植物細(xì)胞工程復(fù)習(xí)-展示頁
2025-04-26 04:35本頁面
【正文】 椰乳、香蕉汁、番茄汁、酵母提取物、麥芽等）。基本培養(yǎng)基：大量元素、微量元素、維生素和氨基酸，碳源和水。糖：誘導(dǎo)體細(xì)胞胚發(fā)生不可缺的組成分。溶氧：低于一個臨界值（）。水解酪蛋白（5001000mg/L）、酵母提取物（5001000mg/L）、氨基酸等，均還原態(tài)氮。如野生胡蘿卜培養(yǎng)基中只含55mMKNO3，無體細(xì)胞胚發(fā)生，加入5mMNH4Cl，體細(xì)胞胚形成。雙子葉用量是單子葉植物的1/10~1/20，誘導(dǎo)脫分化后需及時降低或去掉2,4D，胚性細(xì)胞才能正常發(fā)育。 影響體細(xì)胞胚形成的因素及調(diào)控。無性系快繁工廠化育苗一般不采用此途徑。（2） 愈傷組織按其形態(tài)結(jié)構(gòu)可分為致密愈傷：細(xì)胞小而致密，質(zhì)地堅(jiān)實(shí)，生長較慢 松散愈傷：細(xì)胞較大，結(jié)構(gòu)較松散，淺色，質(zhì)地松散，生長迅速（3） 誘導(dǎo)培養(yǎng)愈傷組織途徑的優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu) 點(diǎn)a、為細(xì)胞培養(yǎng)提供單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)b、似乎是大規(guī)模繁殖無菌苗的途徑之一C、是植物脫毒培養(yǎng)的一條有效途徑D、繼代培養(yǎng)中可能建立良好的變異系缺 點(diǎn)A、繼代次數(shù)增加，染色體倍性變化，愈傷分化再生苗能力漸衰減至喪失。 外植體在DNA復(fù)制開始后，對光線就不敏感。 綠光（低強(qiáng)度）取外植體→暗培養(yǎng)→ 60％～75％的細(xì)胞進(jìn)入第一次分裂。貯藏7個月，外植體中的RNA含量從8ug→5ug直線下降。培養(yǎng)在2，4—D+酵母汁培養(yǎng)基中， 2x、3x和4x細(xì)胞均脫分化，一周后4x的脫分化占優(yōu)勢。異質(zhì)性細(xì)胞：不同染色體倍數(shù)。（2）生長物質(zhì)的影響 培養(yǎng)基中添加外源植物生長物質(zhì)對細(xì)胞的脫分化起著決定性的作用 。愈傷組織（Callus）：在人工誘導(dǎo)或自然條件下，植物細(xì)胞脫分化，不斷增殖產(chǎn)生的主要有薄壁細(xì)胞構(gòu)成的不定形的組織。再分化通過胚胎發(fā)生途徑或器官發(fā)生途徑實(shí)現(xiàn)。再分化（redifferentiation）： 由脫分化狀態(tài)的細(xì)胞再度分化形成一種或幾種類型細(xì)胞的過程。細(xì)胞全能性(totipotency）：植物細(xì)胞具有該植物有機(jī)體的全部遺傳信息，并具有形成植物有機(jī)體所有細(xì)胞類型，直至發(fā)育成完整植株的能力。利用細(xì)胞的這種全能性，生物學(xué)家通過組培來繁殖名貴花卉、消滅果樹上的病毒，以及通過對細(xì)胞核物質(zhì)的重新組合，進(jìn)行植物遺傳改造等。植物細(xì)胞工程復(fù)習(xí)第二章名詞解釋植物細(xì)胞工程：植物體的細(xì)胞中，含有該植物所有的遺傳信息。在合適的條件下，一個細(xì)胞可以獨(dú)立發(fā)育成完整的植物體。這就是人們常說的植物細(xì)胞工程。脫分化（dedifferentiation）：在離體培養(yǎng)的條件下，已分化的細(xì)胞，失去原有的形態(tài)和機(jī)能，從而形成沒有分化的無組織的細(xì)胞團(tuán)或愈傷組織的過程。包括細(xì)胞分化、組織分化和器官分化等。外植體(explant) ：指切離植物體后用以離體培養(yǎng)的各種接種材料，包括胚胎材料、各種器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。思考題影響脫分化有關(guān)的因子及其作用（１）創(chuàng)傷刺激 （除種子外）離體培養(yǎng)均產(chǎn)生創(chuàng)傷，創(chuàng)傷反應(yīng)與組織培養(yǎng)時脫分化和再分化的時間基本一致，創(chuàng)傷影響細(xì)胞分裂和分化作用，創(chuàng)傷是引起細(xì)胞脫分化的第一個因子。２，４－Ｄ等生長物質(zhì)，能使細(xì)胞脫分化并分裂；生長素＋細(xì)胞分裂素（3）培養(yǎng)細(xì)胞的異質(zhì)性 異質(zhì)性細(xì)胞對培養(yǎng)條件刺激有不同敏感度。如豌豆2x、3x和4x細(xì)胞的外植體（根）培養(yǎng)在含2，4—D培養(yǎng)基中，只二倍體細(xì)胞脫分化分裂。 異質(zhì)性細(xì)胞：不同生理狀態(tài) 菊苣塊莖儲存時間 脫分化所需時間 ?。祩€月 ２０－２４小時 １２個月 ?。叮靶r 發(fā)現(xiàn)脫分化所需時間的長短與細(xì)胞內(nèi)RNA變化有關(guān)。4）光線的影響 光下切菊苣外植體→暗培養(yǎng)→ 35～40％周緣細(xì)胞進(jìn)入第一次細(xì)胞分裂。暗培養(yǎng)最初9～l0小時內(nèi)(DNA開始復(fù)制之前)，光照10～15秒，分裂細(xì)胞的百分率減少一半。 愈傷組織的特點(diǎn)、類型，及走愈傷組織的優(yōu)缺點(diǎn)：（1） 細(xì)胞大而不規(guī)則、生長旺盛、高度液泡化、異質(zhì)性（形狀大小各異）、無明顯極性，沒有次生壁和胞間聯(lián)絲的薄壁細(xì)胞和許多小的分生細(xì)胞群。B、愈傷組織長期培養(yǎng)細(xì)胞常發(fā)生變異，分化再生苗不同于親本，喪失應(yīng)有價值。 外植體經(jīng)哪些途徑可再分化為完整植株。（影響體細(xì)胞胚發(fā)生和發(fā)育的因素）1）生長物質(zhì)：主要是生長素 2,4D→58%雙子葉植物，100%單子葉植物體細(xì)胞胚發(fā)生的誘導(dǎo)階段。如:雙子葉植物枸杞： MS+,4D → callus → 繼代45次→胚性callus → MS →體細(xì)胞胚2）氮源：NH4+N（還原態(tài)氮）有利體細(xì)胞胚發(fā)生。有機(jī)氮促進(jìn)體細(xì)胞胚形成。3）其他因子K+：20mM是野生胡蘿卜胚胎發(fā)生所必需的。活性碳：能提高胡蘿卜體胚發(fā)生的頻率。（4） 外植體供體植物的基因型，外植體的來源和生理狀況（發(fā)育階段），雙子葉植物用下胚軸、子葉和胚等，單子葉植物用莖尖、葉基部和胚等第三章名詞解釋植物組織培養(yǎng)（tissue culture）指在含有營養(yǎng)
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