生化分析實(shí)驗(yàn)-圓盤電泳-展示頁
2025-05-24 16:32本頁面
【正文】 中加 10 μl） B： 分別稱取 Acr g； Bis g；加蒸餾水至 10. 0 ml溶解、混勻即可。 圖 1 聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳示意圖 (A為正面 ,B為剖面 ) (1)樣品膠 (2)濃縮膠 (3)分離膠 (4)電極緩沖液 三、試劑的配制： 電極 Buffer的配制 ：每排派一個同學(xué)配一份 樣品溶液，染色液都已由實(shí)驗(yàn)室的老師配好了。實(shí)驗(yàn)六 聚丙烯酰胺凝膠 圓盤電泳分離蛋白質(zhì) 1. 簡述聚丙烯酰胺凝膠聚合的原理，如何調(diào)節(jié)凝膠的孔徑 ? 2. 為什么樣品會在濃縮膠中被壓縮成層？ 3. 為什么在樣品中加含有少許溴酚藍(lán)的 40％蔗糖溶液？蔗糖及溴酚藍(lán)各有何用途？ 4. 上下兩槽電泳緩沖液電泳后，能否混合存放？為什么？ 5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)過程的體會，總結(jié)如何做好聚丙烯酰胺垂直板電泳？哪些是關(guān)鍵步驟？ 6. 如何除去凝膠中過量的 AP？未反應(yīng)的單體如何除去？ 一、目的要求 聚丙烯酰胺凝膠 圓盤電泳原理和技術(shù) 圓盤電泳分離蛋白質(zhì)技術(shù) 二 、 原理 聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳和垂直平板電泳具有相同的原理 。 不連續(xù)： 凝膠孔徑不連續(xù)性；緩沖體系離子成分及 pH值的不連續(xù)性；電位梯度的不連續(xù)性： 三種效應(yīng)： 樣品濃縮效應(yīng)；分子篩效應(yīng)；電荷效應(yīng) 聚丙烯酰胺凝膠垂直平板電泳（左）和圓盤電泳（右）示意圖 它們各有什么不同，各自的優(yōu)缺點(diǎn)是什么？ 垂直平板： 多個樣品在同一塊凝膠上，電泳條件一致－－便于利用各種鑒定 方法
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