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廣西地方標準甘蔗健康種苗生產技術規(guī)程征求意見稿-在線瀏覽

2024-09-30 18:46本頁面
  

【正文】 。1 ℃,溫控范圍37100℃;  冰箱:最低溫度20℃;  觀片燈;  制冰機;  水平搖床;  磁力加熱攪拌器;  高壓滅菌鍋:120℃177?!?耗材燒杯(500 mL),三角瓶或培養(yǎng)瓶,離心管( mL),離心管架,槍頭(10 181。L、1000181。5  操作程序  種莖熱處理供體蔗砍斬成單芽或雙芽段,自來水洗凈蔗莖表面后,用5 毫克/毫升 50 %多菌靈可濕性粉劑( 毫克/毫升多菌靈有效成分)溶液浸泡1015 分鐘;再將蔗莖置入5255 ℃熱水中浸泡3060 分鐘;用滅菌的基質(泥炭土或椰絲等)填埋種莖,置入人工智能光照培養(yǎng)箱中,保持在相對濕度95 %RH,溫度3840 ℃的自然散射光下培養(yǎng),保持基質的潤濕;待培養(yǎng)710 天,腋芽生長到可見12 片葉時,加強光照,停止?jié)菜惶??!?莖尖誘導培養(yǎng)剝除腋芽外圍葉鞘,留下約67 厘米長的心葉小段;心葉小段經70 %的乙醇溶液3045 秒浸泡消毒,再用 % 升汞溶液浸泡2530 分鐘表面消毒,無菌水沖洗34次,每次35分鐘;小心剝離幼嫩心葉和葉鞘,切下莖尖分生組織在無菌水中浸泡20分鐘后接種于1/2 MS + 1 毫克/升6BA 培養(yǎng)基,為避免交叉污染,每瓶最好只接種1個莖尖。1 ℃下培養(yǎng)3040天?!?增殖培養(yǎng)取莖尖誘導培養(yǎng)獲得的小苗,切除底部變褐的組織,剝除外圍老葉,如有側芽長出則切開,所有苗/芽接種于MS + 1 毫克/升6BA 培養(yǎng)基,每瓶接種35個苗/芽。增殖培養(yǎng)條件為光照度 2,0002,500 Lux,光照時間 16 小時/天,相對濕度 6575 %RH,室溫 28177。繼代培養(yǎng)24周更換培養(yǎng)基或培養(yǎng)液,且去除老葉及褐化的組織,接種每叢芽數(shù)為34個,每瓶接種23 叢。  生根誘導選取長有 34 片綠葉(莖高約23 厘米)的健壯瓶苗,12 株分為一叢,接種于1/2 MS + 1 毫克/升NAA 培養(yǎng)基,每瓶接種35叢苗。生根誘導培養(yǎng)條件為光照度2,0002,500 Lux,光照時間 16 小時/天,相對濕度
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