【正文】 熒光檢測系統(tǒng)，分別為基于光柵和基于濾光片的檢測系統(tǒng)。下邊圖表是對兩種系統(tǒng)各自的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)進(jìn)行了一個比較。靈活的波長選擇252。熒光偏振性能+++TRF/TRFRET性能+++防止激發(fā)發(fā)射光譜交叉252。發(fā)光過濾（BRET）252。探頭位置頂部/底部只有頂部二向色鏡頂部支持孔板類型11536孔板1384孔板采用的PMT低噪音PMT（700nm）*紅移PMT（800nm）光源鹵鎢燈（默認(rèn)），氙閃燈（TRF選擇）氙閃燈++表示性能更好+可支持該種檢測；比濾光片系統(tǒng)靈敏度稍低*在基于單色器的系統(tǒng)里，采用紅移PMT替代低噪音PMT。在可進(jìn)行熒光偏振實(shí)驗(yàn)的機(jī)型中，該鏡架還將配備偏振濾光片。此時激發(fā)濾光片輪上必須包括一個定制分選的濾光片（上面標(biāo)有Mono LP濾光片），而且必須還有一個空的位置。如有必要的話，濾光片還可用來篩選光線。吸收光光路采用了超靜氙閃燈以及分選波長的單色器。單色器分選波長范圍從200999nm的光，以1納米遞增。這款儀器是通過電腦控制，使用BioTek自帶的Gen5TM軟件可以滿足各種操作需要，包括數(shù)據(jù)采集和分析。Gen5通過支持OLE自動化使Synergy4可輕松的整合到任意一套自動化系統(tǒng)中。內(nèi)置的孔板振蕩功能保證了在孔板中加入不同試劑后能很好的混勻從而更準(zhǔn)確的讀板。（化學(xué)發(fā)光模式和光柵模式的熒光檢測不支持1536孔板）。外置的注射器泵可將試劑從供液瓶中壓到注射器頭中。四、儀器使用培訓(xùn)第一章：儀器連接1 儀器的連接：按照操作指南連接酶標(biāo)儀與計算機(jī)，確保電源線和USB接口正常后，打開酶標(biāo)儀。雙擊歡迎界面的向?qū)Ь` Next第一步：檢測步驟設(shè)置雙擊對話框中Procedure下方 彩色圖標(biāo)看到編程界面（根據(jù)儀器的配置不同，可以選擇的功能按鈕為黑色，不能選擇的功能按鈕變?yōu)榛疑㏄late Type:在右側(cè)的下拉框中選擇酶標(biāo)板的型號和類型1 點(diǎn)擊Synchronized mode：選擇Well模式（逐孔讀數(shù)：加一孔讀一孔） ，該工具在使用分液裝置時才需要使用；或者Plate模式（整板讀數(shù)：嚴(yán)格控制每個空的讀板參數(shù)的一致性）。Spectrum 功能跳出如下對話框，設(shè)置掃描的起始波長、終止波長和波長間隔Read speed：定義閱讀的速度 （正常 掃描）Wavelenghs：對檢測的波長進(jìn)行定義，可以同時定義6個檢測波長。6 ：定義動力學(xué)檢測，單擊kinetic按鈕Run time：運(yùn)行時間Interval:讀數(shù)間隔Reads：讀數(shù)次數(shù)Minimum interval:選擇最小讀數(shù)間隔時間7 ：對一個孔或者一組孔設(shè)置一個標(biāo)準(zhǔn)，只有當(dāng)指定的孔達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，才會開始進(jìn)行整板閱讀。雙擊Plate Layout 下方彩色圖標(biāo)進(jìn)入布板界面 Type：選擇檢測孔的類型，有Empty、Blank、Assay Control、Sample、Sample Control、Standard等可供選擇。Replicates： Number輸入樣本的重復(fù)數(shù)。Auto Select： Next ID 樣本編號自動遞增Next Dil 稀釋濃度自動遞增。在Standard中，除了要進(jìn)行排布以外，還需要進(jìn)一步輸入標(biāo)準(zhǔn)品的濃度和稀釋關(guān)系。