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基因工程原理第七章-展示頁

2024-09-26 20:48本頁面
  

【正文】 復(fù)制的能力 ? 可能造成溶解性感染,使宿主細(xì)胞裂解,如SV40,由于宿主細(xì)胞的裂解,實(shí)現(xiàn)的是一種高水平瞬時(shí)表達(dá) ? 可能造成潛伏性感染,從而并不影響宿主細(xì)胞生長(zhǎng),實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,如 EBV和 PBV,其中 EBV載體相對(duì)于 PBV載體復(fù)制更加穩(wěn)定 SV40(猴多瘤病毒 DNA) 病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)載體 ? 外源 DNA分子包入病毒粒子 (通過連接或同源重組的方式插入病毒載體),后者吸附到細(xì)胞表面從而進(jìn)入細(xì)胞 ? 效率很高,而且具有高效復(fù)制與高水平表達(dá)基因的潛能 ? 不僅可用于培養(yǎng)細(xì)胞,也可用于活體細(xì)胞 ? 腺病毒、桿狀病毒、牛痘病毒、 Lentivirus等 可復(fù)制病毒載體與復(fù)制缺陷型病毒載體 ? 當(dāng)轉(zhuǎn)移基因插入到基因組中或它所替換的基因?qū)τ谠谒拗骷?xì)胞中的感染周期不是必需時(shí),載體可以獨(dú)立的增殖,稱為可復(fù)制的或不依賴輔助病毒載體。 顯性選擇標(biāo)記 ? 顯性選擇標(biāo)記:往往來自于細(xì)菌 (外源 ),因此其所提供的表型對(duì)于細(xì)胞來說是全新的,可用于任何細(xì)胞。第七章 動(dòng)物細(xì)胞基因操作 動(dòng)物細(xì)胞基因操作 ? 動(dòng)物細(xì)胞基因操作的必須性 :可進(jìn)行細(xì)菌和真菌細(xì)胞所無法進(jìn)行的真正的翻譯后修飾 ? 載體 1) 非復(fù)制質(zhì)粒載體 2) 帶有病毒復(fù)制子的質(zhì)粒 3) 病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)載體 ? 細(xì)胞:與細(xì)胞本身特性、載體、轉(zhuǎn)移、應(yīng)用相關(guān) ? 轉(zhuǎn)移:轉(zhuǎn)移技術(shù)、瞬時(shí)與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染、共轉(zhuǎn)染 ? 應(yīng)用:細(xì)胞研究、蛋白表達(dá)、體內(nèi)基因治療、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 第一節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞 DNA轉(zhuǎn)移技術(shù) 動(dòng)物細(xì)胞基因轉(zhuǎn)移的途徑 =轉(zhuǎn)基因技術(shù) ? 直接 DNA轉(zhuǎn)移:外源 DNA通過物理轉(zhuǎn)化直接進(jìn)入細(xì)胞 如顯微注射、含 DNA顆粒轟擊、 ? 轉(zhuǎn)染:化學(xué)轉(zhuǎn)
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