【正文】 B A D C 3 C D A B 4 D C B A 1 2 3 4 1 C B A D 2 D A B C 3 A D C B 4 B C D A Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 1 C B A D 2 A D C B 3 D A B C 4 B C D A 1， 3兩列對(duì)調(diào) 2， 3兩行對(duì)調(diào) ： 基本方隨機(jī)化 基本方 成份（峰） 劑量 瘤株 瘤株（處理） A（肉瘤 180） B（肝肉瘤） C艾氏腹水瘤） D（網(wǎng)狀細(xì)胞瘤） 成份（峰） Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 劑量（ mg/kg） 1（ 0） 2（ ） 3（ ） 4（ ） 正交設(shè)計(jì)： 是研究多因素試驗(yàn)的一種設(shè)計(jì)方法。設(shè)計(jì)過(guò)程中只要根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件直接套用正交表即可，而不需要另行編制。 以 L9（ 34 ） 為例說(shuō)明其意義及使用方法： L代表正交表，右下角 9字表示這張表需安排 9次實(shí)驗(yàn)?？偟膩?lái)說(shuō)用這張表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，最多可以安排 4個(gè)因素，每個(gè)因素取 3個(gè)水平，一共進(jìn)行 9次實(shí)驗(yàn)。 標(biāo)準(zhǔn)差：表示一組變量值離散程度（ dispersion）的指標(biāo)，均數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)差結(jié)合能更全面地說(shuō)明一組變量的分布情況。 構(gòu)成比：又稱(chēng)構(gòu)成指標(biāo)，表示事務(wù)或現(xiàn)象內(nèi)部各構(gòu)部分的比重。 （二）假設(shè)檢驗(yàn)：顯著性檢驗(yàn)方法 計(jì)量資料 的分析方法： ? t檢驗(yàn)： 生物學(xué)研究中，由于實(shí)驗(yàn)條件和研究對(duì)象的限制，有許多研究的樣本容量很難達(dá)到 30，因此常采用小樣本平均數(shù)的 t檢驗(yàn)。 ? F檢驗(yàn)： 而對(duì)于單因素樣本（水平數(shù) k≧3 ）或兩個(gè)及兩個(gè)以上因素的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)則必須采用 F檢驗(yàn)。 根據(jù)研究目的不同可分為適合性檢驗(yàn)和獨(dú)立性檢驗(yàn)。 ? 獨(dú)立性檢驗(yàn)：是研究?jī)深?lèi)試驗(yàn)因子之間是相互獨(dú)立還是相互影響的，也就是對(duì)次數(shù)資料的相關(guān)性進(jìn)行研究。 統(tǒng)計(jì)軟件的應(yīng)用：如 SPSS。不同實(shí)驗(yàn)的研究目的和要求不同，不同種類(lèi)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物也有其各自的生物學(xué)特點(diǎn)和解剖生理特征。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的目的是利用動(dòng)物與人類(lèi)近似的特性通過(guò)動(dòng)物的反應(yīng)來(lái)推斷人類(lèi)的病理和生理進(jìn)程特點(diǎn)，尋找預(yù)防及治療方法，因此，動(dòng)物的物種進(jìn)化程度在選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)是優(yōu)先考慮的問(wèn)題。 ? 組織結(jié)構(gòu)： 哺乳動(dòng)物之間有許多組織結(jié)構(gòu)上的相似點(diǎn)，因而其生命功能基本過(guò)程也很相似。 ? 系統(tǒng)機(jī)能： 許多動(dòng)物各系統(tǒng)的功能與人類(lèi)是相似的。蛙和蟾蜍：大腦不發(fā)達(dá)，不能用于高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)研究，但做簡(jiǎn)單的反射弧實(shí)驗(yàn)很合適，且結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單明了，易于分析。 ? 體液成分： 動(dòng)物的血液性狀、糞便、汗和尿液的理化性質(zhì)、成分構(gòu)成也大都具有各自的特點(diǎn)。 ? 繁殖特性： 如 家兔 的卵巢幾乎連續(xù)不斷地產(chǎn)生卵子，但成熟的卵泡只有經(jīng)過(guò)雄兔交配后才能排卵，因此可選用成年雌兔來(lái)誘發(fā)排卵，是觀察藥物對(duì)排卵的影響，進(jìn)行 避孕藥 研究的常用動(dòng)物。 ? 疾病特點(diǎn)： 一些帶有自發(fā)性疾病的動(dòng)物，可以局部或全部地反映人類(lèi)類(lèi)似疾病過(guò)程表現(xiàn)，經(jīng)過(guò)遺傳育種的方法，可把這種動(dòng)物培育成疾病的模型動(dòng)物，以供研究。 突變系SHR大鼠其自發(fā)性高血壓的變化與人類(lèi)相似，并伴有高血壓性心血管病變。黑熱病地區(qū)的家犬也感染利朵曼氏原蟲(chóng)發(fā)病，犬當(dāng)然就成為研究黑熱病的最好實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。有時(shí)這種選擇是保證實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。 Example： ? 大鼠無(wú)膽囊 ，不會(huì)嘔吐，不能做膽功能觀察或催吐實(shí)驗(yàn)。 ? 家兔對(duì)體溫變化十分敏感 ，宜選做發(fā)熱、解熱和檢查熱原的實(shí)驗(yàn)研究，大鼠、小鼠體溫調(diào)節(jié)不穩(wěn)定，不宜選用。 ? 大鼠垂體 —— 腎上腺系統(tǒng)功能發(fā)達(dá) ，應(yīng)激反應(yīng)靈敏，適于作應(yīng)激反應(yīng)和垂體，腎上腺、卵巢等內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)研究。大鼠對(duì)炎癥反應(yīng)靈敏，特別是踝關(guān)節(jié)對(duì)炎癥反應(yīng)更敏感，適于多發(fā)性關(guān)節(jié)炎和化膿性淋巴腺炎的研究，也適于中耳疾病和內(nèi)耳炎的研究。苯胺及其衍生物對(duì)家犬、貓和豚鼠能引起與人相似的病理變化，產(chǎn)生變性血紅蛋白，但對(duì)家兔則不易產(chǎn)生變性血紅蛋白，在鼠則完全不產(chǎn)生。 ? 不同品系動(dòng)物，對(duì)同一刺激的反應(yīng)差異很大 ，在選擇時(shí)也必須注意。 DBA小鼠對(duì)音響刺激非常敏感，可發(fā)生聽(tīng)源性痙攣，而C57BL小鼠卻根本不會(huì)出現(xiàn)這種反應(yīng)。 標(biāo)準(zhǔn)化原則： 是指選擇和使用與研究?jī)?nèi)容相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 （ 1）遺傳學(xué)控制要求 選擇何種遺傳群體動(dòng)物，應(yīng)根據(jù)不同課題內(nèi)容而定。 ? 以群體為研究對(duì)象的研究課題，如人類(lèi)遺傳學(xué)研究，藥物篩選和毒性實(shí)驗(yàn)中要選擇與人群基因型及表現(xiàn)型相似的動(dòng)物類(lèi)別，封閉群則更為合適。 （ 2）微生物控制 要求： ? 普通級(jí)動(dòng)物具有價(jià)廉、易獲得、飼養(yǎng)設(shè)施簡(jiǎn)便、容易管理等特點(diǎn)，但用于研究所獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的反應(yīng)性差，微生物控制難度也大，一般用于示教和預(yù)實(shí)驗(yàn)。 ? SPF 動(dòng)物是正常的健康無(wú)病模型，可排除疾病或病原的干擾，適用于所有科研實(shí)驗(yàn)、生物制品和藥品生產(chǎn)及檢定，是國(guó)際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。 ? 無(wú)菌和悉生動(dòng)物是一種超常生態(tài)模型，非常規(guī)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，僅適用于特殊實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹? 普通動(dòng)物、 SPF動(dòng)物與無(wú)菌動(dòng)物特點(diǎn)比較 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 普通動(dòng)物 SPF動(dòng)物 無(wú)菌動(dòng)物 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 傳染病 有或可能有 無(wú) 無(wú) 寄生蟲(chóng) 有或可能有 無(wú) 無(wú) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 有疑問(wèn) 明確 明確 應(yīng)用動(dòng)物數(shù) 多 (或大量 ) 少數(shù) 少數(shù) 統(tǒng)計(jì)價(jià)值 不準(zhǔn)確 可能好 好 長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn) 