現(xiàn)代實驗動物學ppt課件-展示頁
2025-05-21 12:28本頁面
【正文】 ） （ 2）受精卵的準備 （ 3）基因?qū)? （ 4）胚胎移植 （ 5）對幼鼠的鑒定 Timing of PreImplantation events Oviduct Transfers Expression of Exogenous Genes Screening Strategies ? Southerns, ? Induction/Loss of Restriction sites, ? PCR ? RTPCR ? 測定表達產(chǎn)物活性： ELISA， RIA ? 其成功率的高低主要取決于受精卵和胚胎發(fā)育的時間。 （二）轉(zhuǎn)基因動物的制作方法 受精卵雄原核顯微注射法 胚胎干細胞（ ES細胞）法 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法 體細胞核移植法 精子載體法 YAC法 雄原核顯微注射法 ?以單細胞受精卵為靶細胞，利用顯微注射技術(shù)將構(gòu)建好的載體 DNA直接注射入受精卵的原核，再將接受注射的受精卵移入假孕母體輸卵管繼續(xù)發(fā)育獲得轉(zhuǎn)基因動物個體。 ? 到目前為止，人類已獲得轉(zhuǎn)基因魚、鼠、羊、豬、兔、牛等等大小動物。 ? Gordon等人首次成功地將含有 HSV和 SV40DNA片段的重組質(zhì)粒 DNA以顯微注射法導入小鼠受精卵的雄原核內(nèi)，得到了帶有這種外源 DNA順序 TGM。 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法、胚胎干細胞介導法制備的動物第一代均為嵌合體。 ?嚴格說，轉(zhuǎn)基因動物有別于嵌合體。 （一）轉(zhuǎn)基因動物的概念 轉(zhuǎn)基因動物（ transgenic animal）是指以實驗方法導入的外源基因在其染色體基因組內(nèi)穩(wěn)定整合并能遺傳給后代的一類動物?，F(xiàn)代實驗動物學技術(shù) 一、轉(zhuǎn)基因動物 ?轉(zhuǎn)基因動物是動物基因工程在醫(yī)學生物學研究中的突出成果。 ?近十年來，為分子遺傳學、發(fā)育生物學、醫(yī)學遺傳學、腫瘤研究及優(yōu)良經(jīng)濟動物的開發(fā)研究等多方面做出了很大的貢獻。 ?外源基因隨細胞分裂分配到所有子細胞中并遺傳給后代，這種動物叫轉(zhuǎn)基因動物。 ?嵌合體動物（ chimeric animal）： 只有部分組織細胞的基因組中整合有外源基因。雄原核顯微注射法制備的動物第一代中 110%為嵌合體（延遲整合）。 ? 1982年 Palmiter等運用此法得到的所謂“超級巨鼠” ,曾引起整個生物學界的轟動。 ? 從轉(zhuǎn)基因動物所獲得的資料幾乎涉及醫(yī)學遺傳、腫瘤學、免疫學等的基因研究，還涉及生物藥物的研究，基因治療
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