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化學發(fā)光分析法現(xiàn)代表征方法與技術-朱昌青-閱讀頁

2025-01-28 10:36本頁面
  

【正文】 (AMP)熒光素和熒光素酸的復合物和鎂的焦磷酸鹽 (ppi): ATP + LH2 + E + Mg2+ ???? AMP E +Mg ppi + 2H+ pH7 8 復合物與氧反應,產(chǎn)生化學發(fā)光: AMP E + O2 ??? [氧化 熒光素 ]* + AMP+CO2 + H2O [氧化 熒光素 ]* ??? 氧化 熒光素 + h? 最大發(fā)射波長 562nm; Instrumental Analysis 15 生物發(fā)光分析應用 2 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NADH)在細菌中的黃素酶作用下,在氧化型黃素單核苷酸 (FMA)存在下,發(fā)生發(fā)光反應 : NADH + FMA + H+ ?????? NAD+ + FMNH2 NADH脫氫酶 FMNH2 + RCHO + O2 ???? FMN + RCOOH + H2O + h? 黃素酶 最大發(fā)射波長 495 nm; Instrumental Analysis 16 二、 特點 characteristics 1. 靈敏度極高 例:熒光素酶和磷酸三腺甙 (ATP)的化學發(fā)光分析 , 可測定 2?1017。 Instrumental Analysis 17 Instrumental Analysis 18 Instrumental Analysis 19 三、 裝置與技術 instrument and technology 裝置流程: 發(fā)光反應室 光檢測器 信號放大器 顯示與記錄 發(fā)光反應可采用靜態(tài)或流動注射的方式進行: 靜態(tài)方式 : 用注射器分別將試劑加入到反應器中混合 , 測最大光強度或總發(fā)光量;試樣量小 , 重復性差; 流動注射方式 : 用蠕動泵分別將試劑連續(xù)送入混合器 ,定時通過測量室 , 連續(xù)發(fā)光 , 測定光強度;試樣量大;
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