困難 可能好 可能好 自然死亡率 高 低 很低 長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)存活率 約 40% 約 60% 約 100% 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確設(shè)計(jì) 不可能 可能 可能 實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論價(jià)值 低 高 很高 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 各種實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品質(zhì)相匹配 ： ? 選用與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、技術(shù)條件、實(shí)驗(yàn)方法等條件相匹配的標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物。這種匹配的協(xié)調(diào)性反映在生物反應(yīng)性、實(shí)驗(yàn)技術(shù)構(gòu)成、動(dòng)物品系、體型、年齡、性別、行為特質(zhì)等。由于不同動(dòng)物對(duì)外界刺激的反應(yīng)存在著個(gè)體差異，選擇時(shí)， 除了注意動(dòng)物的種類(lèi)及品系外，還應(yīng)考慮動(dòng)物的年齡、體重、性別、生理及健康狀況等，符合規(guī)格， 這也是保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性和可重復(fù)性的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。如果對(duì)犬和小鼠均觀察一年，所反應(yīng)的發(fā)育過(guò)程是不同的，即使同樣是犬，不同的年齡階段所得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)也不盡相同。 部分實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡對(duì)照表 2）體重 動(dòng)物的體重與年齡有一定的關(guān)系，也可按體重推算年齡，例如昆明小鼠 6 周齡時(shí)雄性約 32g，雌性約 28g； Wistar大鼠 6周齡時(shí)雄性為180g,雌性約 160g，豚鼠 2 月齡體重約 400g,日本大耳白兔 8月齡時(shí)體重約 4500g。 ? 同一實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物體重盡可能一致，若相差懸殊，則易增加動(dòng)物反應(yīng)的個(gè)體差異，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性。一般來(lái)說(shuō)，實(shí)驗(yàn)若對(duì)動(dòng)物性別無(wú)特殊要求，則宜選用 雌雄各半 。 ? 有時(shí)雌性動(dòng)物的敏感型較雄性高，如用戊巴比妥鈉麻醉大鼠，雌性動(dòng)物的敏感性是雄性動(dòng)物的 ～ 。 4）生理及健康狀況 ? 動(dòng)物如果懷孕、哺乳等對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響很大，因此實(shí)驗(yàn)不宜采用處于特殊生理狀態(tài)下的動(dòng)物進(jìn)行。 ? 動(dòng)物換毛季節(jié)。 ? 動(dòng)物的健康狀況對(duì)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果正確與否有直接的影響。主要檢查項(xiàng)目如下：眼、耳、鼻、皮膚、頭部姿勢(shì)、胃腸道、神經(jīng)系統(tǒng)等。 選用結(jié)構(gòu)功能簡(jiǎn)單又能反映研究指標(biāo)的動(dòng)物。 例、果蠅的遺傳學(xué)研究 有些實(shí)驗(yàn)在動(dòng)物的使用上沒(méi)有嚴(yán)格的選擇性，但在實(shí)際工作中要注意以下幾個(gè)問(wèn)題： 選擇科研、檢驗(yàn)和生產(chǎn)上傳統(tǒng)使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，這是長(zhǎng)期以來(lái)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的積累，同時(shí)也便于同類(lèi)工作的分析與比較。 在缺乏專(zhuān)門(mén)技術(shù)的條件下，選擇溫順、易保持安定的動(dòng)物。 