動(dòng)物細(xì)胞工程918751228-在線瀏覽
2025-04-09 16:19本頁(yè)面
【正文】 養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 培養(yǎng)基特有成分 蔗糖 植物激素 葡萄糖 促 動(dòng)物血清 培養(yǎng)結(jié)果 植物體 細(xì)胞株、細(xì)胞系 培養(yǎng)目的 快速繁殖、培育無(wú)病毒植株 獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白 取材 植物幼嫩部分或花藥 胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織 其他條件 無(wú)菌無(wú)毒，適宜條件 無(wú)菌無(wú)毒，適宜條件 去 核 注 核 重組細(xì)胞 二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 概念： 動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的 一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核 ,移入一個(gè)已經(jīng) 去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中 .使其重組并發(fā)育成一個(gè) 新的胚胎 ,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為 動(dòng)物個(gè)體 . 原理： 動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性 ? 比較以下細(xì)胞的全能性： ? ? 受精卵、二分裂球的子細(xì)胞 ? 囊胚細(xì)胞、多能造血干細(xì)胞 ? 單能造血干細(xì)胞、 ? 水螅的消化細(xì)胞、人的消化細(xì)胞 細(xì)胞具有全能性 多能細(xì)胞 單能細(xì)胞 高度分化的體細(xì)胞 分類： 胚胎核移植、體細(xì)胞核移植。 動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難 體細(xì)胞核移植過(guò)程 示動(dòng)物克隆 無(wú)性繁殖 1.）克隆羊多利培育過(guò)程： 黑面綿羊去核卵母細(xì)胞 白面綿羊乳腺細(xì)胞核 細(xì)胞核移植 重組細(xì)胞 電脈沖刺激 早期重組胚胎 胚胎移植 另一頭綿羊的子宮 妊娠、出生 克隆羊多利 ◆ 特別注意： 克隆動(dòng)物性狀與供體動(dòng)物完全一樣嗎？ 不可能！ 因?yàn)椋? 一、供體動(dòng)物只提供細(xì)胞核，而細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)（如線粒體 DNA）來(lái)自于受體卵母細(xì)胞 . 二、生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境的影響。含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。 若黑面綿羊的基因型為 AA,白面綿羊的基因型為 aa，則克隆羊的基因型為 核移植 胚胎移植 白色 多利全部的核基因都來(lái)自白面綿羊 aa ◆ 取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng) 10代以內(nèi)的細(xì)胞 .為什么？ ◆ 用的是去核的減數(shù)第二次分裂中期細(xì)胞（ MⅡ 中期 ）為什么？ ◆ 激活方法： ◆ 激活目的： ◆ 促融方法：電刺激 ◆ 胚胎移植至代孕受體內(nèi) 妊娠、分娩 2.）核移植流程 供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛 受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)） ，易操作。 有人說(shuō)它三個(gè)母親，對(duì)嗎？ 核移植流程 : 供體細(xì)胞的采集與培養(yǎng) 用物理或化學(xué)方法激活受體細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂進(jìn)程。 將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞 顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核 受體卵母細(xì)胞的采集與體外培養(yǎng) 胚胎移植入代孕母牛體內(nèi) 妊娠分娩與供體遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)相同的犢牛。 ? 動(dòng)物的基因組中，一類基因是維持生存的，在各種細(xì)胞中都處于活動(dòng)的狀態(tài)。 ? 分化的細(xì)胞內(nèi)基因的活動(dòng)很不完全，因此很難像受精卵那樣發(fā)揮細(xì)胞全能性。 動(dòng)物難以克隆的原因 看書(shū) P4950頁(yè) 定義： 指用自然或人工方法，使兩個(gè)或多個(gè)不同的細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 三、動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞融合 誘導(dǎo)融合的因素： ? 生物法：滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)融合。 ? 這是由于病毒的磷脂外衣與動(dòng)物細(xì)胞的膜十分相似的緣故。 ? 化學(xué)法：聚乙二醇誘導(dǎo)融合 ? 因?yàn)榫垡叶家椎?、?jiǎn)便，且融合效果穩(wěn)定，是目前應(yīng)用最廣泛的方法。 例如：人 鼠雜交細(xì)胞通常丟失人的染色體，可以進(jìn)行人類基因的定位（如由于 1號(hào)染色體丟失導(dǎo)致尿苷單磷酸激酶活性喪失，可知該基因位于 1號(hào)染色體上） ? 免疫學(xué)上：利用雜交瘤技術(shù)，制備單克隆抗體。 抗原與抗體的關(guān)系？ 一個(gè)抗原可以與多個(gè)抗體特異結(jié)合 4 脾臟 4種效應(yīng) B細(xì)胞 B1 B2 B3 B4 抗原 B1 B2 B3 B4 Ab1 Ab2 Ab3 Ab4 4種特異性抗體 問(wèn)題情境 1： 長(zhǎng)期以來(lái)，人們?yōu)榱双@
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