【正文】 ] 。 1 化妝品的微生物污染問題 1． 1 化妝品微生物污染事件回顧 1967 年 Morse 和他的合作者報道了肺炎克雷白桿菌污染護手霜引起的敗血病事件 ? 。 Reid FR 等 1979 年的調(diào)查顯示，一個婦女在使用睫毛膏傷害眼角膜后，發(fā)生了綠膿桿菌角膜潰瘍，并迅速發(fā)展，經(jīng)研究證明綠膿桿菌是急性角膜潰瘍的感染因素，污染眼部化妝品后 ，可引起眼部永久感染 ]。但是隨著科技的發(fā)展，生產(chǎn)水平的提高，化妝品的質(zhì)量也在提高。 ” 但是化妝品的微生物污染問題卻始終存在，對消費者的健康還存在著潛在的危害 . 1． 2 化妝品微生物的污染情況 Peter G Hugbo 對貝寧灣城市市售的 1O 個品牌的化妝品進行抽樣調(diào)查，所有化妝品都有 不同程度的污染，其中葡萄球菌和其他革蘭陽性球菌占多數(shù)，革蘭陰性菌分離比較少見，分離的真菌為青霉菌等 。檢出的微生物主要為革蘭陽性桿菌，其次為金黃色葡萄球，除大腸桿菌外，其他革蘭陰性菌比較少見 。由此可見不同地區(qū)檢出的優(yōu) 勢菌株并不完全相同，化妝品的防腐工作也應有針對性的進行。江西省 1995— 2022 年化妝 品微生物指標檢測總的合格率為 91． 5％，菌落總數(shù)、糞大腸菌群和致病菌的合格率分別為 94． 4％、 99， 5％、 98． 1％。山西省疾病預防控制中心 1989— 2022年 686份化妝品的檢測結(jié)果表明，微生物指標合格率為 86． 30％：其中細菌總數(shù) 為 86， 73％，糞人 腸菌群、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌分別為 98， 69％、 99． 56％、 99． 85… J。2022— 2022 年烏魯木齊市化妝品衛(wèi)生監(jiān)督與檢驗質(zhì)量分析，化妝品微生物學指標合格率為 91． 8％， 110 份化妝品中有 lO 份不合格 。有的化妝品霉菌和酵母菌超出標準5O 倍之多。煙臺市對 152 份賓館一次性化妝品小包裝抽檢發(fā)現(xiàn)，衛(wèi)生化學指標均超標，細菌總數(shù)超標 2 份，最高達 3． 110 efu／ ml，超過國家標準 310 倍 ” ?；瘖y品的使用是直接與施用部位接觸，其發(fā)揮功效的同時有可能產(chǎn)生一些不良反應。 1 化妝品微生物指標的重要性和局限性 各地衛(wèi)生檢測機構歷年來對化妝品微生物檢測的結(jié)果表明 ,微生物指標存在著一定比例的超標率是普遍的問題 ,微生物超標是化妝品合格與否的主要影響因素。 1 987～ 2022 年間 ,部分省市衛(wèi)生監(jiān)督機構先后對連續(xù)監(jiān)測 5～ 12 年的資料進行了分析。其中細菌總數(shù)為 91 % ,糞大腸菌群、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌為 99 %～ 100 %。其中細菌總數(shù)為 86 % ,糞大腸菌群、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌為 98 %～ 99 %。其中細菌總數(shù)為 94 % ,糞大腸菌群、致病菌、霉菌和酵母菌為 98 %～99 %。不合格的絕大多數(shù)是細菌總數(shù)超標 ,較少檢出致病菌。天津市衛(wèi)生防病中心對 1 899 份 化妝品檢測 結(jié)果進行分析[ 6 ] ,微生物指標合格率平均為 92 %。