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實驗4葉綠素的提取、理化性質(zhì)和含量測定-閱讀頁

2025-05-14 06:25本頁面
  

【正文】 ,能發(fā)生皂化反應(yīng)。 皂化分層 ? 葉綠素的鹽形成以后,因分子極性增大,易溶于稀酒精溶液中, 不能進(jìn)入苯層 ; ? 而類胡蘿卜素在苯中的溶解度大于在醇溶液中 ? 一部分苯分散在水中形成 乳膠體 ,出現(xiàn)一層乳白色的溶液 ? 低溫下發(fā)生皂化反應(yīng)的葉綠體色素溶液,易乳化而出現(xiàn)白色絮狀物,溶液渾濁,且不分層。 葉綠素的熒光 ? 取 3 ml葉綠素提取 原液 ,觀察其透射光、反射光下的顏色; 葉綠素含量的測定 ? 取 5 ml葉綠素提取原液移入至 50 ml容量瓶, 95%乙醇定容 (稀釋液 ) ? 以 95%乙醇作為空白對照,測 OD652 ? 葉綠素濃度 : C= OD652 / ( mg/ml ) ? 葉綠素的含量( mg/g) = [葉綠素的濃度 提取液體積 稀釋倍數(shù) ]/樣品鮮重 葉綠素的化學(xué)性質(zhì) 取代反應(yīng) 稀酸: ? 取 3 ml葉綠素原液,一滴滴加入醋酸 (先快后慢 ),觀察并記錄顏色變化; ? 向上述加醋酸后發(fā)生顏色變化的溶液中加少量 CuAc顆粒, 65℃ 水浴加熱,觀察并記錄其顏色變化。 皂化反應(yīng) – 取 3 ml葉綠素提取原液,加 1 ml 20% NaOH甲醇溶液,搖勻, 65℃ 水浴 5 min; – 取出冷卻后,先加 3 ml苯,后加 3 ml水(沿壁慢慢加入),輕輕搖勻,靜置觀察其分層現(xiàn)象??杉ち覔u勻,放在 30~ 40℃ 的水浴中加熱,溶液很快分層,絮狀物消失,溶液變得清澈透明
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