醫(yī)學(xué)]生化2第二章核酸的結(jié)構(gòu)與功能09醫(yī)本-閱讀頁
2025-01-19 02:58本頁面
【正文】 pp AAA…An 帽子結(jié)構(gòu) 多聚 A尾 mRNA結(jié)構(gòu)示意圖： 一、 mRNA是蛋白質(zhì)合成中的模板 39 mRNA結(jié)構(gòu)特點： ?5180。末端 多聚 A尾 polyA ?編碼區(qū) hnRNA剪掉內(nèi)含子， 外顯子拼接。 DNA（遺傳信息） 轉(zhuǎn)錄 mRNA（密碼載體） 翻譯 蛋白質(zhì) (氨基酸序列 ) 41 1. tRNA的二級結(jié)構(gòu) — 三葉草形 2. tRNA的三級結(jié)構(gòu) — 倒 L形 P CU AUGUAAAGDmGGDD DA AG GCCCGGCAAG CACUGUAAAΨφAGADCmGCT CCACUCGGCCGCGCGCGGACCAmGUUCGDO HD HU 環(huán)T Ψ C 環(huán)反密碼環(huán) :含 稀有堿基多含 反 密碼子 、與 m R N A的密碼子結(jié)合— CCA 3 39。 mRNA 3180。 3 2 1 3180。 氨基酰 tRNA 43 ： 參與組成核蛋白體 ， 為 蛋白質(zhì)生物合成的場所 。（ 注：為記憶方便， ‘5S ’ 是原核和真核都有的，帶 ‘8’的是真核具有的，原核的不帶。 呈花狀 539。 — polyA 編碼序列 單鏈 局部雙鏈 結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)合成的模板 搬運活化的 aa 到核糖體 組成核蛋白體 分子大小不一 , 量 10%,代謝快 分子量小 ?120堿基 穩(wěn)定 分子大 ?120堿基 量 80%,穩(wěn)定 三種 RNA內(nèi)容小結(jié) 功能 45 細胞的不同部位存在的其他種類的小分子RNA， 統(tǒng)稱為 非 mRNA小 RNA/snmRNAs. ?snmRNAs 核內(nèi)小 RNA、核仁小 RNA 胞質(zhì)小 RNA、催化性小 RNA 小片段干擾 RNA microRNA ?snmRNAs的 種類 : 四、 snmRNA參與了基因表達的調(diào)控 是一大 家族 小分子 非編碼單鏈 RNA ， 長度 約 20 ~ 25 個堿基，由一段具有發(fā) 夾 環(huán)結(jié)構(gòu)，長 度為 70~90 個堿基的單鏈 RNA 前 體 經(jīng) Dic e r酶剪切 后 形成。 某些小 RNA分子具有催化特定 RNA降解的活性 ，這種具有催化作用的小 RNA 亦被稱為 核酶(ribozyme)或催化性 RNA(catalytic RNA)。 ?同一生物體內(nèi)不同種類的細胞 、 同一細胞在不同時間 、 不同狀態(tài)下 snmRNAs的表達具有時間和空間特異性 。240－ 290nm 范圍，最大吸收峰在 260nm481216消光系數(shù)8 10－ 3AGTCU220 240 260 280 300 320nm波長各種堿基的紫外吸收光譜1. DNA 或 RNA 的定量： OD 260=50μg/ml雙鏈 DNA40μg/ml單鏈 DNA （或 RNA ）20μg/ml寡核苷酸：DNA 純品→ OD 260/OD280 = 1 .8RNA 純品→ OD 260/OD280 = 2 .0OD 260的應(yīng)用?DNA變性的圖示： 理化因素， DNA雙鏈間 氫鍵斷裂 ，成兩條單鏈。加熱變性氫鍵斷裂緩慢冷卻復(fù)性天然雙鏈 DNA 變性 DNADN A的變性和復(fù)性一、核酸分子具有強烈的紫外吸收 二、 DNA變性是雙鏈解離為單鏈的過程 50 ?DNA熱變性： ?特點 — 驟然、突發(fā)式 ?融解溫度 Tm(melting temperature) ?Tm與 G+C含量成正比 DNA 解鏈曲線76 8 0 8 4 8 8 9 2 9 6 1 0 0 ℃0 .7 00 .6 50 .6 00 .5 50 .5 0A 260Tm?增（高）色效應(yīng)： DNA變性時其溶液 OD260增高的現(xiàn)象 51 (renaturation) /退火 (annealing) ?定義 — ?復(fù)性的條件 — ?DNA 復(fù)性： 在適當(dāng)條件下，變性 D NA 的兩條互補鏈可恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象，這一現(xiàn)象稱為復(fù)性。?復(fù)性的條件? 只有溫度 緩慢下降 才可以復(fù)性? 一般認為，比 Tm 低 25 ℃ 是復(fù)性的最佳條件。 不同來源的核酸同一體系中變性、復(fù)性處理核酸單鏈間有一定程度堿基互補則能形成 雜化雙鏈? 研究 DNA 分子中某一種基因的 位置? 鑒 定兩種核酸分子間的 序列相似性? 檢測某些 專一序列 在待檢樣品中是否存在? 是 基因芯片 技術(shù)的基礎(chǔ)核酸分子雜交的應(yīng)用：核酸分子雜交：?定義 — ?應(yīng)用 — 雙鏈 DNA1 雙鏈 DNA2+加熱變性DNA 變性、復(fù)性及分子雜交緩慢降溫復(fù)性形成單鏈雜化雙鏈雙鏈 DNA1雙鏈 DNA2+注：也可發(fā)生在 DNA 與 RNA 或 R NA 與 RNA 之間53 第 五 節(jié) 核 酸 酶 （ Nuclease） — 指所有可以水解核酸的酶 54 ?依據(jù)底物不同分類： ?功能： DNA酶 (deoxyribonuclease, DNase) RNA酶 (ribonuclease, RNase) ?依據(jù)切割部位不同分類： 核酸 內(nèi) 切酶 核酸 外 切酶 ? 參與 DNA 合成與修復(fù)及 R NA 合成后的 剪接等基因復(fù)制和基因表達過程。? 在消化液中降解 食 物中的核酸以利 吸收? 體外重組 DNA 技術(shù) 中重要的工具酶生物體內(nèi)的核酸酶催化細胞內(nèi)外 核酸降解核酸酶的功能 —55 核 酶 催化性 DNA (DNAzyme) 人工合成的寡聚脫氧核苷酸片段，也能序列特異性降解 RNA。 56 第一章 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能 13．下述有關(guān)蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的敘述，不正確的是（ ） A．多肽鏈中氨基酸的排列順序 B．氨基酸分子間通過去水縮合形成肽鏈 C．蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)并不包括各原子的空間位置 D．從 N一端至 C一端氨基酸殘基排列順序 E．蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵除肽鍵外，還有二硫
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