醫(yī)療保健]細(xì)菌培養(yǎng)的基本技術(shù)-展示頁
2025-01-13 05:02本頁面
【正文】 培養(yǎng)基放入密閉的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，通過加熱使鍋內(nèi)的水沸騰并產(chǎn)生水蒸汽。滅菌是指殺死一定環(huán)境中所有微生物的 細(xì)胞、芽孢和孢子 。本實驗所用的 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 ，應(yīng)用較廣泛，適于芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌等多種細(xì)菌的培養(yǎng)。精品 PPT課件 瀏覽免費 下載后可以編輯修改。 l xh aner2022 實驗原理 根據(jù)某種 細(xì)菌的營養(yǎng)需要而選擇多種原料配制而成的培養(yǎng)基 ，不僅含有這種細(xì)菌生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，還要有 適宜的 pH。 配制好的培養(yǎng)基必須經(jīng)過 滅菌 。對不同的材料，應(yīng)當(dāng)采取不同的滅菌方法。當(dāng)水蒸汽將鍋內(nèi)的冷空氣排盡以后，關(guān)閉排氣閥并繼續(xù)加熱，這時鍋內(nèi)的壓力就會升高， 最終使菌體蛋白質(zhì)凝固變性 ，從而達(dá)到滅菌的目的。 將某種細(xì)菌接種在徹底滅菌的培養(yǎng)基上，經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)后，就能夠得到生長良好的細(xì)菌群體，它們在培養(yǎng)基上會呈現(xiàn)出 一定的形態(tài)特征。 2．了解滅菌的基本原理，以及實驗室中常用的滅菌方法 。 材料用具 芽孢桿菌或金黃色葡萄球菌、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂。 NaCl、 1mol/L的 NaOH溶液、體積分?jǐn)?shù)為75％的酒精溶液、蒸餾水。將稱好的牛肉膏、蛋白胨和 NaCl放入燒杯。當(dāng)牛肉膏和蛋白胨溶化后，加入瓊脂，并繼續(xù)用微火加熱。待瓊脂完全溶化后，補加蒸餾水至100mL。 4．培養(yǎng)基的分裝 按右圖所示，將培養(yǎng)基趁熱分裝到潔凈的試管中，培養(yǎng)基的高度約為試管高度的1/5。 5．加棉塞 培養(yǎng)基分裝完畢以后，在管口上加一個棉塞。加棉塞時，應(yīng)使 棉塞長度的2/3在試管口內(nèi) ，如下圖所示。下列有關(guān)①和②所用棉塞的特點及其作用的說法，正確的是（ ） A、二者用的都是脫脂棉，可以防止水分吸附 B、二者的都不是脫脂棉，有利于水分的吸附 C、②所用的棉塞應(yīng)該比①更緊，以防雜菌污染 D、①所用的棉塞應(yīng)該比②更緊，以防濾液蒸發(fā) D 6．包扎 每 10支試管用線繩捆成一捆，并且在管口外面包上一層牛皮紙，然后，用線繩扎好。高壓蒸汽滅菌鍋的構(gòu)造如右下圖所示。注 意： 滅菌桶內(nèi)的物品不能放得太 擠 ，否則會影響滅菌效果。以兩兩對稱的方式，同時旋緊相 對的兩個緊固螺栓，以防漏氣 。接通電源，當(dāng)壓力 上升到 49kPa時，打開排氣閥 放氣 ，當(dāng)壓 力降到 0時，關(guān)閉排氣閥。 5．當(dāng)鍋內(nèi)的壓力上升到 98kPa時，控制火 力大小，使 壓力維持在 98kPa左右 20min，切斷電源。最后， 將滅菌鍋里的水排放干凈。擱置的長度要合適，使培養(yǎng)基形成的 斜面的長度不超
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