20xx年醫(yī)學(xué)專題—干細(xì)胞標(biāo)記論文-展示頁(yè)
2024-11-19 05:26本頁(yè)面
【正文】 [56]。 細(xì)胞移植后的小鼠腋下MRI 掃描結(jié)果 圖23 討論 1，魚(yú)精蛋白SPIO標(biāo)記率單獨(dú)使用SPIO標(biāo)記非吞噬細(xì)胞的效果差，而SPIO和陽(yáng)離子轉(zhuǎn)染劑(transfection agents，Tas)形成混合物與細(xì)胞共培養(yǎng)可大幅提高細(xì)胞內(nèi)的鐵攝入量[34]。 收集標(biāo)記的細(xì)胞，制成100ul懸液，皮下注射小鼠左腋下，2周后進(jìn)行核磁共振成像2 結(jié)果2．1 SPIO 標(biāo)記干細(xì)胞的結(jié)果干細(xì)胞的超順磁氧化鐵顆粒標(biāo)記：電鏡顯示ESC胞質(zhì)內(nèi)散在分布許多囊泡樣結(jié)構(gòu)即吞飲小泡，高密度鐵顆粒主要集中在囊泡內(nèi)，直徑大約0．8～1．5 m(圖1)。1．2．2 干細(xì)胞的體外標(biāo)記及富集 6天之后，兩種細(xì)胞長(zhǎng)到大約整個(gè)瓶壁的60%，即用我們預(yù)先配制好的混合液給細(xì)胞換液，孵育過(guò)夜，接下第二天，觀察磁珠標(biāo)記的情況，并拍照，大多數(shù)細(xì)胞均被標(biāo)記。本研究選擇微米級(jí)超順磁氧化鐵顆粒(SPIO)標(biāo)記小鼠胚胎干細(xì)胞(ESC)及其分化的心肌細(xì)胞并行MR顯像，以檢測(cè)標(biāo)記的有效性和對(duì)細(xì)胞生物學(xué)活性影響。細(xì)胞通過(guò)吞噬、吞飲等方式將納米粒子內(nèi)吞于細(xì)胞體內(nèi)，而對(duì)不具有吞噬能力或吞噬能力較弱的細(xì)胞, 由于標(biāo)記率低而不能直接將此類造影劑用于細(xì)胞的標(biāo)記。因MR成像具有無(wú)放射性, 有較高的軟組織分辨能力和良好的重復(fù)性而倍受推崇[2]。核磁共振成像( MagneticResonance Imaging，MRI)是分子影像學(xué)的一種技術(shù)，增加了本實(shí)驗(yàn)過(guò)程細(xì)胞移植的無(wú)創(chuàng)活體示蹤的可行性。其中, 較為突出的是如何對(duì)移植的干細(xì)胞進(jìn)行長(zhǎng)期的、無(wú)創(chuàng)傷的實(shí)時(shí)檢測(cè), 從而了解其在體內(nèi)的分布、遷徙、分化和轉(zhuǎn)歸等生物學(xué)行為。胚胎干(embryonic stem,ES)細(xì)胞因具有全能性和無(wú)限增殖的能力而有望成為組織工程中種子細(xì)胞的新來(lái)源[1]。結(jié)論：SPIO能成功地標(biāo)記ESC，SPIO 標(biāo)記的ESC 皮下注射入小鼠體內(nèi)的分布、遷移過(guò)程可用MRI進(jìn)行檢測(cè)評(píng)價(jià)。采用顯微鏡觀察干細(xì)胞標(biāo)記情況，并進(jìn)行富集純化，將經(jīng)過(guò)SPIO標(biāo)記的干細(xì)胞皮下注射裸鼠體內(nèi)，應(yīng)用1．5TMRI系統(tǒng)進(jìn)行磁標(biāo)記干細(xì)胞成像。SPIO標(biāo)記人胚胎干細(xì)胞皮下注射小鼠的示蹤研究【摘要】目的：探討超順磁性氧化鐵微粒（SPIO）體外標(biāo)記人胚胎干細(xì)胞（ESC）及體內(nèi)示蹤皮下注射裸鼠的人胚胎干細(xì)胞的能力。方法：使用硫酸魚(yú)精蛋白SPIO 共培養(yǎng)方式標(biāo)記人胚胎干細(xì)胞。結(jié)果：初步標(biāo)記后的人胚胎干細(xì)胞用顯微鏡觀察，SPIO標(biāo)記的干細(xì)胞細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)細(xì)小的黑色鐵顆粒，標(biāo)記效率為90％；標(biāo)記了SPIO 的人胚胎干細(xì)胞體內(nèi)MRI 成像時(shí)顯示，細(xì)胞移植區(qū)域T2信號(hào)減弱。【關(guān)鍵詞】干細(xì)胞移植；示蹤；超順磁性氧化鐵；磁共振成像；標(biāo)記近些年來(lái)，胚胎干細(xì)胞的研究一直是生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)中的熱點(diǎn)。但是, ESC目前尚不能真正應(yīng)用于臨床治療, 還有許多問(wèn)題亟待解決。本實(shí)驗(yàn)用SPIO標(biāo)記人的胚胎干細(xì)胞，并通過(guò)皮下注射小鼠
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