dna的結構ppt課件-在線瀏覽
2025-06-18 18:15本頁面
【正文】 螺旋模型的提出 （ double helix model） ? 每一單鏈具有 5‘ 3’極性 兩條單鏈極性相反 ,反向平行 ? 兩條單鏈間以氫鍵連接 ? 以中心為軸 ， 向 右 盤 旋 （直徑 2nm） ? 雙 螺 旋 中 存 在 大，小 溝 * 雙螺旋的主鏈 磷酸二酯鏈 (Phosphodiester Backbone) CG TA 堿基互補 直徑 20197。 螺距為 34197。 每圈有 10個核苷酸 （堿基） 兩個堿基之間的垂直 距離是 。 / 嘌呤環(huán)與嘧啶環(huán) 作用半徑 ) ( nm/堿基對間距 ) 176。 BDNA 資料來自相對濕度為 92％所得到的 DNA鈉鹽纖維 mitosis 有關 Hoogsteen Bonding 5’TTAGGGTTAGGGTTAGGGT 3’AATCCCAATCCC GGG T A 第四節(jié) DNA的物理、化學性質(zhì) DNA雙股鏈的互補 是其結構和功能上的一個基本特征 也是 DNA研究中一些實驗技術的基礎 一、 DNA分子的變性 變性 （ denaturation 或融解 melting） ： DNA雙螺旋區(qū)的 氫鍵斷裂 ， 使雙螺旋的兩條鏈完全分開變成單鏈 ， 這 一雙鏈分離的過程叫做變性 條件：加熱 , 極端 pH,有機溶劑（ 尿素、 酰胺 )，低鹽濃度等 變性過程的表現(xiàn) 164。 導致一些理化性質(zhì)發(fā)生劇烈變化 表現(xiàn)為： ※ 熔液黏度降低 ※ 沉降速度加大 ※ 浮力密度上升 ※ 此外吸收值升高 （ A260nm） ， 即 增色效應 指在 DNA變性的過程中 ， 他在 260nm的吸收值先是緩慢 上升 ， 達到某一溫度時及驟然上升 天然 DNA和變性 DNA的吸收值相差可達 34％ DNA A260 = DNA A260 = dNTPs A260 = 當濃度為 50μg/ml時： OD ℃ Tm = OD增加值的中點溫度 (一般為 8595℃ ) 或 DNA雙螺旋結構失去一半時的溫度 熔解曲線與 融解溫度 (Tm值 ) 緩慢而均勻地增加 DNA 溶液的溫度（現(xiàn)可做到 ℃ ／分 ）可根據(jù)各 點的 A260值繪制成 DNA 的熔解曲線 這也是一般 PCR實驗技術中把變性溫度定為 94 ℃ 的原因 影響 Tm值的因素 （ 1） 在 A, T, C, G 隨機分布的情況下 ，決定于 GC含量 （ 2） GC%含量相同的情況下 GC%愈高 → Tm值愈大 GC%愈低 → Tm 值愈小 AT形成變性核心，變性加快， Tm 值小 堿基排列對 Tm值具有明顯影響 5` GC 3` CG n ＞＞ 5` CG 3` GC n 5` TA 3` AT n ＜＜ 5` AT 3` TA n ℃ ℃ Tm ℃ ℃ ※ 嘌呤嘧啶的排列順序?qū)﹄p螺旋結構 （ 穩(wěn)定性 ） 的影響 即－－ 氫鍵數(shù)目相同 ， 但相鄰堿基的堆積力不同 從嘌呤到嘧啶方向的堿基堆積力作用顯著地大于同樣組成的嘧啶到嘌呤方向的堿基堆積作用 PyrimidinePurine Steps Have Little Base Stacking 5’ 3’ 3’ 5’ C G A T 5’ CA 3’ 3’ GT 5’ PurinePyrimidine Steps Have Extensive Base Stacking 5’ 3’ 3’ C A T G 5’ 5’ AC 3’ 3’ TG 5’ ? 生物體內(nèi)僅 UAA為最有效的終止密碼子 因為： UAA AUU 的 Tm值是最低的一個 ， 即使生 理溫度下也不穩(wěn)定 （ 3） 大片段 DNA分子之間比較 片段長短對 Tm值的影響較小 , 與組成和排列相關 （ 4） 小于 100
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