色譜技術(shù)及相關(guān)設(shè)備講義-展示頁
2025-02-24 02:33本頁面
【正文】 維特 用碳酸鈣填充豎立的玻璃管，以 石油醚 洗脫植物色素的提取液，經(jīng)過一段時(shí)間洗脫之后，植物色素在碳酸鈣柱中實(shí)現(xiàn)分離，由一條色帶分散為數(shù)條平行的色帶。隨著電子技術(shù)和計(jì)算機(jī)技術(shù)的發(fā)展 氣相色譜儀 器也在不斷發(fā)展完善中，到現(xiàn)在最先進(jìn)的氣相色譜儀已實(shí)現(xiàn)了全自動(dòng)化和計(jì)算機(jī)控制，并可通過網(wǎng)絡(luò)實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程診斷和控制。 1958年， Golay首先提出了分離效能極高的 毛細(xì)管 柱氣相色譜法，發(fā)明了玻璃毛細(xì)管拉制機(jī)，從此氣相色譜法超過最先發(fā)明的 液相色譜法 而迅速發(fā)展起來，今天常用的氣相色譜檢測(cè)器也幾乎是在五十年代發(fā)展起來的。1941年， Martin和 Synge采用水分飽和的 硅膠為固定相，以含有乙醇的氯仿為流動(dòng)相分離乙?；?氨基酸 ，他們?cè)谶@一工作的論文中預(yù)言了用氣體代替液體作為流動(dòng)相來分離各類化合物的可能性。液 固色譜的進(jìn)一步發(fā)展有賴于 瑞典 科學(xué)家 Tiselius（1948年 Nobel Chemistry Prize獲得者）和Claesson的努力，他們創(chuàng)立了 液相色譜 的迎頭法和頂替法。由 Tswett的開創(chuàng)性工作，因此人們尊稱他為 色譜學(xué)之父 ，而以他的名字命名的Tswett獎(jiǎng)也成為了色譜界的最高榮譽(yù)獎(jiǎng)。 Tswett俄國 植物學(xué)家關(guān)于色譜分離方法的研究始于1901年，兩年后他發(fā)表了他的研究成果 一種新型吸附現(xiàn)象及其在生化分析上的應(yīng)用，提出了應(yīng)用吸附 原理 分離植物色素的新方法。色譜法1 色譜法的發(fā)展2 色譜法的分類3 色譜法流出曲線及相關(guān)術(shù)語4 色譜法的原理內(nèi)容提要色譜法始于二十世紀(jì)初，經(jīng)歷了整整一個(gè)世紀(jì)的發(fā)展到今天已經(jīng)成為最重要的分離分析科學(xué)，廣泛地應(yīng)用于許多領(lǐng)域，如石油化工、有機(jī)合成、生理生化、醫(yī)藥衛(wèi)生、環(huán)境保護(hù)，乃至空間探索等。第四講 色譜技術(shù)及相關(guān)設(shè)備《 生物儀器分析 》色譜法（ chromatography）又稱 “色譜分析 ”、 “色譜分析法 ”、 “層析法 ”，是一種分離和分析方法，在 分析化學(xué) 、有機(jī)化學(xué)、 生物化學(xué) 等領(lǐng)域有著非常廣泛的應(yīng)用。是利用混合物不同組分在 固定相固定相 和 流動(dòng)相流動(dòng)相 中分配系數(shù) (或吸附系數(shù)、滲透性等 )的差異，使不同組分在作相對(duì)運(yùn)動(dòng)的兩相中進(jìn)行反復(fù)分配，實(shí)現(xiàn)分離的分析方法。 將一滴含有混合 色素 的溶液滴在一塊布或一片紙上，隨著溶液的展開可以觀察到一個(gè)個(gè) 同心 圓環(huán)出現(xiàn)，這種層析現(xiàn)象雖然古人就已有初步認(rèn)識(shí)并有一些簡單的應(yīng)用。三年后，他將這種方法命名為色譜法（ Chromatography），很顯然色譜法 （ Chromatography）這個(gè)詞是由希臘語中 ”色“的寫法（ chroma）和 ”書寫 “(graphein)這兩個(gè)詞根組成的，派生詞有 chromatograph（色譜儀），chromatogram（色譜圖）， chromatographer（色譜工作者）等。色譜法發(fā)明后的最初二三十年發(fā)展非常緩慢。 分配色譜 是由著名的英國科學(xué)家 Martin和 Synge創(chuàng)立的，他們因此而獲得 1952年的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。 