史上最強(qiáng)生物課件動物細(xì)胞工程-在線瀏覽
2025-03-02 16:03本頁面
【正文】 合 正在融合的 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞 正在融合的雞血細(xì)胞 ⑶ 動物細(xì)胞融合的原理： 細(xì)胞膜的流動性 把兩個不同的動物細(xì)胞放在一起，用滅活的病毒處理細(xì)胞，它們先發(fā)生質(zhì)融合，再出現(xiàn)核融合，進(jìn)而形成雜交細(xì)胞。 ⑴ 什么是抗原？ 例如花粉、病菌、病毒等。 抗原決定簇： 抗原表面具有的某些 特定的化學(xué)基團(tuán) ，能決定抗原特異性 ，是免疫細(xì)胞識別抗原的重要依據(jù)。 ⑵ 什么是 抗體 ？由何種細(xì)胞產(chǎn)生？主要分布在哪里 ?起何作用？ 當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激劑后由效應(yīng) B細(xì)胞（漿細(xì)胞）產(chǎn)生的，并且能與該抗原發(fā)生 特異性結(jié)合 的具有免疫功能的球蛋白 —— 抗體。 抗體與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合 抗體由何種細(xì)胞產(chǎn)生？主要分布在哪里 ? 血清抗體（也稱多克隆抗體） 由 血清 中提取的抗體是由不同淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的多種抗體的混合物，可達(dá)百萬種以上，稱為 多克隆抗體。 抗原不純 抗體不純 抗原 動物體內(nèi) 刺激 效應(yīng) B 抗體 每一個 B淋巴細(xì)胞只分泌一種 化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)的抗體 。 問題： 怎樣獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體呢？ 在體外培養(yǎng)的條件下，一個 B淋巴細(xì)胞能無限增殖形成細(xì)胞群嗎？ 什么樣的細(xì)胞能夠在體外無限增殖呢？ —— 腫瘤細(xì)胞！ 科勒 米爾斯坦 榮獲 1984年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎 如果把一種 B淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，所得到的 融合細(xì)胞 既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。 ①首先用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞 ①細(xì)胞合成 DNA有 D和 S兩條途徑，其中 D途徑能被氨基嘌呤阻斷。 ③ 鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有 D途徑，沒有 S途徑，可是能不斷分裂增殖。 通常 采用有限稀釋克隆細(xì)胞的方法 ，將雜交瘤細(xì)胞多倍稀釋，接種在多孔細(xì)胞培養(yǎng)板上培養(yǎng)，使每孔細(xì)胞不超過一個， 再由這些單細(xì)胞克隆生長， 然后檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體，那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。 ② 再篩選出 能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 陽性孔 方法 —— 抗原 抗體雜交法 在單克隆抗體制備過程中，兩次篩選的原理和方法是不相同的。 我們還是拿不到 McAb,怎么辦 ? 篩選！篩出雜交瘤細(xì)胞。 關(guān)鍵一步 單克隆抗體 篩選 雜交細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 體外或體內(nèi) 細(xì)胞培養(yǎng) 篩選 骨髓瘤 細(xì)胞 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 特異性雜交瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞系 提取 經(jīng)過免疫的 B淋巴細(xì)胞 動物細(xì)胞融合技術(shù) 動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 單克隆抗體的制備過程： 特點：既能產(chǎn)生專一抗體又能大量繁殖 特點：特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備 注射抗原 免疫 單抗隆抗體的應(yīng)用 ①作為診斷試劑 ②定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病 用于體外診斷人類和動植物疾病及病原鑒定， 純度高、特異性強(qiáng) ，具有 準(zhǔn)確、高效、簡易、快速 的優(yōu)點。 單克隆抗體的優(yōu)點： 特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可以大量制備。 B 體外培養(yǎng) 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 足夠數(shù)量的細(xì)胞群 注射到 小鼠腹腔 A C ，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的抗體實驗方案 ⑴ 該實驗方案的 目是 ； ⑵ A是從小鼠的脾臟中取得 _______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生 ； 制備單克隆抗體 B細(xì)胞 專一抗體 細(xì)胞融合 滅活病毒 雙親細(xì)胞 分泌專一抗體 無限增殖 單克隆抗體的制備 怎樣獲得能分泌專一抗體的 B淋巴細(xì)胞？ 從何處獲得較多的 B淋巴細(xì)胞？ 用什么方法可以使 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合？ 怎樣篩選出雜交瘤細(xì)胞？ 篩選出的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體都一樣嗎？ 怎樣獲得只產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞？
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