉的上部或下部旋轉(zhuǎn) 1800,中間體 切開并修復,形成兩個雙鏈重組體 DNA,分別為: 片段重組體和拼接重組體。 切開的鏈并非原來斷裂的鏈,重組體 異源雙鏈區(qū)的兩側(cè)來自不同親本 DNA。 ? 單鏈內(nèi)切酶活性和解旋酶活性使 DNA產(chǎn)生具有游離末端的單鏈--- RecA的作用位點 ? RecBCD有固定切割位點 單鏈區(qū)的 chi 位點 3180。GCTGGTGG3180。 3180。GCTGGTGG3180。 RecA 蛋白催化雙鏈和單鏈 DNA 的反應(yīng)階段 其它蛋白 ⑴ 、 RuvA: 識別 Holliday 結(jié)構(gòu)的連接點 ⑵ 、 RuvB: 為分枝遷移提供動力( ATPase ) RuvAB最主要的功能: 憑借其解旋酶活性,推動 Holliday中間體的分支遷移。 ? 拆分分三步進行: 功能: 在重組中誘發(fā) Holliday中間體的拆分作用。 (四)、同源重組的主要途徑 ( 1) Rec BCD 途徑:是最重要的一條途徑。 ( 3) Rec E 途徑:不用 Rec BCD ,也不用 Rec A。 概念:發(fā)生在 專一序列 而順序極少相同的DNA分子間, 不依賴于 DNA序列的同源性 ,而依賴于能與某些酶相結(jié)合的特異 DNA序列的重組。 ? 位點特異性重組與同源重組的區(qū)別: ① 同源重組 中 DNA鏈的 切斷是完全隨機的 ; 位點特異性重組 是在某些 特異的 DNA 序列 處發(fā)生重組。 (一) λ噬菌體對 的整合 λ噬菌體 DNA的整合作用: ? λ噬菌體感染大腸桿菌后,有兩種生活方式: ① 裂解生長途徑(溶菌生長): lysis pathway ② 溶源菌生長途徑: lysogenic pathway ? λ噬菌體在 溶源周期和裂解周期中,其 DNA狀態(tài) 不同,兩種狀態(tài)的相互轉(zhuǎn)變(整合與切離)是通 過位點特異性重組實現(xiàn)的。 BOB180。 Int IHF Int Xis IHF BOP180。 att L att R 原噬菌體 切除 整合 細菌 DNA 噬菌體 核心序列 “ O” 完全一致 (同源部分) 位點特異性重組發(fā)生的地方 整合后的附著位點為 attL( BOP’) attR( POB’) ? λ噬菌體的整合作用有兩個特點: ① λDNA和宿主 DNA的交換是可逆的, 原先存在的 DNA序列全部被保存下來,并 無丟失。 λ噬菌體整合的分子機制: ? 分成三個階段: ① λ整合酶與 λDNA、宿主 DNA的 att 位點 結(jié)合形成復合物; ② 鏈交換,兩條鏈形成 Holliday連接; ③ 拆分 Holliday中間體,形成重組分子。有三種功能: ?λ噬菌體的插入 ?原噬菌體的切離 ?拓撲異構(gòu)酶活性。 ? λ噬菌體的切除需要三種蛋白: ① 整合酶( integratase, Int): ② 整合宿主因子( IHF): ③ 切除酶( excisionase, Xis): Xis和 Int結(jié)合形成復合物,作用于 BOP′和 POB′位點,促進兩者之間的相互作用和重組。 Int、 IHF不能在 attL ( BOP′) 或 attR ( POB′)上形成整合體,從而決定重 組方向。 ? 整合需識別 attP和 attB,切離需識別 attL和 attR ,所以,位點特異性重組是通過重組位點 的鑒別來控制的。 解釋逆轉(zhuǎn)錄病毒與逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的區(qū)別。 試述大腸桿菌同源重組酶的特
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