dna的復(fù)制-在線瀏覽
2024-09-15 00:16本頁(yè)面
【正文】 g e c a o b d f h 復(fù)制起點(diǎn)大多數(shù) rDNA 位于復(fù)制起點(diǎn)兩側(cè) ? 子鏈 DNA延伸方向 聚合酶只在 新鏈的 端反應(yīng)； OH T C A T C A C OH 3‘ 新鏈的延伸方向?yàn)?。 總結(jié)： 第一次證明了 RNA 引物的存在 Dnase降解前 DNase 降解后 DNA/RNA 引物 岡崎片段引物 GTP用 [32p]標(biāo)記， 用 Dnase酶降解 DNA，只留下標(biāo)記的引物。 10bp RNA引物合成后， DNApolII 進(jìn)行 DNA鏈的延伸 ? DNApol I 對(duì) RNA引物切除并聚合填補(bǔ) ? DNA連接酶將 岡崎 片段、 片段連接 完成對(duì)先導(dǎo)鏈引物的合成 實(shí)現(xiàn) DNA復(fù)制的轉(zhuǎn)錄激活起始 較先導(dǎo)鏈的啟動(dòng)落后一個(gè)岡崎片斷 總結(jié)： . DNA復(fù)制的酶及蛋白質(zhì)DNA復(fù)制時(shí)蛋白質(zhì)的協(xié)同作用 Top I, Top II 解旋酶 單鏈結(jié)合蛋白 (SSB) 螺旋去穩(wěn)定蛋白 (HDP) DnaB 蛋白 DnaC 蛋白 引發(fā)酶（ dnaG） Ungase DNA 聚合酶 III DNA 聚合酶 I DNA連接酶 引發(fā)體 復(fù) 制 體 進(jìn) 化 中 形 成 了 靈 活 的 多 酶 復(fù) 合 體 1. 解旋酶 C / 基因組 = 106 bp 3040s / 每次復(fù)制 10 bp / 每圈螺旋 84000 105bp / min 解旋 ( 840010000 rpm ! 高速離心機(jī) ) 能量？ 復(fù)制叉兩側(cè) DNA雙螺旋解旋的相關(guān)酶 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I DNA的 單鏈 瞬間斷裂 緩解 高速旋轉(zhuǎn)， 引入正向超螺旋，解出應(yīng)力 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 II DNA的 雙鏈 瞬間斷裂 緩解 高速解旋時(shí)， DNA雙鏈的相互纏繞 引入 負(fù)超， 消除復(fù)制叉移動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的 正超 DNA 解旋酶 ATpase活性，解除 1氫鍵 ／水解 2ATP 解旋酶 單鏈結(jié)合蛋白 引發(fā)體 引發(fā)酶 DNA聚合酶 III RNA引物 DNA聚合酶 I （引發(fā)酶和解旋酶） （ 2）參與 DNA復(fù)制起始的酶 RNA聚合酶 合成 DNA前導(dǎo)鏈的 RNA引物 引發(fā)酶 合成 DNA后隨鏈的 RNA引物 （ dna G） (岡崎片段 ) 單鏈結(jié)合蛋白 結(jié)合單鏈 DNA （ SSB ） 阻止 DNA復(fù)性 單鏈結(jié)合蛋白（ SSB） 功能： （ 1） 防止單鏈重新配對(duì) 形成雙鏈 DNA； （ 2） 防止被核酸酶降解 ； （ 3） 為 DNA復(fù)制、重組和修復(fù)提供條件 。 DNA 聚合酶 I 103kd DNA 聚合酶 II 90120kd （ 3）參與 DNA復(fù)制延伸的酶 DNA 聚合酶 III 130kd 包 含多個(gè)亞基 原核生物 DNA 連接酶 75kd （連接 DNA鏈 3‘OH末端 和另一 DNA鏈的 5‘P末端 ，生成 磷酸二酯鍵 ， 消耗 ATP） DNA聚合酶 I、 II、 III比較（原核生物） ? PolA PolB PolC I II III ? 5‘→3‘ 聚合酶活性 有 有 (dNMP)n + dNTP →(dNMP) n+1 + ppi （ 聚體 ）與解旋酶結(jié)合啟動(dòng) 復(fù)制 。 真核生物 復(fù)制的起始復(fù)制起始抗原 （具有解旋酶活性）與 結(jié)合后，促進(jìn) 解鏈。酵母 復(fù)制起始復(fù)制起點(diǎn)識(shí)別復(fù)合物 具有 ATPase活性，該復(fù)合物識(shí)別并結(jié)合 自主復(fù)制序列 ，與 細(xì)胞分裂周期蛋白 6結(jié)合，激活其ATPase活性，促進(jìn)DNA復(fù)制進(jìn)行。 推測(cè)染色體末端具有特殊端粒結(jié)構(gòu)。 Blackburn 加尾實(shí)驗(yàn) 轉(zhuǎn)化酵母 傳代 酵母 TEL Pvu 酶切 連接 Pvu 酵母 DNA Pvu 酵母 TEL 酵母 TEL？！
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