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轉(zhuǎn)錄基本知識(nxpowerlite)-展示頁

2025-03-02 13:55本頁面
  

【正文】 有攜帶轉(zhuǎn)運氨基酸的作用。 轉(zhuǎn)錄 RNA DNA 二,轉(zhuǎn)錄的分子事件 1,轉(zhuǎn)錄概念 mRNA攜帶了 DNA的遺傳信息,在蛋白質(zhì)合成中作為合成蛋白質(zhì)的模板起傳遞遺傳信息的作用。 在 RNA聚合酶的催化下 , 以一段 DNA鏈為模板合成RNA, 從而將 DNA所攜帶的遺傳信息傳遞給 RNA的過程稱為 轉(zhuǎn)錄 ( transcription) 。如果比值低于 或者 ,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。 A260/A280和 A260/A230 : 是核酸純度的指示值 ,純度好的 DNA,在 下其比值應(yīng)該在 或 , A260 / A280的比值, 用于評估樣品的純度, 因為蛋白的吸收峰是 280 nm。 比值 = 50%蛋白質(zhì) /DNA溶液 A230nm ,是碳水化合物最高吸收峰的吸收波長,比值可進行核酸樣品純度評估: 純 DNA和 RNA的 A260/A230比值為 。 A280nm 是蛋白和酚類物質(zhì)最高吸收峰的吸收波長,比值可進行核酸樣品純度評估: 純 DNA的 A260/A280比值為 ,純 RNA為 。 : 核苷酸、核酸均可以進行電泳,泳動速度主要由分子大小來決定,因此,電泳是測定核酸分子量的好方法。當(dāng) A= 1時, DNA:50ug/ml, RNA和單鏈 DNA: 40ug/ml,寡核苷酸:20ug/ml。 DNA溶于苯酚而RNA不溶,故可用苯酚來沉淀 RNA。 : 鑒別 DNA和 RNA+濃 HCl RNA → 綠色化合物 DNA → 藍紫色化合物苔黑酚 二苯胺啡啶溴紅(熒光染料)和溴嘧啶都可對 DNA染色,原理是卡在分子中, DNA的離心和電泳顯色可用它們。RNA,粘度由分子長度 /直徑?jīng)Q定, DNA為線狀分子, RNA為線團。 RNA有,有 PI。所以導(dǎo)致他們有以下性質(zhì)上的不同。 在大多數(shù)細(xì)胞中 RNA的含量比 DNA多 5~ 8倍。 構(gòu)。 每一段雙螺旋區(qū)至少需要 4~ 6對堿基對才能保持穩(wěn)定。不配對的堿基區(qū)膨出形成環(huán),被排斥在雙螺旋之外。 2 RNA的分子結(jié)構(gòu) RNA的一級結(jié)構(gòu)主要是由 AMP、 GMP、 CMP和UMP四種核糖核苷酸通過 3‘, 5’磷酸二酯鍵相連而成的多聚核苷酸鏈。 RNA 生物 合成主要內(nèi) 容 一, RNA 基本性質(zhì) 1, RNA 化學(xué)結(jié)構(gòu) 2, RNA 分子結(jié)構(gòu) 3, RNA 種類 及功能 二,轉(zhuǎn)錄的分子事件 1,轉(zhuǎn)錄概念 2,轉(zhuǎn)錄基本特點 3,轉(zhuǎn)錄發(fā)生過程(原核生物真核生物差異): ( 1)轉(zhuǎn)錄的酶與蛋白因子 ( 2)轉(zhuǎn)錄啟動區(qū)域:啟動子 ( 3)轉(zhuǎn)錄的起始,延伸及結(jié)束 4,真核轉(zhuǎn)錄后加工 三: RNA降解 四: RNA轉(zhuǎn)錄應(yīng)用 1, RNA 化學(xué)結(jié)構(gòu) RNA /DNA Structure RNA含有四種基本堿基,即腺嘌呤、鳥嘌呤、胞嘧啶和尿嘧啶。 