1951年， Martin和 James報(bào)道了用自動(dòng)滴定儀作檢測(cè)器分析脂肪酸，創(chuàng)立了 氣 液色譜法 。七十年代發(fā)明了石英毛細(xì)管柱和固定液的交聯(lián)技術(shù)。 ? “色譜法 ” 名稱的由來石油醚 (流動(dòng)相 )碳酸鈣(固定相 )}色譜帶色譜法起源于 20世紀(jì)初， 1906年俄國植物學(xué)家米哈伊爾 氣相色譜和色譜理論的出現(xiàn) 氣相色譜的出現(xiàn)使色譜技術(shù)從最初的定性分離手段進(jìn)一步演化為具有分離功能的定量測(cè)定手段，并且極大的刺激了色譜技術(shù)和理論的發(fā)展。 高效液相色譜 1960年代末科克蘭、 哈伯 、荷瓦斯、莆黑斯、里普斯克等人開發(fā)了世界上第一臺(tái) 高效液相色譜 儀，開啟了高效液相色譜的時(shí)代。 1971年科克蘭等人出版了 《 液相色譜的現(xiàn)代實(shí)踐 》 一書，標(biāo)志著 高效液相色譜法 （ HPLC）正式建立。 包括氣 固吸附色譜和液 固吸附色譜。3 根據(jù)分離機(jī)理可分為:離子交換色譜 離子交換色譜中的 固定相 是一些帶電荷的基團(tuán)，這些帶電基團(tuán)通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結(jié)合。固定相基團(tuán)帶正電荷的時(shí)候，其可交換離子為陰離子，這種離子交換劑為陰離子交換劑；固定相的帶電基團(tuán)帶負(fù)電荷，可用來與流動(dòng)相交換的離子就是陽離子，這種離子交換劑叫做陽離子交換劑 。 當(dāng)分子進(jìn)入色譜柱后，它們中的不同組分按其大小進(jìn)入相應(yīng)的孔徑內(nèi)，大小大于所有孔徑的分子不能進(jìn)入填充劑顆粒內(nèi)部，在色譜過程中不被保留，最早被流動(dòng)相洗脫至柱外，表現(xiàn)為保留時(shí)間較短；大小小于所有孔徑的分子能自由進(jìn)入填充劑表面的所有孔徑，在柱子中滯留時(shí)間較長，表現(xiàn)為保留時(shí)間較長；其余分子則按分子大小依次被洗脫?；€ 是柱中僅有流動(dòng)相通過時(shí)，檢測(cè)器響應(yīng)訊號(hào)的記錄值，即圖 4－ 1中 O— t線．穩(wěn)定的基線應(yīng)該是 一條水平直線 ． 峰高 色譜峰頂點(diǎn)與基線之間的垂直距離，以 h表示，如圖 4－ 1中 B′A 3 區(qū)域?qū)挾? 色譜峰的區(qū)域?qū)挾仁墙M份在色譜柱中譜帶擴(kuò)張的函數(shù)，它反映了色譜操作條件的動(dòng)力學(xué)因素．度量色譜峰區(qū)域?qū)挾韧ǔＳ腥N方法： 標(biāo)準(zhǔn)偏差 σ 即 ，如圖 4－ 1中 EF距離的一半。半峰寬 W1/2因?yàn)檫@種物質(zhì)不被固定相吸附或溶解，故其流動(dòng)速度將與流動(dòng)相的流動(dòng)速度相近．測(cè)定流動(dòng)相平均線速 ū時(shí)，可用往長 L與 t0的比值計(jì)算。F0 5．保留體積 VR 指從進(jìn)樣開始到被測(cè)組份在柱后出現(xiàn)濃度極大點(diǎn)時(shí)所通過的流動(dòng)相體積。F0 6．調(diào)整保留體積 VR′ 某組份的保留體積扣除死體積后，稱該組份的調(diào)整保留體積，即 VR′= V RV0 7．相對(duì)保留值 γ 某組份 2的調(diào)整保留值與組份 1的調(diào)整保留值之比，稱為相對(duì)保留值： 由于相對(duì)保留值只與柱溫及固定相的性質(zhì)有關(guān)，而與柱徑、柱長、填充情況及流動(dòng)相流速無關(guān)，因此，它是色譜法中，特別是氣相色譜法中，廣泛使用的定性數(shù)據(jù)． 必須注意，相對(duì)保留值絕對(duì)不是兩個(gè)組份保留時(shí)間或保留體積之比 。色譜流出曲線上的信息1 根據(jù)色譜峰的個(gè)數(shù)，可判斷樣品所含的最少組份數(shù)。3
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1