植物生化制藥第五章核酸類藥物-展示頁
2025-06-04 12:10本頁面
【正文】 意外后遺癥、中心性血管痙攣性視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、耳聾、耳鳴等有一定療效。當(dāng) DNA濃度在 20200ug/mL時(shí)，光吸收度與 DNA濃度呈正比。 (NH4)MoO4+H2SO4 H2MoO4+(NH4) 2SO4 H3PO4+12H2MoO4 H3P(Mo3O10) 4+12H2O H3P(Mo3O10) 4 Mo2O3 ? MoO3（鉬藍(lán)） 2. 定糖法 Vit ? C RNA中的戊核糖可在鹽酸的水解作用下游離出來，進(jìn)一步形成糠醛，然后與地衣酚反應(yīng)，反應(yīng)物程鮮綠色，在 670nm有最大吸收峰。此法的 優(yōu)點(diǎn)是 RNA和 DNA分開得較為徹底， 缺點(diǎn) 是 RNA中還含有其他含磷化合物，如磷肽，磷酸肌醇等。 2. 堿處理法 將殘留物用 1mol/L的 NaOH溶液于 37 ℃ 處理過夜，則 RNA被堿解為堿溶性核苷酸， DNA不溶解。 第二節(jié) 核酸類藥物的一般制備方法 組織勻漿 沉淀物（ DNA、蛋白質(zhì)等） 上清液（ RNA等） 殘留物（ DNA等） 酸提取液（ RNA） 堿處理 酸處理 殘留物 脂溶性物質(zhì) 有機(jī)溶劑處理 殘留物 酸溶性小分子 冷酸處理 1. 酸處理法 將經(jīng)酸和有機(jī)溶劑處理后的殘留物用 1mol/L的過氯酸液于 4℃ 下處理 18 h，從中抽提出 RNA，沉淀部分再用℃ 下處理 20 min提取 DNA。 一、 RNA的制備 （一）材料的選擇與預(yù)處理 制備 RNA的材料要選擇含核酸量豐富的組織。 核酸 堿基 戊糖 核苷 磷酸 核苷酸 核酸類藥物 是具有藥用價(jià)值的核酸、核苷酸、核苷以及堿基的統(tǒng)稱。 參與細(xì)胞內(nèi) DNA遺傳信息的表達(dá)。 主要 分布于 細(xì)胞質(zhì)（ 90%），剩余 10%位于細(xì)胞核 。第五章 核酸類藥物 第一節(jié) 概述 核酸 是以核苷酸為基本組成單位的生物大分子，攜帶和傳遞遺傳信息。 98%分布于細(xì)胞核 ， 其余分布于核外如線粒體 ， 葉綠體 。 (deoxyribonucleic acid, DNA) (ribonucleic acid, RNA) 脫氧核糖核酸 核糖核酸 攜帶遺傳信息，決定細(xì)胞和個(gè)體的基因型 (genotype)。某些病毒 RNA也可作為遺傳信息的載體。除了天然存在的堿基、核苷、核苷酸外，它們的類似物、衍生物或這些類似物、衍生物的聚合物也屬于核酸藥物。 RNA的含量和細(xì)胞的活躍程度有關(guān)，在蛋白質(zhì)合成旺盛的細(xì)胞中，其核酸的含量也相應(yīng)地較高。 此法的 缺點(diǎn) 是有些材料的 DNA在冷過氯酸抽提時(shí)被少量提取，從而使 RNA部分中混有少量的 DNA。加入過氯酸或三氯乙酸使溶液酸化，至酸濃度為 5%10%,此時(shí)， RNA的分解產(chǎn)物溶解在上清液中， DNA等則被沉淀下來。 （二）提取與純化 1. 提取 （ 1）乙醇沉淀法 （ 2）去污劑處理法 （ 3）酚法 2. 純化 （ 1）密度梯度離心法 （ 2）柱色譜法 （ 3）凝膠電泳法 （三）含量測(cè)定 1. 定磷法 （ 1）核酸樣品用硫酸消化，將有機(jī)磷轉(zhuǎn)化成無機(jī)磷； （ 2）制定定磷標(biāo)準(zhǔn)曲線； （ 3）測(cè)定回收率和樣品總磷量。 二、 DNA的制備 1. 材料的選擇與處理 2. 提取與純化 3. 含量測(cè)定 （ 1）定磷法 同 RNA （ 2）定糖法 又稱二苯胺法，在酸性溶液中，將 DNA與二苯胺共熱，形成藍(lán)色化合物，該化合物在 595nm有最大吸收。 三、核苷酸、核苷及堿基的制備 （一）制備方法 1. 直接提取法 2. 水解法 （ 1）酶水解法 （ 2）堿水解法 （ 3）酸水解法 3. 化學(xué)合成法 4. 酶合成法 5. 微生物發(fā)酵法 光合磷酸化法制備 ATP的工藝流程 5′AMP [ 溶解，混合 ] Na2HPO4， Tris， PMS 肌激酶， ATP（引子） 混合液 反應(yīng)液 ATP粗制品 上清液 濾液 ATP成品 ATP沉淀 洗脫液（含 ATP） 吸附物 流出液 [ 光合 ] 葉綠體 pH3, [ 沉淀 ] 三氯乙酸 10℃ 以下 [ 提取 ] 乙醇 10℃ 45h [ 干燥 ] 乙醇，乙醚 減壓 [ 去陽離子 ] 732樹脂 pH6→1→2 [ 除熱源、沉淀 ] 硅藻土、乙醇 [ 去雜質(zhì) ] 蒸餾水、硅藻土 [ 洗脫 ] NaCl溶液 [ 吸附 ] NaOH， 717樹脂 ATP的藥理作用與臨床應(yīng)用 在生物體內(nèi)， ATP廣泛參與各種生化過程，除參與核酸形成外，主要起著供應(yīng)能量和磷酸基團(tuán)的作用。 第五章 酶類藥物 第一節(jié) 概述 一、酶類藥物發(fā)展簡(jiǎn)史 酶類藥物是直接用各種劑型的酶以改變體內(nèi)酶活力，或改變體內(nèi)某性質(zhì)生物活性物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的數(shù)量等，從而達(dá)到治療某些疾病的目的。 1952年， Innerfield首次將結(jié)晶的胰蛋白酶用于治療血栓性靜脈炎，真正揭開了酶在醫(yī)療應(yīng)用的序幕。 70年代后，開始利用人的某些組織細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和基因工程手段來獲取有關(guān)的酶，
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