子代細(xì)胞的生長發(fā)育過程中 , 這些遺傳信息通過 轉(zhuǎn)錄 傳遞給 RNA, 再由RNA通過 翻譯 轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的蛋白質(zhì)多肽鏈上的氨基酸排列順序 , 由蛋白質(zhì)執(zhí)行各種各樣的生物學(xué)功能 , 使后代表現(xiàn)出與親代相似的遺傳特征 。第三章 轉(zhuǎn)錄基本知識 RNA的生物合成 RNA Biosynthesis, Transcription 遺傳信息傳遞的 中心法則 蛋白質(zhì) 翻譯 轉(zhuǎn)錄 逆轉(zhuǎn)錄 復(fù)制 復(fù)制 DNA RNA 生物的遺傳信息以密碼的形式儲存在 DNA分子上 。 細(xì)胞分裂過程中 ,DNA復(fù)制把親代細(xì)胞所含的遺傳信息忠實地傳遞給子細(xì)胞 。 一些 RNA病毒能以自己的 RNA為模板 A為合成 DNA, 稱為逆轉(zhuǎn)錄這是中心法則的補充 。此外 還有幾十種稀有堿基 。 天然 RNA的二級結(jié)構(gòu),一般并不像 DNA那樣 都是雙螺旋結(jié)構(gòu) ,只有在許多區(qū)段可發(fā)生自身回折, 使部分 AU、GC堿基配對 , 從而形成短的不規(guī)則的螺旋區(qū) 。 RNA中雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定因素,也主要是堿基的堆砌力,其次才是氫鍵。 在不同的 RNA中,雙螺旋區(qū)所占比例不同。 3, RNA 種類及功能 RNA按功能不同分為三類,即 信使 RNA(mRNA)、轉(zhuǎn)運 RNA(tRNA)及核蛋白體 RNA(rRNA)。 RNA理化特點 RNA與 DNA最重要的區(qū)別一是 RNA只有一條鏈,二是它的堿基組成與 DNA的不同, RNA沒有堿基 T(胸腺嘧啶),而有堿基 U(尿嘧啶)。 : DNA無,只有酸解離,堿基被屏蔽(在分子內(nèi)部形成了 H鍵)。 : DNA。 : DNA耐堿 RNA易被堿水解。 : 都溶于水而不溶于乙醇,因此,常用乙醇來沉淀溶液中的 DNA和 RNA。 :核酸的 λm= 260nm,堿基展開程度越大,紫外吸收就越厲害。用 A260/A280還可來表示核酸的純度。 紫外分光光度計 A260/A280和A260/A230的含義 A260nm是核酸最高吸收峰的吸收波長,最佳測量值的范圍為 。 如果比值低,表示受到蛋白(芳香族)或酚類物質(zhì)的污染,需要純化樣品。 若比值小于(糖類)、鹽類或有機溶劑污染,需要純化樣品。 純凈的樣品比值大于 ( DNA)或者 ( RNA)。 A230是多肽、芳香基團、苯酚和一些碳?xì)浠衔锏奈舛龋?A230表示樣品中存在一些污染物, 如碳水化合物、多肽、苯酚 等,較純凈的核酸 A260/A230的比值大于 。 經(jīng)轉(zhuǎn)錄生成的 RNA有多種 , 主要的是 rRNA, tRNA,mRNA, snRNA(small nuclear RNA和 HnRNA等 。 tRNA的二級結(jié)構(gòu)最具特色 ,呈三葉草型。 tRNA的三級結(jié)構(gòu)為倒“ L”型,是天然狀態(tài)下的構(gòu)象。核蛋白體是蛋白質(zhì)生物合成的場所。 ? 轉(zhuǎn)錄不需要引物; ? 轉(zhuǎn)錄的忠實性相對弱; ? 轉(zhuǎn)錄首先得到 RNA前體,然后再進行加工轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓?RNA. 2,轉(zhuǎn)錄基本特點
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