同時對 1990 年開始執(zhí)行《化妝品衛(wèi)生監(jiān)督條例》前后進行比較 ,實施前694 份化妝品的微生物指標合格率為 87 % ,實施后 1 205 份化妝品的微生物指標合格率上升為 95 %。由 此可見 ,各地抽檢的化妝品微生物指標不合格的 ,主要是細菌總數(shù)超標 ,其次是糞大腸菌群、霉菌和酵母菌 ,較少檢出國家標準監(jiān)控的致病菌。 1997 年國家技術監(jiān)督局發(fā)布的中華人民共和國國家標準：《化妝品皮膚病診斷標準及處理原則》（ GB171491997）對化妝品引起的各類型皮膚和附屬器的病變作了明確的定義、提出了診斷原則、診斷標準（ GB1714927）和處理原則。該標準對六種常見化妝品皮膚病分別以國家強制性標準的形式，對診斷的具體要求和方法做出了規(guī)定。除與地區(qū)的氣候等自然條件有關以外，地區(qū)經(jīng)濟的發(fā)展是重要因素之一。通?；瘖y品皮膚病在經(jīng)常使用化妝品的人群較多見，因而一些常需要化妝的行業(yè)發(fā)病率較高，如服務行業(yè)、商業(yè)、文藝工作者等。 一般使用普遍、使用量大、使用頻率高的化妝品引起化妝品皮膚病的比例高。 可見化妝品的衛(wèi)生質(zhì)量正逐年提高，但微生物污染問題還有發(fā)生，尤其一些簡易包裝、非正規(guī)廠家生產(chǎn)的化妝品等污染問題還比較嚴重，對消費者的健康還存在隱患。 由此可見化妝品中的微生物對我們的健康造成了一定的危害，所以我們在購 買化妝品德時候我們要注意化妝品的生產(chǎn)日期和其成分，以至于我們不會因為其中的某些成分對我們自身造成危害。 因為化妝品中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，所以容易造成微生物的污染 ,添加防腐劑是預防化妝品微生物污染的主要手段。而且化妝品的成分復雜 ,主要有油性原料、粉質(zhì)原料和水溶性聚合物等 ,其中干擾防腐劑作用效果的因素比較廣泛 ,因此防腐劑的選擇是化妝品研制的一個重要環(huán)節(jié) ,既要達到防腐的效果又要盡可能地減少 防腐劑的用量 .目前對防腐劑的評價多是通過高效液相色譜法、氣相色譜法等方法測定其在產(chǎn)品中的含量來進行。微生物挑戰(zhàn)性實驗是目前比較公認的評價防腐劑防腐效果的生物學方法 , 通過該方法可以選擇既能有效抑菌又可以使產(chǎn)品安全的化妝品中防腐劑的最低濃度?；瘖y品常用防腐劑一般包括酚類、酯類、鹵化物及季銨鹽等。筆者采用上述防腐劑 ,用純培養(yǎng)的方式 ,探索在化妝品基質(zhì)中不同防腐劑對不同菌株的作用效果 ,為防腐劑的選擇提供依據(jù)。 1 材料與方法 材料 化妝品樣品 實驗用化妝品為本實驗室自制的樣品 ,生產(chǎn)過程經(jīng)過嚴格的無菌控制 ,防腐劑成分及含量明確。 實驗用菌株金黃色葡萄球菌 (ATCC6538)、大腸桿菌 (ATCC8739)、銅綠色假單胞菌 (ATCC9027)、黑曲霉 (ATCC16404)、白色假絲酵母 (ATCC10231)均購自美國標準菌庫。 實驗用菌懸液將以上各細菌接種在 TSA 培養(yǎng)斜面上 ,37℃ 培養(yǎng) 24h。分別用 %的無菌鹽水和含 %吐溫80 的無菌鹽水將菌苔洗下 ,充分混合制成菌懸液 (細菌 :108 cfu/ml,真菌 :106 cfu/ml)備用。 培養(yǎng)方式純培養(yǎng)。于第 0、 14??2 28 d 用平板計數(shù)法檢測微生物的生長情況。真菌于第 14 天下降 2 log,至第 28 天時無增長 ,判斷為防腐劑防腐效果良好。對羥基苯甲酸酯類防腐劑是化妝品中使用最