【正文】 床研究的，要明確記錄原因，若受試者未按時來院復(fù)診時，應(yīng)通過電話、信件咨詢理由，調(diào) 查其中只研究后的情況，并進行受試者中途撤出臨床研究時的臨床評價。研究方案和病例報告表完成后制定統(tǒng)計分析計劃，并在研究過程中根據(jù)需要進行必要的修改數(shù)據(jù)分析 11 完成后提供統(tǒng)計分析報告。 B. 病例報告表表的進一步檢查：已經(jīng)審核聲明簽字的病例報告表表交數(shù)據(jù)管理員，數(shù)據(jù)管理員對日期、入組標準、剔除標準、脫落標準、缺失值等進行檢查：如有疑問，可填寫“數(shù)據(jù)問題表”，返回監(jiān)查員，由研究者對疑問表中的問題進行書面解答并簽名，交回數(shù)據(jù)管理員，“數(shù)據(jù)問題表”應(yīng)妥善保管。 D. 數(shù)據(jù)的審核：對數(shù)據(jù)庫采用 ，報告不一致的結(jié)果值，然后逐項核對原始病例報告表，予以更正，再隨機抽取 10 份病例報告表和 數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)進行人工比較，以確保數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)與病例報告表中的結(jié)果一致。統(tǒng)計分析時將其中未能觀察到全部治療過程的病例資料，用最后一次觀察數(shù)據(jù)結(jié)轉(zhuǎn)到試驗最終結(jié)果，對主要指標療效和安全性進行意向性分析。 統(tǒng)計分析內(nèi)容 A. 受試者分配情況分析 : —— 各中心受試者分布表：報告各中心各組的計劃受試者數(shù)、篩選、納入受試者數(shù)、實際完成受試者數(shù)、剔除受試者數(shù)及脫落受試者數(shù)； —— 剔除和脫落原因分析表：根據(jù)剔除和脫落原因，分類報告兩組的剔除和脫落受試者數(shù)及所占比例； —— 治療 (服藥 )依從性比較表：報告各組的治療 (服藥 )例數(shù)、依從例數(shù)及依從率。 統(tǒng)計軟件包 所有統(tǒng)計計算用 。 20 例 20 例 1 次，中期統(tǒng)計分析 各中心試驗組進行臨床 觀察完成樣本例數(shù) 30 例 各中心試驗組進行臨床觀察完成樣本例數(shù) 30 例 ,并錄制標準操作的錄像， 2. 匯總資料 ,參加學(xué)術(shù)會議一次 . 統(tǒng)計分析 .撰寫臨床研究評價報告和技術(shù)操作規(guī)范文本 .申請驗收 ,臨床觀察表 .研究人員手冊和隨機信封 20 份 20 份 ,及統(tǒng)計分析報表 規(guī)范的病例報告及相關(guān)檢查報告 30 份 規(guī)范的病例報告及相關(guān)檢查報告 30 份 規(guī)范性的療效與安全性資料 合格的臨床療效再評價和技術(shù)操作規(guī)范文本 其他說明 注：時間安排以季度（或月）為單位。 同意將 楊氏貼棉灸治療神經(jīng)性皮炎的臨床療效評價 列為國 2022 年度國家中醫(yī)藥管理局中醫(yī)臨床診療技術(shù)整理與研究項目課題。 課題編號：國中醫(yī)藥科 2022 ZL號。 其他相關(guān)單位匹配研究經(jīng)費： 萬元。 其 他單位科技主管 (簽章 )： 課題組第一申請人 (簽章 )： 其他單位公章： 財務(wù)負責(zé)人 (簽章 )： 開戶名： 開戶銀行： 其他相關(guān)單位匹配研究經(jīng)費： 萬元。 