【正文】 蔥，蒜）步驟：（一）洋蔥根尖的培養(yǎng)（二）裝片的制作制作流程：解離→漂洗→染色→制片: 藥液: 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1 : 1混合液).時(shí)間: 3~: : : 洗去藥液,防止解離過(guò)度,: / / mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~ 5min 目的: 使染色體著色,: 將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,: 使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái),有利于觀察.（三）觀察先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞：細(xì)胞呈正方形，排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。（7）若觀察植物根毛細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)，則對(duì)顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)？視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗一些，可用反光鏡的平面鏡來(lái)采光或縮小光圈。（5）若視野中某細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)方向?yàn)轫槙r(shí)針，則在裝片中該細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)的實(shí)際流動(dòng)方向是怎樣的？仍為順時(shí)針。（3)怎樣加快黑藻細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)速度？最適溫度是多少？進(jìn)行光照、提高水溫、切傷部分葉片；25℃左右。知識(shí)概要：取材 制片 低倍觀察 高倍觀察考點(diǎn)提示：（1)為什么可直接取用蘚類(lèi)的小葉，而不能直接取用菠菜葉？因?yàn)樘\類(lèi)的小葉很薄，只有一層細(xì)胞組成，而菠菜葉由很多層細(xì)胞構(gòu)成。實(shí)驗(yàn)三 觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)材料：新鮮蘚類(lèi)葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細(xì)胞臨時(shí)裝片原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色,球形或橢球形。（9）雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用？先加A液的目的。（7）轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？切片的厚薄不均勻。（4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現(xiàn)混現(xiàn)用？混合后使用；產(chǎn)生氫氧化銅；氫氧化銅不穩(wěn)定。（3)研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？加石英砂是為了使研磨更充分。（2）步驟： 制作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央↓染色（滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）↓制作裝片（滴1～2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片）↓鏡檢鑒定（顯微鏡對(duì)光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒）蛋白質(zhì)的檢測(cè)（1）試劑：雙縮脲試劑（A液：，B液：）（2）步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化(紫色)考點(diǎn)提示：（1）常見(jiàn)還原性糖與非還原性糖有哪些？葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖；淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。分析：因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞€原糖，與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無(wú)還原糖，所以沒(méi)有發(fā)生反應(yīng)。（2）試劑：斐林試劑（甲液：，乙液：），現(xiàn)配現(xiàn)用。實(shí)驗(yàn)一 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布實(shí)驗(yàn)原理：DNA 綠色，RNA 紅色分布：真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中，線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA；RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。裝片不宜久放。滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)生氣泡。同時(shí)，酒精是脂溶性溶劑，可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周?chē)疽?，?0%酒精洗去浮色，吸去酒精。在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液，染色1分鐘。因?yàn)榻輹r(shí)間短，不易切片，浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，組織較軟，切下的薄片不易成形。（二）脂肪的鑒定操 作 方 法 注 意 問(wèn) 題 解 釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片，將薄片放在載玻片的水滴中，用吸水紙吸去裝片中的水。也可用酒精燈對(duì)試管直接加熱。斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時(shí)，生成的Cu(OH)2在70~900C下分解成黑色CuO和水； 甲、乙液分別加入時(shí)可能會(huì)與組織樣液發(fā)生反應(yīng)，無(wú)Cu(OH)2生成。，振蕩。因蘋(píng)果多酚氧化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將產(chǎn)生的顏色掩蓋。五、方法步驟：（一）可溶性糖的鑒定操 作 方 法 注 意 問(wèn) 題 解 釋 。3．做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或雞蛋清。）2．做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)。）三．實(shí)驗(yàn)材料1．做可溶性還原性糖鑒定實(shí)驗(yàn)，應(yīng)選含糖高，顏色為白色的植物組織，如蘋(píng)果、梨。3．蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。2．脂肪可以被蘇丹Ⅲ染液染成橘黃色（或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色）。1．可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu 2O沉淀。2．鹽酸能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)使染色休中的DNA和蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。實(shí)驗(yàn)一：觀察DNA、RNA在細(xì)胞中的分布（必修一P26）一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模撼醪秸莆沼^察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法 二．實(shí)驗(yàn)原理：1．甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對(duì)DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。使用完畢后，取下裝片，轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器，逆時(shí)針旋出物鏡，旋進(jìn)鏡頭盒；取出目鏡，插進(jìn)鏡頭盒，蓋上。（原因：物像移動(dòng)的方向和實(shí)際移動(dòng)玻片的方向相反）6．污點(diǎn)判斷：1）污點(diǎn)隨載玻片的移動(dòng)而移動(dòng)，則位于載玻片上；2）污點(diǎn)不隨載玻片移動(dòng)，換目鏡后消失，則位于目鏡；換物鏡后消失，則位于物鏡； 3）污點(diǎn)不隨載玻片移動(dòng)，換鏡后也不消失，則位于反光鏡上。故裝片不能反放。順序：移裝片→轉(zhuǎn)動(dòng)鏡頭轉(zhuǎn)換器→調(diào)反光鏡或光圈→調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋注：換高倍物鏡時(shí)只能移動(dòng)轉(zhuǎn)換器，換鏡后，只準(zhǔn)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦和反光鏡（或光圈）。側(cè)面觀察降鏡筒→左眼觀察找物像→細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)清晰4．高倍鏡的轉(zhuǎn)換。（找不到物像時(shí)，可重復(fù)一次或移動(dòng)裝片使標(biāo)本移至通光孔中心）。將切片或裝片放在載物臺(tái)上，標(biāo)本正對(duì)通光孔中心。調(diào)節(jié)視野亮度只可用遮光器和反光鏡，光線過(guò)強(qiáng)，改用較小光圈或用平面反光鏡；光線過(guò)弱，改用較大光圈或用凹面反光鏡。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔，選取較大光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。二、顯微鏡的使用：置鏡（裝鏡頭）→對(duì)光→置片→調(diào)焦→觀察1．安放。呈像原理：映入眼球內(nèi)的是倒立放大的虛像。第一篇：高中生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)高中生物實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)一、光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)、呈像原理、放大倍數(shù)計(jì)算方法 結(jié)構(gòu)：光學(xué)部分：目鏡、鏡筒、物鏡、遮光器（有大小光圈）和反光鏡（有平面鏡和凹面鏡）機(jī)械部分：鏡座、傾斜關(guān)節(jié)、鏡臂、載物臺(tái)（上有通光孔、壓片夾）、鏡頭轉(zhuǎn)換器、粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。注：目鏡無(wú)旋轉(zhuǎn)螺絲，鏡頭越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越?。晃镧R有旋轉(zhuǎn)螺絲，鏡頭越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越大。（物鏡質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響成像的清晰程度）放大倍數(shù)：目鏡和物鏡二者放大倍數(shù)的乘積）注：顯微鏡放大倍數(shù)是指直徑倍數(shù)，即長(zhǎng)度和寬度，而不是面積。顯微鏡放置在桌前略偏左，距桌緣8—10cm處，裝好物鏡和目鏡（目鏡5 物鏡10）2．對(duì)光。左眼注視目鏡，同時(shí)把反光鏡轉(zhuǎn)向光源，直至視野光亮均勻適度。選低倍鏡→選較大的光圈→選反光鏡（左眼觀察）3．觀察。轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋（順時(shí)針），俯首側(cè)視鏡筒慢慢下降，直到物鏡接近切片（），左眼觀察目鏡，（反時(shí)針）旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒慢慢上升，看到物像時(shí)輕微來(lái)回旋轉(zhuǎn)細(xì)準(zhǔn)焦，直到物像清晰。．觀察時(shí)兩眼都要睜開(kāi)，便于左眼觀察，右眼看著畫(huà)圖。找到物像后，把要觀察的物像移到視野中央，把低倍鏡移走，換上高倍鏡，只準(zhǔn)用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰，直到物像清楚為止。問(wèn)1：低倍鏡換為高倍鏡后，若看不到或看不清原來(lái)的像，可能原因？（ABC）A、物像不在視野中 B、焦距不在同一平面 C、載玻片放反，蓋玻片在下面 D、未換目鏡 問(wèn)2：放大倍數(shù)與視野的關(guān)系：放大倍數(shù)越小，視野范圍越大，看到的細(xì)胞數(shù)目越多，視野越亮，工作距離越長(zhǎng)； 放大倍數(shù)越大，視野范圍越小，看到的細(xì)胞數(shù)目越少，視野越暗，工作距離越短。5．裝片的制作和移動(dòng)：制作：滴清水→放材料→蓋片 移動(dòng)：物像在何方，就將載玻片向何處移。7．完畢工作。把顯微鏡放正。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布。三．方法步驟： 操作步驟 注意問(wèn)題 解釋取口腔上皮細(xì)胞制片 載玻片要潔凈，%的NaCl溶液 用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞 將載玻片在酒精燈下烘干 防止污跡干擾觀察效果 保持細(xì)胞原有形態(tài)消毒為防止感染，漱口避免取材失敗 固定裝片 水解 將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸溶液中，用300C水浴保溫5min 改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，促進(jìn)染色體的DNA與蛋白質(zhì)分離而被染色 沖冼涂片 用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S 洗去殘留在外的鹽酸 染色 滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色5min 觀察 先低倍鏡觀察，選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域，移至視野中央，調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察 使觀察效果最佳實(shí)驗(yàn)二檢測(cè)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)（必修一P18）一．實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簢L試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類(lèi)、脂肪和蛋白質(zhì)二．實(shí)驗(yàn)原理：某些化學(xué)試劑能使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。如：葡萄糖+ Cu(OH)2葡萄糖酸 + Cu 2O↓（磚紅色）+ H 2O，即Cu(OH)2被還原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。淀粉遇碘變藍(lán)色。（蛋白質(zhì)分子中含有很多肽鍵，在堿性NaOH溶液中能與雙縮脲試劑中的Cu2+作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。（因?yàn)榻M織的顏色較淺，易于觀察。應(yīng)選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實(shí)驗(yàn)前一般要浸泡3~4小時(shí)（也可用蓖麻種子）。四、實(shí)驗(yàn)試劑斐林試劑（包括甲液：：）、蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液、雙縮脲試劑（包括A液：：）、體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液，碘液、蒸餾水。（去皮、切塊、研磨、過(guò)濾）蘋(píng)果或梨組