殺菌劑生物測定技術(shù)-閱讀頁
2025-01-31 01:10本頁面
【正文】 ） 中 ?每種濃度重復(fù) 3皿 ?對照則加入 ?將分離的供試線蟲經(jīng)清水漂洗后挑入小皿中 ， 皿 15~20條 /皿 ?將盛有藥液和線蟲的小皿置于襯有濕濾紙保溫的大培養(yǎng)皿中 ， 在 24~25℃ 恒溫箱中保持 24h或 48h后取出 ， 在雙目解剖鏡下檢 查線蟲的存活情況 。 觸動法 染色法 線蟲死亡的判斷標(biāo)準(zhǔn) 1 2 3 4 5 CK 死亡線蟲數(shù) 死亡率＝ ――――――――X 100 供試線蟲總數(shù) 將濃度取對數(shù)值 ， 線蟲死亡率轉(zhuǎn)換成機(jī)率值 ，用殺蟲劑毒力測定中的方法求出 LC50或 LC95，并以此來比較毒力大小 。 在 ， 瓶底放一小玻皿 （ 高 1cm， 直徑 2 cm） ， 皿中注入蒸餾水 ， 使水位高 2mm左右 ， 放入 15~20條供試線蟲 ， 同時在瓶底放一濾紙片 （ 1X 3mm） ， 用微量注射器將供試藥劑病加在濾紙上 。 24~25℃ 下熏蒸 24h， 檢查線蟲死亡率 。 盆栽試驗法克服了在離體條件下對病菌無效而在活體條件下有效的化合物的漏篩 。 此外 ， 盆栽試驗所用材料易得 ， 條件易于控制 ， 在當(dāng)前的殺菌劑研究中 ，越來越重視盆栽試驗法 ， 有些公司在進(jìn)行活性篩選時甚至只用盆栽試驗法 ， 而淘汰了離體試驗法 。 其不足之處是：和室內(nèi)生測方法相比 ， 由于有寄主植物參與 ， 測定工作比較麻煩而 且測定周期比較長 。 供試植物 供試病菌基本上是由供試植物決定的 。 供試病菌 影響殺菌劑盆栽的因素 ?植物的抗病性 ?病原菌的致病力 ?環(huán)境條件（主要是溫濕度） 植物的抗病性 供試植物應(yīng)選感病品種或者中抗品種，不能選種抗病性品種或免疫品種。 病原菌的致病力不是固定不變的性狀 。 ?病原菌的致病性與其生理 、 生化及其他生物學(xué)特性有密切關(guān)系 ， 在適應(yīng)新的環(huán)境的同時 ， 病原菌可以改變其致病性 。 即使同是人工培養(yǎng)基產(chǎn)生的孢子 ， 因培養(yǎng)基配方不同 ， 培養(yǎng)條件不同 ， 其孢子的致病能力也不同 ，這些都應(yīng)加以注意 。 必須首先了解要接種的病原菌的主要傳播方式和侵染途徑 。 如病菌主要由氣孔侵入 ， 接菌時應(yīng)注意在葉背面接菌 。 如果孢子在懸浮液中分散不勻 ， 植株發(fā)病后有些葉片可能病斑連成一片 ， 有些葉片則沒有或很少有病班 ， 給病情調(diào)查帶來困難和誤差 ， 孢子懸浮液中孢子的密度以及是否加入粘著劑對發(fā)病影響很大 。 主要的接種方法 噴霧接菌最好用特制的噴霧裝置 。 接種銹菌和白粉菌時 ， 可先在小麥植株上噴水 ，以造成在葉片上有水膜 ， 然后用滑石粉將孢子粉稀釋 ， 采用噴粉裝置接菌 。 水稻白葉枯病菌常采用針刺接菌 ， 或剪去部分稻葉 ， 造成人工傷口 ， 再噴白葉枯病菌細(xì)菌 ） 懸浮液接菌 。 接種方法 環(huán)境條件不但影響供試植物的正常生長 ，更重要的是影響接菌的成敗 。 發(fā)病的環(huán)境因子 在設(shè)備良好的研究所或公司 ， 擁有現(xiàn)代化溫室 ， 或人工氣候室 ， 光照及溫 、 濕度可隨意調(diào)節(jié)；但在基層研究單位 ， 條件較差 ， 環(huán)境因子的控制就不那么容易 。 濕度的控制比溫度更重要 ， 只有滿足病菌對濕度的要求 ， 病菌才能萌發(fā)生長 。如利用自然光，最好在下午太陽落山后接菌，這樣，經(jīng)過一個晚上，大多數(shù)病菌孢子可以萌發(fā)入侵 光照 盆栽試驗應(yīng)采用比較精密的噴霧或噴粉裝置，定量噴灑供試藥劑。 1．測定藥劑的保護(hù)效果 先噴藥，然后接種病原菌， 2．測定藥劑的治療效果 先接種病原菌，待病菌入侵后（ l－ 2天）再施藥； 施 藥 3．測定藥劑的內(nèi)吸作用 如果將藥劑噴在植株上，一般先噴藥，隨即接菌，亦可噴藥后 1天接菌。 4．測定藥劑的持效期 一次施藥后，間隔1天、 2天、 4天、 6天、 8天或更長時間分期接種病原菌， 5．測定抗雨淋作用 先噴藥，用噴霧裝置降水淋洗一定時間以模擬降一次小雨、中雨或大雨，然后接種病原菌。 1． 計數(shù)法 方法簡單易行 ． 適合于葉斑病類病害 。 但如果病斑數(shù)目太多 ， 互相重疊 ， 或病斑面積相差懸殊 ， 這種方法就不太適合 。將病害分級調(diào)查后．計算病情指數(shù)及防治效果。 ，判斷線蟲死亡的方法有觸動法 和 染色法 。 ，氣流和雨水傳播的病害，可以采用 噴灑法 、 噴粉法 及 涂抹法等接種方法。土傳病害可以采用 土壤接種法 ，也可以采用 浸根接種法
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