[工學]花藥和花粉培養(yǎng)-展示頁
2024-10-22 19:55本頁面
【正文】 法 無菌花藥 花粉 +碎片混合物 花粉濾液 棄上清，花粉沉淀 離心 收集純凈花粉 104105個 /ml 培養(yǎng) 液培養(yǎng)基 攪拌混合器 級聯(lián)過篩 200轉(zhuǎn) /分 離心 200轉(zhuǎn) /分 液體培養(yǎng)基 液培養(yǎng)基 操作方便，重復性好，可一次處理大量材料，目前廣泛用于油菜、玉米、小麥、大麥等禾谷類作物上 培養(yǎng)方式 ? 固體培養(yǎng) （ 3）花粉培養(yǎng)方法 ? 液體培養(yǎng) 花粉濃縮液 含有 2倍培養(yǎng)密度的花粉懸浮液 固培 40℃ 熔化 等體積 含有單倍培養(yǎng)密度的花粉培養(yǎng)液 薄層 用蠟封 細胞團 平板 培養(yǎng) 花粉平板培養(yǎng)示意圖 平板培養(yǎng)（ plate cultivation method) 平板培養(yǎng)（續(xù)） ? 植板率 = 100% ? Nitsch 等（ 1973）先后將曼陀羅和煙草花粉放在平板上培養(yǎng)，形成了胚，進而分化成單倍體小植株 ? 優(yōu)點：便于對單個細胞標記觀察 每個平板上接種的細胞數(shù)目 每個平板上形成的細胞團數(shù)目 花藥 花粉粒 細胞團 固體培養(yǎng)基 潤濕的濾紙 ? Sharp等（ 1972）培養(yǎng)番茄花粉，形成了細胞無性系 看護培養(yǎng) (nurse cultivation method) 微室懸滴培養(yǎng)法 （ microchamber culture method) 花藥消毒 花藥裂開花粉散落 懸浮液5080粒/滴 蓋玻片 置于凹穴載玻片上 石蠟封片 細胞團 靜置 一夜 收集 懸浮 1 滴 翻轉(zhuǎn) 25℃ 轉(zhuǎn)動 ? Kamega等用此法用甘藍 芥藍的 F1代成熟花粉培養(yǎng)獲得成功 ? 優(yōu)點 便于觀察 ? 缺點 培養(yǎng)基太少，水分易蒸發(fā)，培養(yǎng)基成分會發(fā)生變化，影響花粉細胞進一步發(fā)育 條件培養(yǎng) (conditioned medium method) ? 在合成的培養(yǎng)基中加入失活的花藥提取物，接入花粉進行培養(yǎng) ? 失活花藥的提取物中含有促進花粉發(fā)育的物質(zhì)，有利于花粉培養(yǎng)成功 ? 目前，此法用的較多 花藥 +培養(yǎng)基 取出花藥，沸水，殺死細胞 研碎 離心 上清液無菌過濾 添加入培養(yǎng)基 培養(yǎng) 花粉植株 1周 花粉萌動 液體培養(yǎng) ? 花粉懸浮在液體培養(yǎng)
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