其他單位公章： 科技主管 (簽章 )： 其他相關(guān)單位匹配研究經(jīng)費： 萬元。 匹配研究經(jīng)費： 萬元。 科技主管（簽章）： 主管部門（單位）（蓋章） 年 月 日 本合同一式三份，由甲、乙、丙三方各執(zhí)一份。 7 登記序號： 項目編號： 中醫(yī)藥、中西醫(yī)結(jié)合科研項目 課題設(shè)計書 課題名稱 ：痛痹顆粒對骨關(guān)節(jié)炎細胞凋亡和增殖的機理研究 申報單位 ： 江蘇省中醫(yī)院 課題負責(zé)人 ： 朱 萱 萱 計劃年限 ： 郵政編 碼 ： 210029 聯(lián)系電話： 86617141— 30306 申報日期 ： 江蘇省中醫(yī)藥局制 8 填寫提綱 一、立項依據(jù)：與選題直接相關(guān)的國內(nèi)外現(xiàn)狀、水平和發(fā)展趨勢；選題的理論和實踐依據(jù)；研究目的、意義；本研究達到的科學(xué)技術(shù)水平，預(yù)期社會經(jīng)濟效益和應(yīng)用推廣前景。 三、研究試驗方法及技術(shù)路線（工藝路線）。 五、計劃進度：根據(jù)總的研究期限、年度計劃進度，分別列出具體的目標和進度的考核指標。 七、經(jīng)費概算（包括其他部門的撥款、貸款、自籌記憶取得的自主）和核算依據(jù)，以及分年度使用計劃。 二、填寫提綱所列內(nèi)容，要全面詳細、如實填寫。 立項依據(jù) 研究目的、意義 骨關(guān)節(jié)炎（ osteoarthritis， OA）又稱退行性關(guān)節(jié)病，以關(guān)節(jié)軟骨發(fā)生彌漫性龜裂、 9 纖維化和脫失及因骨組織增生性變化為特征的一組臨床征候群，是多見于中年以后的慢性進行性關(guān)節(jié)疾患。在我國，根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查顯示， 55— 64 歲的人群中發(fā)病率達 40%，而 65 歲以上人群的患病率達60%~90%。同時世界其他國家也面臨著同樣的問題，因而 OA 引起了國際、國內(nèi)醫(yī)學(xué)界的相當重視。西藥治療 OA 的主要手段是非甾體藥，但存在副作用大、作用單一及有較多禁忌癥等缺點。 國內(nèi)外現(xiàn)狀水平和發(fā)展趨勢 近十年來，國內(nèi)外對 OA 進行了較深入地研究，大致歸納如下： 流行病學(xué)研究已廣泛開展 在近 100 種不同類型的關(guān)節(jié)疾病中， OA 是影響人類健康最常見的關(guān)節(jié)疾患之一，沒有明顯的種族和地域差異，本病的患病率隨年齡增加而增高，故隨著人類平均壽命的延長，患病 率也有增高的趨勢。 Butter 等報道， 44 歲以下、45— 59 歲、 60 歲以上人群中，放射血 OA 患病率各為 %、 %和 %。汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院統(tǒng)計 551 例，結(jié)果 40 歲以下、 40— 4 50— 59 和 60 歲以上各占 %、%、 %和 %。美國在衛(wèi)生統(tǒng)計中心調(diào)查結(jié)果， OA 患病率以手最高，以下依次為足、膝、髖。本病性別差異在脊柱差別不大，但手、膝、髖 OA 均以女性較多，且女性骨關(guān)節(jié)炎的遺傳易感性較男性高。 Saase等調(diào)查結(jié)果，膝 OA 患病率男、女峰值分別為 %和 %。