重亞硫酸鹽測序技術(shù)介紹-在線瀏覽
2024-09-26 00:12本頁面
【正文】 DNA都有少量的甲基化胞嘧啶，主要集中在基因 5＇端的非編碼區(qū)，并成簇存在。 DNA的甲基化可引起基因的失活。 GC含量大于 50%,長度超過 200bp。這些區(qū)域包含濃度相對較高的CpG對，與此段區(qū)域?qū)?yīng)的染色體區(qū)段一起被稱作 CpG島。 CpG島的甲基化 ? CpG島經(jīng)常出現(xiàn)在真核生物的housekeeping基因的調(diào)控區(qū)，在其它地方出現(xiàn)時會由于 CpG中的 C易被甲基化而形成 539。故 CpG在基因組中是以島的形式分布的。最后，對 PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序，并且與未經(jīng)處理的序列比較，判斷是否 CpG位點(diǎn)發(fā)生甲基化。在尋找有意義的關(guān)鍵性 CpG位點(diǎn)上，有其他方法無法比擬的優(yōu)點(diǎn)。 ? 缺點(diǎn)：它的不足是耗費(fèi)時間和耗資過多，至少要測序 10個以上的克隆才能獲得可靠數(shù)據(jù)，需要大量的克隆及質(zhì)粒提取測序，過程較為繁瑣、昂貴。 酶切法同亞硫酸氫鹽聯(lián)合法 ? 酶切法：限制性酶切后選用對特 異 DNA片段
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