ch6-細胞重組與克隆動物-展示頁
2025-01-26 06:10本頁面
【正文】 ☉ 1952年，美國學(xué)者羅伯特 .布里格斯（ Robert Briggs）等，將豹蛙發(fā)育到囊胚期的胚胎細胞做移植試驗，成功獲得可攝食的豹蛙幼體。 ☉ 1938年，德國胚胎學(xué)家漢斯 .施佩曼（ Haus Speman）提出：“在兩棲動物中， 8細胞以前的胚胎具有發(fā)育的全能性”的觀點。 綜合標記法 用大乳膠顆粒標記胞供體（ HPRT） ,去核后得胞質(zhì)體（去核細胞）； 用小乳膠顆粒標記核供（ HPRT＋ ） ,得小細胞（核體）； 胞質(zhì)體（大乳膠顆粒）與小細胞融合成重組細胞； 胞質(zhì)體（大乳膠顆粒）與核供體細胞（小乳膠顆粒、 HPRT＋ ）融合成胞質(zhì)雜種。 融合細胞作放射自顯影，如果胞質(zhì)和胞核都有放射性銀顆粒，而核的顆粒大而深、胞質(zhì)銀粒較細，即為重組細胞。 重組細胞的鑒定方法： 164。 微細胞異核體經(jīng)分裂也是體細胞雜種，是研究基因定位、基因表達的好材料。 圖 61 胞質(zhì)雜種的產(chǎn)生 ☉ 微細胞異核體 (micocell heterokaryons)——由微細胞與完整細胞融合而成。 完整細胞 ——對氯霉素敏感（ CAPS）、但具有BudR抗性（ BudRR ）的小鼠 L細胞亞系。 ☉ 細胞質(zhì)雜種 (cybrib)——由胞質(zhì)體與完整細胞融合而成。外包有質(zhì)膜和少量細胞質(zhì)，在一段時間內(nèi)能合成 DNA和 RNA。能保持細胞的原形，具有除核以外的細胞器，不能合成DNA和 RNA，但能合成蛋白質(zhì)。 1967年發(fā)現(xiàn) CB可以誘導(dǎo)離體培養(yǎng)的小鼠 L細胞去核。 松胞素 B又稱細胞松弛素 B(cytochalasin B,CB)。細胞重組與克隆動物 第六章 一 .細胞重組 二 .細胞核移植 三 .克隆動物 一、細胞重組 ☉細胞拆合 即細胞組分的分離與融合，是指將細胞分為核和質(zhì)兩部分，還包括微細胞的誘導(dǎo)和中期染色體的分離。 ☉誘導(dǎo)核質(zhì)分離和產(chǎn)生微細胞需用特殊的試劑 ——松胞素 B。是一種真菌的代謝產(chǎn)物。 ☉ 胞質(zhì)體 （ cytoplast） 指去核后的細胞。 ☉ 核體（ karyoplast）或稱小細胞（ minicells）， 指細胞分離出來的核。 ☉ 微細胞（ micocells） 秋水仙素將細胞分裂阻滯在中期，細胞不能分裂，一條或幾條染色體組裝成為微核，再用松胞素處理，微核突出細胞膜外，可獲得微細胞。 胞質(zhì)體 ——帶有氯霉素抗性（ CAPR）的小鼠 L細胞的胞質(zhì)體。 胞質(zhì)雜種 ——可以在具有氯霉素和 BudR的培養(yǎng)基中存活。 微細胞只含有單個或幾個染色體，是進行遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移的適宜工具。 圖 62 微細胞的形成（一） 圖 63 微細胞的形成（二） ☉ 重組細胞 (reconstituted cell)——用一種細胞的胞質(zhì)體與另一
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