在我國雖未作全國大范圍的普查，但隨著老齡化社會進程的不斷加快，OA 的發(fā)病率會越來越高，這必將給家庭、社會帶來沉重負擔(dān)。骨內(nèi)高壓持續(xù)增高存在下關(guān)節(jié)滑液 pH 值下降，成分改變，干擾并破壞了軟骨細胞的正常代謝導(dǎo)致細胞變性壞死，膠原纖維解聚，蛋白多糖分解，軟骨下骨破壞、修復(fù)，最終產(chǎn)生骨性關(guān)節(jié)炎。自由基作用軟骨細胞后，引發(fā)膜脂質(zhì)過氧化，使脂質(zhì)過氧化代謝產(chǎn)物丙二醛增多，丙二醛可與 DNA 發(fā)生交聯(lián)，自由基也可直接攻擊軟骨細胞 DNA即合成 DNA 所需的酶，使 DNA 鏈斷裂、堿基損傷從而影響了 DNA 的合成，也造成前列腺（ PG）合成障礙。 IL1 具有刺激軟骨細胞分泌一氧化氮、前列腺 E 和 IL6 的作用，引起滑膜炎癥和疼痛，同時 IL1 也是軟骨基質(zhì)降解的主要驅(qū)動因子；軟骨酶降 解學(xué)說： OA 軟骨細胞的基質(zhì)降解酶類的合成與分泌率明顯增加，并與關(guān)節(jié)炎的嚴重程度密切相關(guān)。酸性和中性蛋白酶可以降解蛋白多糖的核心蛋白。在滑膜細胞和軟骨細胞產(chǎn)生的 IL1 和 TNF 的作用下，軟骨細胞以酶原的形式分泌大量的基質(zhì)金屬蛋白酶，而對金屬蛋白酶組織抑制劑無影響，使二者失衡從而增加對軟骨主要成分 Ⅱ 型 膠原和蛋白聚糖合成的抑制作用，使軟骨進行性破壞；一氧化氮學(xué)說： NO 是一種細胞間信使分子，可介導(dǎo)許多生物學(xué)現(xiàn)象。 NO 可通過抑制軟骨細胞增殖，促進軟骨細胞凋亡，改變蛋白多糖和膠原蛋白的合成與分泌功能，同時使軟骨細胞分泌透明質(zhì)酸減少，滑膜粘蛋白解聚，抑制軟骨細胞合成軟骨基質(zhì)，促進軟骨細胞糖酵解，使軟骨破壞。凋亡小體存在于軟骨細胞小孔或間隙內(nèi)，其產(chǎn)生的焦磷酸鹽能從溶液中沉積鈣，有NTPPH（ nucleosid triphosphate pyrophos phohydrolase）和堿性磷酸酶作用 ,造成余下軟骨細胞修復(fù)過程失敗，而逐漸發(fā)展成關(guān)節(jié)軟骨的完全丟失。另一種是同滑膜炎癥相關(guān)的途徑 ,由 Fas 介導(dǎo)。當 產(chǎn)生炎癥反應(yīng)時 ,則通過Ｆ as 途徑加劇軟骨細胞凋亡和關(guān)節(jié)破壞。一是高濃度的 NO 能抑制多種與線粒體呼吸傳遞系統(tǒng)及檸檬酸循環(huán)有關(guān)的酶 ,從而抑制線粒體呼吸 ,造成組織損傷 。在OA 患者中 ,受損區(qū)軟骨細胞的凋亡比例明顯高于未受損區(qū)。除 NO途徑和 Fas 途徑外 ,還有一些因素可導(dǎo)致軟骨細胞凋亡、關(guān)節(jié)破壞 ,如 IL IL TNFα 、 PGE Aggrecan G1 區(qū)等。關(guān)節(jié)清理術(shù)、膝關(guān)節(jié)置換術(shù)，適應(yīng)癥較少，費用高，創(chuàng)傷大，病人難以接受。②缺乏用客觀的最新的國際公認的、量化的臨床觀察指標及療效判斷標準為手段來尋找治療 OA 的中藥。④缺乏高效的、作用綜合、副作用小的新藥。周尊謙等人在傳統(tǒng)中醫(yī)理論基礎(chǔ)上，闡述了膝 OA— 骨內(nèi)高壓 — 血瘀證 — 氧自由基之間的密切關(guān)系；謝林等論述了膝 OA 與血瘀證之間的內(nèi)在聯(lián)系，旨在為運用活血化淤藥治療 OA提供理論依據(jù)。