當(dāng)樣品排布好之后點(diǎn)擊OK，向?qū)Ь`提示這一步結(jié)束，點(diǎn)擊Next進(jìn)入下一步。1 Transformation：雙擊 按鈕，出現(xiàn)Transformation設(shè)置界面Data In ：選擇下拉列表中選擇要進(jìn)行賦值的數(shù)據(jù)，如果有多個數(shù)據(jù)需要，點(diǎn)擊下方 按鈕，進(jìn)行多重的賦值New Data Name：輸入公式計算后數(shù)據(jù)輸出所用的名稱Formula：輸入需要計算的公式，如上圖：分別讀取390和540的吸光度值，別將這兩種數(shù)據(jù)賦值為DS1和DS2，公式計算DS1/DS2，將計算值命名為Ratio。選擇Deference Between Rows或Deference Between Column 可以進(jìn)行行間或列間的差值計算。點(diǎn)擊OK保存設(shè)置。您可以定義最多25個Y值（公式、數(shù)字），其對應(yīng)的X值（濃度）就會被計算出來，并顯示在標(biāo)準(zhǔn)曲線上。Symbols 輸入分類顯示的標(biāo)識。但是必須是升序排列。4 Validation：雙擊圖標(biāo)，進(jìn)入檢驗(yàn)值設(shè)置界面Validation是一系列的判斷標(biāo)準(zhǔn)，用來評估獲得的數(shù)據(jù)是否適宜進(jìn)行后面的計算，Gene5可定義多達(dá)50個檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。Unable to Evaluate Text 如果選擇的數(shù)據(jù)不能確定時，可能會出現(xiàn)這種情況。軟件提示你選擇對得到的結(jié)果進(jìn)行何種方式的輸出，根據(jù)需要進(jìn)行選擇第四步 構(gòu)建報告模板雙擊按鈕進(jìn)入構(gòu)建數(shù)據(jù)報告模板界面1 在左側(cè)列表中選擇要輸出的原始數(shù)據(jù)，點(diǎn)擊Add，添加到右側(cè)的列表欄中，點(diǎn)擊Remove可以移去右側(cè)列表中多選的或者不需要的數(shù)據(jù)2 選擇Header或Footer設(shè)置報告的頁眉或頁腳3 點(diǎn)擊按鈕，可以預(yù)覽模板4當(dāng)全部設(shè)定好后，點(diǎn)擊OK 精靈向?qū)崾揪幊坛晒c(diǎn)擊Finish結(jié)束編程。Read 讀板ReRead 二次讀板，將覆蓋上次的讀數(shù)結(jié)果Enter Manually 手動輸入檢測值Read From File 可以導(dǎo)入其它文件讀數(shù)Simulate Read 在沒有連接酶標(biāo)儀的情況下模擬讀板過程和數(shù)據(jù)讀數(shù)結(jié)束點(diǎn)擊 File Save As 選擇相應(yīng)的路徑，輸入實(shí)驗(yàn)名稱，保存實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)通過以上的設(shè)置和運(yùn)行，完成了一次基本的實(shí)驗(yàn)過程總結(jié)過程如下使用向?qū)Ь`進(jìn)行程序編輯和讀板的全流程1 點(diǎn)擊向?qū)Ь`圖標(biāo)2 對程序每一個步驟進(jìn)行設(shè)置3 全部設(shè)定好之后，點(diǎn)擊Next進(jìn)入下一步，程序進(jìn)行校驗(yàn)4 選擇File Save 保存程序，并給程序命名5 選擇File New Experiment，選擇剛才編輯好的程序，點(diǎn)擊OK6 選擇 Read Plate，編輯板的信息后，點(diǎn)擊Read，開始讀板7選擇File Save 保存Experiment，并給Experiment命名如何不通過向?qū)?，自行編寫一個Protocol點(diǎn)擊歡迎界面中選項(xiàng)，打