以 兔 為例，講述其生物學(xué)特性和作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的相互關(guān)系： 主要特點(diǎn) 應(yīng)用與回避 易獲得、易飼養(yǎng)、較馴服、抗病力強(qiáng)，繁殖率高，耳靜脈便于注射給藥及采血 科研工作中廣泛應(yīng)用如急性實(shí)驗(yàn)、內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)、物質(zhì)代謝研究、遺傳學(xué)研究、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)、離體兔耳、兔心的各種分析性研究 對(duì)許多病毒和致病菌敏感 傳染病及抗傳染病藥物研究 體溫調(diào)節(jié)穩(wěn)定、反應(yīng)靈敏 解熱藥研究、注射液的熱源檢查、研究環(huán)境因素引起體溫過(guò)高或過(guò)低的反應(yīng) 典型的刺激性排卵動(dòng)物，經(jīng)交配刺激才能排卵 避孕藥研究中觀察藥物對(duì)排卵的影響 胸腔被縱隔分為互不相通的左右兩半，心臟又有心包胸膜隔開(kāi)，當(dāng)開(kāi)胸和打開(kāi)心包胸膜暴露心臟時(shí)，只要不弄破縱隔膜，動(dòng)物不需做人工呼吸 開(kāi)胸及心臟實(shí)驗(yàn) 頸部的交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)和主動(dòng)脈減壓神經(jīng)獨(dú)立行走 觀察減壓神經(jīng)對(duì)心臟等的影響 皮膚對(duì)刺激物的反應(yīng)接近于人 觀察毒物對(duì)皮膚的局部作用 易感日本血吸蟲(chóng) 復(fù)制日本血吸蟲(chóng)病模型 洋地黃、烏頭堿可誘發(fā)心律失常 復(fù)制快速性心律失常模型 注射四氧嘧啶可形成持久性高血糖 復(fù)制糖尿病模型 痢疾桿菌可引起家兔眼結(jié)膜炎 建立模型用于藥物用于抗痢疾桿菌感染藥物的研究 青紫藍(lán)兔后肢腘窩部有一粗大的淋巴結(jié)，體外易觸摸和固定，適于向淋巴結(jié)內(nèi)注射藥物或通電 免疫功能研究 心臟在離體條件下仍可搏動(dòng)很久 觀察藥物對(duì)哺乳類(lèi)動(dòng)物心臟的直接作用 甲狀旁腺分布較散，除甲狀腺周?chē)?，有的甚至分布到主?dòng)脈弓附近，摘除甲狀腺不影響甲狀旁腺功能 甲狀腺摘除實(shí)驗(yàn) 食用高膽固醇、高脂肪飼料后易形成動(dòng)脈粥樣硬化病變 是復(fù)制動(dòng)脈粥樣硬化與高血脂癥模型的首選動(dòng)物 苯作用后的血象改變與人相似，白細(xì)胞減少及造血器官發(fā)育不全 苯中毒研究 缺乏咳嗽反射 不適于觀察致咳嗽作用的研究 嘔吐反應(yīng)不敏感 不適于作嘔吐實(shí)驗(yàn)研究 對(duì)射線十分敏感，照射后常發(fā)生休克樣反應(yīng)，部分動(dòng)物照射后不久即死亡 不適于作放射病研究 第五部分、 3Rs 概念：是 Replacement、 Reduction、 Refinement, 3Rs的簡(jiǎn)稱(chēng)縮寫(xiě) :用其他方法替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)；減少動(dòng)物使用的數(shù)量；優(yōu)化實(shí)驗(yàn)過(guò)程減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的痛苦。 一、替代：是指不使用活的脊椎動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，利用其他科學(xué)研究的條件，采用一些替代方法，達(dá)到研究目的。 絕對(duì)替代：完全不使用動(dòng)物，用數(shù)理方法模擬動(dòng)物進(jìn)行研究，如計(jì)算機(jī)模型。 減少的途徑： 盡量使動(dòng)物一體多用。 盡量使用高質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。有時(shí)利用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件可以將少量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果演繹成很多可供參考的結(jié)果。控制動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的生物學(xué)變異來(lái)源是減少動(dòng)物使用量的重要方法，比如可以通過(guò)區(qū)組設(shè)計(jì)或是因子設(shè)計(jì)方法控制組內(nèi)變異或組間變異的大小。 飼養(yǎng)和環(huán)境條件 實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)：動(dòng)物的正確抓取固定和實(shí)驗(yàn)操