獨活寄生湯是用于治療風(fēng)寒濕痹、關(guān)節(jié)疼痛和腦血管后遺癥的傳統(tǒng)固防，具有補肝腎、活血通絡(luò)之功，臨床常見本方加減治療 OA，療效比較肯定。單文龍等用本方加減治療骨關(guān)節(jié)炎 24 例，有效率為 %。 實驗研究方面有了較大的進展 隨著對 OA 發(fā)病機理的不斷深入認識，對 OA 的實驗研究方面也開始了向多層次多角度的方向發(fā)展。目前實驗研究內(nèi)容主要有以下幾個方面，研究最多的是 OA 的血液流變學(xué)、氧自由基及一氧化氮含量等，這些試驗一般均可通過建立骨關(guān)節(jié)炎的模型來完成，也可通過使用其它相似的模型檢測相關(guān)指標來進行，如可建立急性血淤模型來檢查血液流變學(xué)指標，使用老齡動物通過檢測體內(nèi)SOD 及 MDA 含量推斷藥物的抗氧自由基的能力等。 ILIL TNF 等細胞因子、軟骨降解酶尤其是基質(zhì)金屬蛋白酶 、誘導(dǎo)關(guān)節(jié)滑膜炎癥的物質(zhì)如纖溶酶原 /纖溶酶原激活物和前列腺素 PGE軟骨細胞的細胞凋亡及增殖情況、性激素水平等也越來越多地被作為檢測指標使用到實驗研究中來。我們認為 OA 病人除了肝腎虧虛，寒濕痹阻外，一般 OA 病人體重超重較多，也即為痰濕偏盛之體，另外脾虛生濕及寒濕痹阻日久濕聚成痰，痰淤交阻是引起膝關(guān) 13 節(jié)腫脹畸形、活動受限的重要因素，所謂頑癥怪病皆質(zhì)之于痰淤。諸藥合用共起補 肝腎、祛風(fēng)濕、化瘀痰之功，冀能消炎止痛，保護軟骨。因此有必要對痛痹顆粒治療骨性關(guān)節(jié)炎的作用機制尤其是該方對軟骨細胞的細胞凋亡與增殖機理做進一步的研究，冀能證實痛痹顆粒的臨床療效，明確其作用機制，并初步探討本病發(fā)病的可能機理，為新藥問世提供客觀的依據(jù)，所以進行設(shè)計并立題。本實驗采用可靠地國際公認的方法復(fù)制動物模型，并采用最新的檢測指標 IL TNF、 SOD、 MDA、NO 等，總之本研究基于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對 OA 發(fā)病機制的最新研究成果，從生化、免疫等多個角度多個層次，系統(tǒng)觀察并進行歸納總結(jié)，確保本課題不但可行而且先進，冀能填補省內(nèi)外運用中藥治療 OA 的空白，并希望以此為基礎(chǔ)，進一步從細胞水平（包括本藥對軟骨細胞及細胞凋亡與增殖的影響）研究中藥對 OA 的長久作用及影響，從而達到擠身國際先進水平的目的，讓中藥真正走向世界。而痛痹顆粒是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下選用《千金要方》中獨活寄生湯進行加減所得，并采用可靠的實驗?zāi)Ｐ图白钚碌膰H公認的相關(guān)指標進行實驗研究，觀察其對 OA 的確切療效及作用機理，這必將對 OA 的中醫(yī)理論產(chǎn)生較大 影響，同時對臨床治療也起到更好的指 14 導(dǎo)作用，從而產(chǎn)生較好的社會經(jīng)濟效益。 ：主要內(nèi)容、技術(shù)關(guān)鍵目的，技術(shù)特征及創(chuàng)新之處，開發(fā)項目應(yīng)說明開發(fā)規(guī)模。 運用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，開展實驗研究，從分 子生物學(xué)、免疫學(xué)、生理生化學(xué)等多方面來探討“痛痹顆?！敝委熛?OA 的療效機制及藥理毒理作用。在選擇動